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141.
人分裂细胞核抗原基因片段的筛选、测序及对启动子的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
经6.6×105个克隆筛选,从装在λ噬菌体载体Charon30中的人基因库中筛选到了一个含人分裂细胞核抗原(PCNA)基因的克隆。经Southern杂交分析插入基因长约14kb,有较长的5'上游区,但3'端缺少一部分。经亚克隆和测序已确定从5'上游1263bp到3'端与λ载体接点共4969bpPCNA基因片段的核苷酸序列。将PCNA基因启动子核苷酸序列与DNA聚合酶α,拓扑异构酶Ⅱα,胸苷酸激酶基因的启动子进行比较有30%以上同源性,具有“看家基因”特征。在转录起始点的5'上游几百bp的范围内都有与CAT,SP1,E2F,NFHB,Oct1和ATF等转录因子的结合位点相似的核苷酸序列。 相似文献
142.
具有中等毒性的马氏钳蝎神经毒素的纯化和初步晶体学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
运用柱层析技术对产自淅川和常德的马氏钳蝎毒素进行分离纯化,得到8种哺乳动物神经毒素。运用制备型等电聚焦电泳技术,对常德样品中具有中等毒性的蝎神经毒素(BmK5)进一步纯化,获得了高纯度样品。两个产地的蝎毒素BmK5均已经成功地获得了大晶体。空间群均为P212121,晶胞参数分别为:a=38.46埃,b=37.28埃,c=36.97埃(淅川);a=38.44埃,b=37.55埃,c=36.83埃(常德)。对两个产地的晶体分别收集了2.1埃(淅川)和1.62埃(常德)分辨率的衍射数据。 相似文献
143.
本文从含ArgRS306KR基因args306KR的pUC18重组质粒的大肠杆菌TG1转化子中经DEAE-Sephacel和Blue-Sepharose两步柱层析,得到电泳一条带的ArgRS306KR。纯酶的比活为2790单位/毫克。该酶氨酰化和ATP~PPi交换活力的最适pH分别为pH8.3和pH7.5。氨酰化活力对ATP、Arg和tRNA的Km分别为2.6mmol/L、14.0μmol/L和5.0μmol/L:Vmax为7630单位/毫克;koat为9S-1。ATP~PPi交换活力对ATP和Arg的Km分别为8.3mmol/L和99μmol/L;Vmax为16320单位/毫克;kcat为18S-1。 相似文献
144.
反相胶束体系中辣根过氧化物酶的活力和动力学性质 总被引:6,自引:2,他引:4
本文系统研究辣根过氧化物酶在CTAB/H2O/CHC.3-isooctane(1∶1,V/V)反相胶束体系中的催化行为。在一定条件下酶反符合Michaelis-Menten动力学。研究水含量、底物浓度、PH、温度、表面活性剂的浓度等对酶反应的影响,结果表明表面活性剂对酶表现非竞争性抑制作用,高浓度的过氧化氢抑制酶活,最适PH为7.0。在低水含量(W0<5)的胶束体系中保温后,酶的活力发生不可逆的改 相似文献
145.
146.
用蛋白质工程方法改变葡萄糖异构酶最适pH和最适温度 总被引:5,自引:2,他引:3
用寡核苷酸诱导的定点突变方法构建了葡萄糖异构酶基因的突变体(N184D和A198C)。含突变体的重组质粒pTKD-GI1(N184D)和pTKD-GI2(A198c)在E.coliK38菌株中表达,用DEAE-Sepharose FF和Sephacryl S-300HR柱层析分离纯化突变酶。与野生型葡萄糖异构酶比较实验表明:(1)突变酶N184D的最适pH值下降了1个单位;等电点下降了0.6个单位 相似文献
147.
乙肝病毒PreSl片段与乙肝表面抗原羧端的融合表达 总被引:4,自引:0,他引:4
我们利用聚合酶链反应法(PCR)得到了编码乙肝病毒肝细胞受体结合位点PreSl(21 ̄47)的基因片段,并将它分别融合到S基因中相应于第175,188和223位氨基酸残基处。所得到的融合基因插入痘苗病毒表达载体pGJP-5后,在哺乳动物细胞CV-1中进行了暂时表达,对融合蛋白的表达、分泌和抗原性的研究表明,3种融合基因均能表达具有S和PreSl双重抗原性的融合蛋白,但融合位点对表达水平和分泌性质有 相似文献
148.
本文了剑角蝗科窝蝗属1新种:郑氏窝蝗Foveolatacris zhengi,sp.nov。,采自甘肃省南县宝瓶河牧场;并据此对属征作了必要的修订,给出了分种检索表。模式标本保存于陕西师范大学动物研究所。 相似文献
149.
陕西根螨属一新种记述(蜱螨亚纲:粉螨科) 总被引:4,自引:0,他引:4
本文描述根螨属1新种:大蒜根螨Rhizoglyphus allii sp.nov.,模式标本保存在西南农业大学植物保护系。 相似文献
150.
This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among genomic DNA.cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells.DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vector respectively.Fusion GST-Myc and GST-Myn synthesized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-box DNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR.A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA.At least two genomic DNA fragments obtained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone.Significance of the work and of the technique itself as well asidentification of the DNAs are discussed. 相似文献