近十年来鄱阳湖区越冬白鹤种群数量与分布

1998—2010年,该研究采用地面同步调查法在鄱阳湖区64个湖泊开展了越冬白鹤种群监测。结果表明,鄱阳湖区分布有稳定的越冬白鹤种群,鄱阳湖区越冬白鹤种群数量年平均值为(3108±849)只,2002年冬季达到最大值4004只;从2003年开始鄱阳湖区越冬白鹤数量表现出一定的年际波动,但变化幅度较小。共有46个湖泊被记录到有白鹤活动。其中,达到全球白鹤种群数量1%标准以上的湖泊达25个;白鹤数量接近或超过全球白鹤种群数量的40%,即1280只个体以上的湖泊包括鄱阳湖国家级自然保护区内的大汊池、蚌湖和蚕豆湖,以及保护区外的南湖。自然保护区涵盖了越冬白鹤的主要聚集湖泊。分布在自然保护区内的白鹤占鄱阳湖区越冬白鹤种群总数量的(66±27.3)%。保护区外分布的白鹤数量虽然总体呈下降趋势,但仍分布有一定数量的个体。     

气相色谱法测定液相合成蛋氨酸脑啡肽中杂质残留量

测定液相法合成蛋氨酸脑啡肽中三氟乙酸和醋酸的残留含量。应用气相色谱法,程序升温,离子火焰反应检测器,定量测定。结果可见,该法线性范围为0.001～0.08 mg/L,在此浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,方法的检出限为0.0003～0.012 mg/L,测定的回收率为97.2%～101.7%,相对标准偏差<1.09%。所建立的检测方法简便,快速,灵敏度高,重复性好,可应用于检测蛋氨酸脑啡肽中残留醋酸的含量。     

植酸酶phyAm基因结构延伸突变改善酶的热稳定性

将来源于黑曲霉N25的植酸酶基因phyA^m重组于大肠杆菌表达载体pET-30b（＋）,以重组表达载体pET30b-FphyA^e为模板经PCR扩增获得结构延伸突变植酸酶基因phyA^m（在植酸酶基因C端增加了来源于pET-30b-FphyA^m载体上13氨基酸残基）。含突变基因的重组表达载体pPIC9k-phyA^e在GS115酵母中表达。纯化的突变酶pp-NP^e与野生型酶PP-NP^m-8相比：PP-NPA^e的最适反应温度上升了3气,75℃处理10min,热稳定性提高21％,比活力略有提高。最适反应pH为5．6,有效pH范围pH4,6到pH6．6。比未突变酶扩大了0.4单位。     

人类新基因WDR70的克隆及初步研究

运用基于基因组数据库的特定基因同源新基因的克隆策略得到一个人类新基因WDR70 ,该基因编码一个包含 12个WD4 0结构域的蛋白。WDR70的cDNA序列长 2 2 6 6bp ,预测编码蛋白含 6 30个氨基酸 ,理论分子量为 70× 10 3 u ,染色体定位为 17p13.1。以小鼠胚胎为模型进行整体原位杂交 ,结果显示WDR70基因在 8.5d小鼠胚胎中没有表达 ,而在 9.5d和 10 .5d的小鼠胚胎的脑部有特异表达。由此推断该基因对胚胎期脑部的发育有重要的影响。     

开放式空气CO2浓度增高对水稻N素吸收利用的影响

在大田栽培条件下,研究空气中CO₂浓度增高(FACE)200μmol·mol^-1对水稻N素吸收及其利用效率的影响.结果表明,FACE处理使水稻不同生育时期的植株含N率显著下降;由于干物质生产量显著增大,FACE处理使水稻不同生育时期的N素累积量有所提高,但无显著影响;FACE处理能够显著提高移栽后28d、抽穗期以及成熟期单位N素的干物质生产效率、单位N素的籽粒生产效率和显著提高水稻的N素收获指数.高N处理的植株含N率、N素累积量均有所增加,但使N素生产效率呈现下降趋势.     

PRIMORDIAL GERM CELL-DERIVED MOUSE EMBRYONIC GERM (EG) CELLSIN VITRORESEMBLE UNDIFFERENTIATED STEM CELLS WITH RESPECT TO DIFFERENTIATION CAPACITY AND CELL CYCLE DISTRIBUTION

Embryonic germ (EG) cells of line EG-1 derived from mouse primordial germ cells were investigated for theirin vitrodifferentiation capacity. By cultivation as embryo-like aggregates EG-1 cells differentiated into cardiac, skeletal muscle and neuronal cells accompanied by the expression of tissue-specific genes and proteins as shown by RT-PCR analysis and indirect immunofluorescence. In comparison to embryonic stem (ES) cells of line D3 the efficiency of differentiation into cardiac and muscle cells was comparatively low, whereas spontaneous neuronal differentiation was more efficient than in D3 cells. Furthermore, the distribution of cell cycle phases as a parameter for the differentiation state was analysed in undifferentiated EG cells and ES cells and compared to data obtained for embryonic carcinoma (EC) cells of line P19 and differentiated, epithelioid EPI-7 cells. Flow cytometric analysis revealed similar cell cycle phase distributions in EG, EC and ES cells. In contrast, the somatic differentiated EPI-7 cells showed a longer G₁-phase and shorter S- and G₂/M-phases. Together, our results demonstrate that the differentiation state and capacity of EG cellsin vitroresemble that of totipotent ES cells.     

应用PCR产物直接银染测序技术检测大肠癌p53基因点突变

应用PCR-SSCP结合PCR产物直接银染测序技术对24例大肠癌p53基因第5-7外显子进行点突变的研究。结果检出5例(26.7%)阳性,均为错义突变;其中3例为碱基GC到 AT的转换, 1例为GC到TA的颠换,另1例为AT到CG的颠换,后者尚未见报道。突变位点分布在p53基因第141、175、245、248和258位密码子,其中4例发生在CpG位点。本文对p53基因点突变谱的分析为大肠癌的病因学研究提供了科学依据, 并讨论了PCR产物直接银染测序技术的优越性。 Abstract:Mutations in exon 5~7 of p53 were screened in 24 cases of colorectal carcinoma by a combination of PCR-SSCP and PCR-product DNA silver sequencing.The results showed that all 5(26.7%) cases of point mutations detected were missense mutations,including 3 cases of GC to AT transitions,1 case of GC to TA transversion and another case of AT to CG transversion.The latter has not been reported before.The mutations occurred at codons 141,175,245,248 and 258 respectively,and 4 cases of these five mutations occurred at CpG dinucleotides.The analysis of p53 mutation spectra can provide clues to the etiology of colorectal carcinoma.The advantages of DNA silver sequencing are also discussed.     

重组谷糠源过氧化物酶的克隆、表达及逆转结肠癌化疗耐药活性

本课题组前期首次从谷糠中获得具抗肿瘤活性的过氧化物酶FMBP。为了该蛋白质后期在体外的规模化生产,本研究以谷子cDNA为模板,利用基因工程手段构建了pMal-s-FMBP融合质粒,并优化诱导条件进行原核表达与纯化,最终获得纯度大于90 %的具抗肿瘤活性的重组FMBP（Re-FMBP）。研究发现,Re-FMBP可以逆转HCT-8/5-Fu耐药细胞对5-Fu的耐药性,耐药逆转倍数达到9.6倍。通过Annexin V/碘化丙啶双染色流式细胞仪检测显示：Re-FMBP能够诱导HCT-8/5-Fu耐药细胞发生凋亡;通过罗丹明123染色,流式细胞仪检测结果显示,Re-FMBP处理后,HCT-8/5-Fu耐药细胞内的荧光强度增强。说明Re-FMBP能够增加5-Fu药物在HCT-8/5-Fu耐药细胞内的蓄积。结果揭示,Re-FMBP蛋白可通过抑制耐药细胞增殖,诱导耐药细胞凋亡,抑制耐药细胞对5-Fu药物外排功能来增加HCT-8/5-Fu耐药细胞对5-Fu药物的敏感性。因此,谷糠来源的Re-FMBP蛋白可以作为肿瘤化疗辅助药物来开发。     

基于DNA弯曲度的H2A.Z核小体定位与修饰研究

在真核生物染色质中,H2A.Z是高度保守的组蛋白变异体,与转录调控、基因组的稳定性密切相关。为了探讨组蛋白修饰、DNA弯曲度与H2A.Z核小体定位三者之间的关联,在得到实验所测的相关数据后,利用MINE算法并结合皮尔逊相关系数在酵母全基因组的转录起始位点周围探讨了三者间的线性与非线性关系。其中MIC算法可以定量的得出数据之间关联度大小的值,用于衡量数据之间是否存在着关联,而皮尔逊相关系数则用于检查是否为线性关联。结果除了发现大部分组蛋白修饰种类和核小体定位之间存在着线性关联外,还探测到有两种组蛋白修饰数据(H4ac修饰与GCN4修饰)和核小体定位数据之间存在着以往未发现的非线性关系(大致呈正余弦函数),并从数据的生物背景(组蛋白修饰与核小体位置)上探讨了出现非线性现象的原因。