中西医结合治疗蝮蛇咬伤急性肾功能衰竭18例临床体会

我院 1 994～ 1 998年间共收治蝮蛇咬伤病人465例 ,其中发生急性肾功能衰竭 ( ARF)者 1 8例 ,占 3.8%,以 ARF为起因导致死亡者 4例 ,占死亡人数的 80 %,可见 ARF是蝮蛇咬伤病人最凶险的并发症。近年来 ,我们采用中西医结合方法预防、治疗 ARF取得满意的疗效 ,现报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组病人根据典型症状、体征及对蛇形态描述 ,均明确诊断为蝮蛇咬伤。既往均无肾脏病史 ,符合 BUN>1 4.3mmol/L、 Cr>1 76μmol/L的 ARF诊断标准。按 1 987年第三届全国蛇伤学术会议制定的《毒蛇咬伤临床病情分型标准》,均属危型。其…     

人类主要Cyclins在MOLT-4细胞阻断动力学下的表达规律

细胞周期素与相应的细胞周期素依赖性蛋白激酶相结合,驱动着细胞通过细胞周期各时相,而细胞周期素时相性规律大多来自酵母研究或同步化细胞的分析。本研究着重于人类非同步化细胞的细胞周期素时相性规律的揭示。采用人类白血病细胞株MOLT-4,使其处于对数生长期,加以有丝分裂中期阻滞法,应用多参数流式细胞术分析人类主要细胞周期素B1、A和E。分析发现,细胞周期素B1峰值在M期,降解于M期后,细胞周期素A峰值在G2期,降解于M期,细胞周期素E峰值在G1晚期,降解于S期。以上结果,使我们首次在人类非同步化培养细胞展现了主要细胞周期素的时相性表达规律。     

花粉管介导的转bar基因水稻植株的获得及其遗传

采用花粉管通道法将bar基因导入籼稻品系E32,得到对除草剂Basta具有抗性的转基因水稻。遗传分析表明外源bar基因在受体植株后代中呈单基因显性遗传,在世代间可以稳定遗传。目前已分离出抗性稳定的株系。     

3S技术在哈尔滨市郊景观生态规划中的应用

利用哈尔滨市遥感数据资料,在RS、GIS 和GPS技术支持下,获取哈尔滨市郊景观格局现状及哈尔滨数字高程模型(DEM).选取平均斑块面积、景观优势度、平均坡度、平均海拔和破碎度因子对其进行综合分析,并借助 DEM 模型进行景观生态规划.结果表明,3S技术为典型景观类型的确定提供了科学依据;建立了市郊景观类型数据库,并生成景观类型专题图;土地利用现状和景观空间分布以及地形地貌和土地利用类型相结合.DEM和遥感影像的叠加,从大尺度上定性刻画市郊的景观生态规划,而景观生态规划和DEM 的叠加,更加直观地反映了市郊的景观结构,为提高区域生态功能,促进城乡一体化的健康发展提供科学依据.     

石榴种皮木质素合成相关转录因子基因PgMYB的克隆与表达

为初步探讨石榴(Punica granatum L.)籽粒硬度产生机理及转录因子基因PgMYB在石榴种皮木质素生物合成途径中的作用,测定了不同石榴品种籽粒硬度及种皮总木质素含量并分析两者关系,利用RT-PCR结合RACE技术,克隆了‘红玉石籽’石榴的1个MYB转录因子基因(PgMYB),通过实时荧光定量PCR技术分析了PgMYB的相对表达量。结果表明:(1)石榴籽粒硬度与种皮总木质素含量呈显著正相关关系,相关系数为0.906。(2)PgMYB基因cDNA全长1 088bp,开放阅读框921bp,编码蛋白由306个氨基酸组成,N端具有2个MYB DNA结合结构域,是植物中一个典型的R2R3-MYB转录因子;同源分析显示,该基因编码的氨基酸序列与银合欢的MYB1和拟南芥的MYB4一致性分别高达89%和84%。(3)在不同籽粒硬度石榴品种中PgMYB的表达与籽粒硬度和种皮总木质素含量呈负相关关系。(4)在石榴各个发育时期中,PgMYB表达与种皮总木质素含量同样呈负相关关系。推测该基因可能抑制石榴种皮总木质素的生物合成。     

AdEasy重组腺病毒系统对Ad-HIF1α的构建和鉴定

目的:采用AdEasy重组腺病毒系统构建重组腺病毒Ad-HIF1α并进行鉴定。方法:使用高保真PCR从EST克隆中扩增HIF1α基因编码区,并用限制性内切酶BamH I和Xba I对PCR片段限制性酶切,用T4 DNA连接酶将其连接至同样经BamH I和Xba I限制性酶切的穿梭载体pAdtrace-TO4,构建穿梭载体pAdtrace-HIF1α;将pAdtrace-HIF1α与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在细菌BJ5183中同源重组,得到重组腺病毒质粒pAd-HIF1α;pAd-HIF1α经Pac I酶切后转染至E1表达包装细胞系HEK293中进行HIF1α基因表达腺病毒包装,重复扩增,氯化铯密度梯度离心法纯化,获得高滴度Ad-HIF1α;感染干细胞株C3H10T1/2,通过荧光蛋白的表达了解其感染效率,并应用PCR及Western blot验证目的基因的表达,并通过检测下游靶基因VEGF的表达,了解该载体表达的目的蛋白的生物活性。结果:重组腺病毒质粒pAd-HIF1α,经PCR及酶切分析验证构建正确;在HEK293中进行HIF1α基因表达腺病毒包装,经反复冻融4次使细胞裂解,获得高滴度重组腺病毒载体;通过红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)表达,观察到Ad-HIF1α能够高效感染C3H10T1/2细胞,并通过PCR证实了HIF1α在C3H10T1/2细胞较对照组明显高表达;在感染Ad-HIF1α的C3H10T1/2细胞中,HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达明显增高,证实表达的目的蛋白具有生物活性。结论:应用AdEasy重组腺病毒系统成功构建Ad-HIF1α,并证实其具有生物活性,为后续研究奠定了基础。     

貂源沙门菌血清型调查及其对小鼠的致病性

采用选择性培养、生化鉴定、血清型鉴定等方法,对从53份水貂病料中分离的35株沙门菌（Salmonella）进行了鉴定,分离率66.04%（35/53）,其中34株为肠炎沙门菌（Salmonella enteritidis,Se）,分别命名为Se-SD-1~Se-SD-34,1株为鼠伤寒沙门菌（S.typhimurium,St）,命名为St-SD-1,这表明沙门菌在山东省诸城市水貂群中流行。采用PCR方法对35株沙门菌的10个毒力基因检测,结果invA和mgtC的携带率为100%（35/35）,sopE和tolC 97.14%（34/35）,stn 94.29%（33/35）,avrA 88.57%（31/35）,spiA 82.86%（29/35）,hilC 68.57%（24/35）,spvB 62.86%（22/35）和pefA 42.86%（15/35）,毒力基因在不同菌株的分布不同。对阿莫西林等11种药物敏感性试验结果表明,35株水貂沙门菌存在不同程度的耐药,34株Se普遍耐药,其中对新霉素的耐药率最高（15/34）,并存在对多种药物耐药现象,1株St耐药不严重,仅对四环素耐药。基于血清型、毒力基因检测结果,选取了Se-SD-1和St-SD-1作为代表性菌株,以小鼠为实验动物,进行了致病性研究。结果表明,Se-SD-1和St-SD-1均可引起小鼠发病,死亡率与接种剂量相关。该研究丰富了水貂沙门菌病的研究数据。有必要进一步开展水貂沙门菌的病原学和流行病学监测,具有重要的公共卫生学意义。     

遂宁地区良性前列腺增生术后LUTS相关危险因素分析

目的:调查与分析遂宁地区良性前列腺增生术后下尿路症状(Lower Urinary Tract Symptoms,LUTS)发生的相关危险因素。方法:2014年9月到2019年10月选择在遂宁市中心医院诊治的遂宁地区良性前列腺增生症患者172例,所有患者都给予手术治疗,记录术后LUTS发生情况,调查患者的临床资料并进行影响因素分析。结果:在172例患者中,术后平均国际前列腺症状评分量表(International prostate symptom scores,IPSS)评分为5.67±0.13分,其中储尿期症状评分3.01±0.11分,排尿期症状评分为1.76±0.22分,排尿后症状评分0.89±0.14分,发生LUTS 18例(LUTS组),发生率为10.5%。LUTS组的生活质量评分高于非LUTS组(P<0.05);LUTS组的年龄、体重指数、低密度脂蛋白、总胆固醇、前列腺体积与非LUTS组对比差异有统计学意义(P<0.05);Pearson分析显示年龄、体重指数、低密度脂蛋白、总胆固醇、前列腺体积都与LUTS存在相关性(P<0.05);二元Logistic回归分析显示年龄、体重指数、低密度脂蛋白、总胆固醇、前列腺体积都为导致LUTS发生的主要因素(P<0.05)。结论:遂宁地区良性前列腺增生术后LUTS的发生比较常见,可严重影响患者的生活质量,年龄、体重指数、低密度脂蛋白、总胆固醇、前列腺体积都为导致LUTS发生的主要因素。     

低氧经mTOR/4E-BP1和FoxO1/Atrogin-1通路影响骨骼肌蛋白质积累

低氧暴露对骨骼肌蛋白质合成/分解的影响受到广泛关注,但该过程中相关调控通路的研究仍十分有限。本研究拟通过蛋白质相对积累量来研究合成和分解通路的变化。将骨骼肌细胞置于低氧环境中培养,分别在0 h、6 h、12 h和24 h收集细胞,并进行检测。免疫荧光观察肌球蛋白(myosin),翻译表面感应检测蛋白质合成,Western印迹法测试蛋白质合成相关基因(ERK1/2、p-ERK1/2、mTOR、p-mTOR、4E-BP1、p-4E-BP1)、蛋白质分解相关基因(泛素、FoxO1、p-FoxO1、MuRF1和Atrogin-1)表达量。结果发现,随着低氧干预时间延长,肌纤维直径和骨骼肌细胞中蛋白质相对积累量随时间逐渐减小(P<0.01)。与0 h相比,6 h p-4E-BP1/4E-BP1和Atrogin-1的表达显著上调(P<0.05),p-mTOR表达显著高于0 h(P<0.01);6 h和24 h p-mTOR/mTOR的比值显著大于0 h(P<0.05),而p-FoxO1/FoxO1的比值随时间逐渐减小(P<0.01)。上述结果表明,低氧干预能够使骨骼肌细胞直径减少、骨骼肌细胞蛋白质积累减少,并且低氧打破骨骼肌细胞蛋白质合成和分解的平衡,可能是通过调节mTOR/4E-BP1通路活性和FoxO1/Atrogin-1通路的活性实现的。