Investigation of the in vitro biotransformation and simultaneous enantioselective separation of thalidomide and its neutral metabolites by capillary electrophoresis

Reversed-phase liquid chromatography is a long established method for the analysis of drug metabolism. The current investigation demonstrates that micellar electrokinetic capillary chromatography can be an attractive alternative. Two methods were developed using sodium dodecyl sulfate and hexadecyltrimethylammonium bromide for the determination of possible hydroxylated metabolites of the former sedative drug thalidomide (Contergan) in order to study the in vitro metabolism of the drug by incubation with rat liver microsomes. The biotransformation was found to be stereoselective: S-(−)-thalidomide mainly formed 5-hydroxythalidomide, whereas R-(+)-thalidomide was preferentially transformed to two metabolites tentatively assigned to be diastereomers of 5′-hydroxythalidomide.Furthermore, the simultaneous enantioseparation of thalidomide and two of its possible hydroxylated metabolites was achieved using capillary electrophoresis with negatively charged carboxymethyl-β-cyclodextrin. The dependencies of the selectivity of the enantioseparation on the concentration of the chiral additive and the pH of the run buffer were investigated.     

Solvation study of the non-specific lipid transfer protein from wheat by intermolecular NOEs with water and small organic molecules

Intermolecular nuclear Overhauser effects (NOEs) were measured between the protons of various small solvent or gas molecules and the non-specific lipid transfer protein (ns-LTP) from wheat. Intermolecular NOEs were observed with the hydrophobic pocket in the interior of wheat ns-LTP, which grew in intensity in the order cyclopropane (saturated solution) < methane (140 bar) < ethane (40 bar) < acetonitrile (5% in water) < cyclohexane (saturated solution) < benzene (saturated solution). No intermolecular NOEs were observed with dioxane (5% in water). The intermolecular NOEs were negative for all of the organic molecules tested. Intermolecular NOEs between wheat ns-LTP and water were weak or could not be distinguished from exchange-relayed NOEs. As illustrated by the NOEs with cyclohexane versus dioxane, the hydrophobic pocket in wheat ns-LTP preferably binds non-polar molecules. Yet, polar molecules like acetonitrile can also be accommodated. The pressure dependence of the NOEs between methane and wheat ns-LTP indicated incomplete occupancy, even at 190 bar methane pressure. In general, NOE intensities increased with the size of the ligand molecule and its vapor pressure. NMR of the vapor phase showed excellent resolution between the signals from the gas phase and those from the liquid phase. The vapor concentration of cyclohexane was fivefold higher than that of the dioxane solution, supporting the binding of cyclohexane versus uptake of dioxane.     

Über den Licht- und Schattenreflex von Mya arenaria

Zusammenfassung Wird eine Intensität, an die Mya adaptiert ist, für einige Sekunden vermindert und dann wieder auf die alte Höhe gebracht, so benötigt Mya 5 Min., um sich an die Ausgangsintensität zurückzuadaptieren.Es ist damit zu rechnen, daß etwa 70% aller Beschattungen eine Reaktion zeitigen. Das Auftreten oder Fehlen der Reaktion steht nicht in Zusammenhang mit der Länge der Zeit, während der das Tier an die Ausgangsintensität adaptiert wurde, wenn diese Zeit länger als die eigentliche Adaptationszeit ist. Auf Beschattung reagiert Mya in der Regel durch Einschlagen oder Einziehen der an den Siphoöffnungen befindlichen Tentakel, auf Belichtung mittels einer Siphokontraktion. Die biologische Bedeutung dieser beiden Reaktionsweisen wird zu erklären versucht.Die Unterschiedsschwellen für Belichtung und Beschattung fallen annähernd in die gleiche Größenordnung, auf Intensitätserhöhung reagieren die Tiere um ein Geringes empfindlicher. Die Muscheln sprechen im. Durchschnitt auf eine Intensitätsverminderung um 59,35% des Anfangsbetrages gerade eben noch an, während eine Erhöhung um das 1,05fache des Anfangsbetrages als durchschnittliche Unterschiedsschwelle des Licht-reflexes anzusehen ist.Die minimalen Beschattungszeiten und die Latenzzeiten des Schatten-reflexes sind wesentlich kürzer als die minimalen Expositionszeiten und Latenzzeiten des Lichtreflexes unter entsprechenden Bedingungen.Setzt man die Muscheln einer Kombination zweier Lampen aus, von denen jede stets die gleiche Intensität hat, während die Farbe der einen Lampe gewechselt werden kann, und mißt nun die Reaktionszeiten bei Auslöschen des farbigen Lichtes, so ergeben sich bei den verschiedenen Farben verschiedene Reaktionszeiten. Die kürzeste Reaktionszeit fanden wir bei Auslöschen gelben Lichtes. Im Gelb ist also das Absorptions-maximum der den Schattenreflex bedingenden photosensiblen Substanz, in einem anderen Spektralbereich also als das des den Lichtreflex bestimmenden Stoffes.Alle diese Tatsachen führten uns zu der Schlußfolgerung, daß die für den Schatten- und Lichtreflex von Mya verantwortlich zu machenden Rezeptoren miteinander nicht identisch sind.Die Reaktionszeit des mechanischen Reizes verkürzt sich mit steigender Reizstärke. Mechanischer Reiz und ein (an sich zeitlich unterschwelliger) Lichtreiz können sich summieren, was sich in einer Verkürzung der Reaktionszeit zeigt.     

Untersuchungen über osmophile Sproßpilze

Ohne Zusammenfassung     

Errors in determining the flow rate of Hirst-type pollen traps

Standardisation of methods of pollen monitoring networks is vital for data quality. In pollen monitoring networks in Europe, the Hirst-type trap is standard. Hirst traps are calibrated with handheld rotameters. We detected a systematic error in the flow rate calibrated by these standard handheld rotameters. We measured the flow rate of 19 Hirst traps from three commercial brands during calibration but also during monitoring. We used three different rotameters supplied by the manufacturers of the traps, respectively. The actual air flow rate was measured using an electronic heat anemometer with negligible air flow resistance. After calibration to 10 l/min, the rotameter was removed, which led to a significant increase in the flow rate in the range of 10.5–17.2 l/min, a systematic error between 5 and 72%. No significant difference was found between the different commercial trap brands. The analysis revealed that the error depended on the type of the rotameter and the individual trap. The error may be explained by the additional air flow resistance of each rotameter. The total resistance of the system—trap plus rotameter—is higher during calibration when the rotameter is held on the inlet compared to the routine monitoring without the rotameter. Depending on the characteristic curve of the suction pump in the trap (fan), the air flow rate increases to values considerably higher than 10 l/min. Thus, monitoring is done under a higher flow rate than that was calibrated. In order to obtain comparable data within a monitoring network, a solution for correction of this systematic error seems advisable, preferably in cooperation with the manufacturers.     

Vergleichende Untersuchung der Salz-, Trocken- und Strahlensukkulenz bei einigen Wild- und Kulturpflanzen

Ohne Zusammenfassung     

Cholinesteraseaktivität im glatten Penisretraktormuskel der Weinbergschnecke Helix pomatia L.

Zusammenfassung Die Oberfläche der glatten Muskelfasern des Penisretraktors von Helix pomatia L. weist eine starke Cholinesteraseaktivität auf. Die Cholinesterase der äußeren Ringmuskelschicht spricht besonders gut auf Butyrylthiocholin-Jodid, die der inneren Längssuskulatur besser auf Acetylthiocholin-Jodid an. Doch treten auch in der längsverlaufenden Muskulatur Stellen — wahrscheinlich Nerven — auf, deren Cholinesterase bevorzugt Butyrylthiocholin-Jodid spaltet.

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Summary The surface of the smooth muscle fibers of the Helix pomatia L. penisretractor shows a high cholinesterase activity. The cholinesterase of the outer ring-muscle-layer responds specially well to butyrylthiocholine-jodid, but the one of the longitudinal-muscle-layer responds better to acetylthiocholine-jodid. In the latter, however, we find also spots, possibly nerves, the cholinesterase of which preferably splits butyryl-thiocholin-jodid.

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Auf Anregung von Herrn Prof. Schlote; mit Unterstützung durch die Deutsche Forshungsgemeinschaft und die Göttinger Akademie der Wissenschaften.     

Major histocompatibility complex class II polymorphisms in humans and chimpanzees

Allelic variation at the MhcPatr-DR and -DQ loci was studied by molecular biological techniques and compared to available HLA data. With regard to the number of allelic lineages, the chimpanzee shows a condensation of its major histocompatibility complex (MHC) class II repertoire as compared to humans. This does not have an impact on the overall degree of MHC class II polymorphism in the chimpanzee since a few lineages that are oligomorphic in humans display an extensive degree of polymorphism in the chimpanzee.