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Crystal structure of the Y52F/Y73F double mutant of phospholipase A2: increased hydrophobic interactions of the phenyl groups compensate for the disrupted hydrogen bonds of the tyrosines. 总被引:3,自引:1,他引:2 下载免费PDF全文
C. Sekharudu B. Ramakrishnan B. Huang R. T. Jiang C. M. Dupureur M. D. Tsai M. Sundaralingam 《Protein science : a publication of the Protein Society》1992,1(12):1585-1594
The enzyme phospholipase A2 (PLA2) catalyzes the hydrolysis of the sn-2 ester bond of membrane phospholipids. The highly conserved Tyr residues 52 and 73 in the enzyme form hydrogen bonds to the carboxylate group of the catalytic Asp-99. These hydrogen bonds were initially regarded as essential for the interfacial recognition and the stability of the overall catalytic network. The elimination of the hydrogen bonds involving the phenolic hydroxyl groups of the Tyr-52 and -73 by changing them to Phe lowered the stability but did not significantly affect the catalytic activity of the enzyme. The X-ray crystal structure of the double mutant Y52F/Y73F has been determined at 1.93 A resolution to study the effect of the mutation on the structure. The crystals are trigonal, space group P3(1)21, with cell parameters a = b = 46.3 A and c = 102.95 A. Intensity data were collected on a Siemens area detector, 8,024 reflections were unique with an R(sym) of 4.5% out of a total of 27,203. The structure was refined using all the unique reflections by XPLOR to a final R-factor of 18.6% for 955 protein atoms, 91 water molecules, and 1 calcium ion. The root mean square deviation for the alpha-carbon atoms between the double mutant and wild type was 0.56 A. The crystal structure revealed that four hydrogen bonds were lost in the catalytic network; three involving the tyrosines and one involving Pro-68. However, the hydrogen bonds of the catalytic triad, His-48, Asp-99, and the catalytic water, are retained. There is no additional solvent molecule at the active site to replace the missing hydroxyl groups; instead, the replacement of the phenolic OH groups by H atoms draws the Phe residues closer to the neighboring residues compared to wild type; Phe-52 moves toward His-48 and Asp-99 of the catalytic diad, and Phe-73 moves toward Met-8, both by about 0.5 A. The closing of the voids left by the OH groups increases the hydrophobic interactions compensating for the lost hydrogen bonds. The conservation of the triad hydrogen bonds and the stabilization of the active site by the increased hydrophobic interactions could explain why the double mutant has activity similar to wild type. The results indicate that the aspartyl carboxylate group of the catalytic triad can function alone without additional support from the hydrogen bonds of the two Tyr residues. 相似文献
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湘中、湘东地区早籼稻耐土壤潜育性评价 总被引:2,自引:0,他引:2
我国南方稻区的主要低产稻田是潜育性稻田,约有一亿亩。挖掘其“潜在生产力”,种植耐潜育性土壤逆境胁迫能力较强的水稻品种,则是简便、经济而有效的重要途径之一。本文就几个早籼稻品种(组合)对潜育性稻田的生态适应性进行了较系统的观测,并初步提出了耐潜育性的几个鉴定指标,诸如根系生长量和幼穗分化期根系氧化力;分蘖早期茎蘖增长速率;分蘖后期单株干物质产量;乳熟期剑叶片过氧化氢酶活性GDI和光合强度等。上述鉴定指标,综合应用于水稻品种生态适应性和耐潜育性育种研究,有助于提高水稻抗逆性育种的效率。 相似文献
106.
神农架豆科植物的分布及其区系特点 总被引:1,自引:0,他引:1
江明喜;金义兴;黄汉东;陈海芳 《武汉植物学研究》1992,10(1):18-24
神农架位于湖北西部,素有“华中第一峰”之称,最高海拔3105米。神农架有豆科植物31属56种(不包括栽培种),其中,乔木10种,灌木19种,草本22种和藤本5种。在温带常绿针叶林带内有2种生长,有28种分布在暖温性落叶阔叶和针叶混交林带,52种分布在亚热带落叶阔叶和常绿阔叶混交林带。其中,只有紫云英1种在三个带内都有分布,24种可跨两个分布带。在区系成分中,中国-日本成分16种,中国特有种21种,温带亚洲成分5种,欧亚成分4种,北温带成分3种,热带亚洲成分3种,热带亚洲和热带非洲成分1种,东亚-北美成分1种,西亚至东亚成分1种,中国-喜马拉雅成分1种。神农架豆科植物区系特点是:种类较丰富,成分复杂,特有种多,具明显的过渡特色。 相似文献
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前言在我国海涂中被日潮淹没的中、低潮带,天然生长的高等植物种类比较贫乏,分布面积也较小,许多中低潮带海滩为光滩裸地。为了绿化海滩、保护海滩,提高海滩生态系统的初级生产力,我国在1963年和1978年分别从英国 相似文献
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