一个未知的子宫雌激素反应蛋白ULF-250的鉴定研究

摘要 鉴定一个未知的子宫雌激素反应蛋白（ULF-250）。去卵巢大鼠补充给予雌二醇造成子宫产生大量宫腔液（ULF）,受雌激素调节的蛋白分泌其中。收集ULF分别进行SDS-PAGE和双向电泳（2-DE）分离;通过Western 和2D-Western确认抗ULF-250抗体识别的蛋白成分并与凝胶上的条带或斑点相对应;对目标蛋白分别用MALDI-TOF-MS和HPLC-ESI-MS/MS两种方法进行质谱分析并获得肽段序列数据;与蛋白数据库比对及文献检索鉴定未知蛋白。2D-Western显示抗ULF-250抗体特异识别的蛋白成分。从2D胶上切下对应的蛋白斑点进行MALDI-TOF-MS。 结果提示：ULF-250是ebnerin/DMBT1。另外,经SDS-PAGE分离的250 kD蛋白条带进行液-质联用分析。结果同样提示：ULF-250是ebnerin/DMBT1。与文献报道比较,ULF-250与ebnerin/DMBT1在子宫的组织定位和调节是相同的。因此,我们认为ULF-250是子宫表达的ebnerin/DMBT1。通过2-DE结合质谱分析以及查阅文献确认未知的雌激素反应蛋白ULF-250是ebnerin/DMBT1。此外,我们的研究提示,该蛋白不仅在子宫上皮细胞表达而且分泌到子宫腔液中,其功能值得进一步研究。     

秦岭川金丝猴一个投食群等级关系的研究

2002年7月至2003年6月,采用焦点动物取样法和全事件记录法对秦岭山脉周至国家级自然保护区玉皇庙西梁川金丝猴投食群一雄多雌社会单元内部和社会单元间的攻击和屈服行为的指向和次数进行记录,应用计算优势指数的方法对社会单元内不同性别年龄组和社会单元间的等级进行排列。结果表明,在每一个社会单元内部成年雄性居最高地位,所有成年雌性占有第二阶层,亚成体处于第三阶层,青少年个体处于最低层。每个社会单元内成年雌性在一年内的等级序列并不是固定不变的,一般是雌性在产仔后顺位明显上升。八个社会单元在交配阶段和产仔阶段等级结构不同,等级最高的社会单元以及等级最低的社会单元的等级顺序没有发生变化,等级接近的社会单元间的等级顺序发生变化,其变化的原因可能主要与社会单元内部成员相互协作进行攻击有关。     

小鼠心脏神经嵴细胞的体外培养及其生物学特性

目的体外培养和鉴定心脏神经嵴细胞,探讨其生物学特性。方法取8·5d小鼠胚胎枕中部至第3体节神经管,组织块法无血清条件培养获心脏神经嵴细胞,采用转录激活因子2α(AP-2α)作为其生物学标记物,观察其迁移、分化等生物学特性。结果从胎鼠神经管中分离培养的细胞AP-2α表达阳性,具有迁移特性,传代后以含血清培养基培养后能自然分化成神经元和神经胶质细胞。结论体外培养可成功获得心脏神经嵴细胞,且具有迁移特性和多向潜能分化能力。     

Reverse ChIP:研究DNA-蛋白质相互作用的新方法

反向染色质免疫共沉淀技术(reverse chromatin immunoprecipitation assay,Reverse ChIP)是一种在体内状态下分析DNA-蛋白质相互作用的新方法.它用特异的核酸探针捕获靶DNA片段及与其相结合的蛋白质,蛋白质用质谱仪检测,以达到确定靶DNA位点全部相关蛋白质的目的.其可对靶DNA位点相关蛋白质进行全面、系统地鉴定,特别是寻找已知DNA元件相应的调节蛋白.在发现、鉴定靶DNA位点相关蛋白质和研究DNA-蛋白质相互作用中有重要应用价值.     

P-LISA技术

原位邻近式连接分析(proximity ligation in situ assay,P-LISA)是一种用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的新方法。该方法能够对原位、瞬时、微弱的蛋白质-蛋白质相互作用进行定量分析和亚细胞定位,在药物研发和临床诊断中将有着重要的应用价值。     

失血性休克后IL—1活性变化及其与肠源性内毒素血症的关系

目的：观察失血性休克后血浆ＩＬ－１活性的变化及其与肠源性内毒素血症的关系。方法：复制容量控制失血性休克及肠源性内毒素血症模型,改良ＬＡＦ法及显色基质偶氮法检测ＩＬ－１及ＥＴ。结果：普通ＳＤ大鼠３０％失血后２～３ｈ及６～１０ｈ血浆ＩＬ－１活性升高,３ｈ后ＥＴ水平显著升高;失血前胃内灌注双岐杆菌或失血后静注ｒＢＰＩ,大鼠血浆ＥＴ水平无明显升高,ＩＬ－１活性第１峰仍然存在,但第２峰消失。无菌ＳＤ大鼠１０％失血、灌注ＬＰＳ后１ｈ血浆ＥＴ水平升高,２ｈ后ＩＬ－１活性升高。结论：失血性休克后ＩＬ－１活性呈双峰型升高,第１峰与内毒素无关,第２峰为内毒素刺激峰,内毒素主要来源于肠道     

用于基因治疗的病毒载体

近几年来,基因治疗研究发展迅速,目的是将外源基因导入靶细胞,在体内产生疗效。早在１９９０年美国ＮＩＨ的研究人员就将腺苷脱氢酶（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎａｓｅ,ＡＤＡ）基因导入病人的淋巴细胞,改善了由于ＡＤＡ基因缺损造成的免疫缺陷［１,２］。基因...     

凤眼莲根区异养细菌的群落特征与异养活性的研究

本文研究了凤眼莲根区(根际与根面)异养细菌的群落特征与异养活性。从根区分离出24株优势菌,经鉴定有10个属。其中以气单胞菌属、微球菌属、假单胞菌属、土壤杆菌属和芽孢杆菌属为主要菌属。细菌总数:根际>根面>水体。异养活性以氧化葡萄糖的速率计算。在30℃和pH7.0的条件下。根区菌群都显示较高的活性,且按下列顺序增强:老根区菌群>幼根区菌群>枯根区菌群;而根面菌群活性均大于根际菌群。但在10℃和pH5.0、8.6时,其活性明显地受到抑制。     

温度,pH对菌根真菌生长影响的研究

温度、ｐＨ对菌根真菌生长影响的研究韩桂云,齐玉臣,刘忱,周玉芝（中国科学院沈阳应用生态研究所,１１００１５）ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐＨｏｎＭｙｃｏｒｒｂｉｚａｌＦｕｎｇｕｓＧｒｏｗｔｈ￥ＨａｎＧｕｉｙｕｎ;ＱｉＹｕＣｈｅｎ;ＬｉｕＣｈｅｎ;ＺｈｏｕＹｕｚｈｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｐｐｌｉｅｄＥｃｏｌｏｇｙ,ＡｃａｄｅｍｉａＳｉｎｉｃａ,Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１５）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（１）：１５－１９。ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐＨｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆ１９ｐｕｒｅｓｔｒａｉｎｓｏｆｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｆｕｎｇｉａｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐＨａｒｅｆｏｕｎｄａｎｄｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｂｅｔｗｅｅｎａｄａｐｔａｂｌｅｒａｎｇｅｓｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐＨｆｏｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｆｕｎｇｕｓｇｒｏｗｔｈａｎｄｔｈｅｉｒｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｒｅｉｎｄｉｃａｔｅｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ,ｐＨ,