红莲型水稻与细胞质雄性不育相关mtDNA片段的分离及序列测定

应用AFLP分析技术,比较了红莲型水稻雄性不育系和保持系线粒体DNA,找到一不育系特异条带TA1。以该条带DNA为探针与不育系、保持系以及F1杂种线粒体总RNA杂交,结果显示该片段黄化苗期三者均转录一个RNA分子,但转录产物分子量各不相同,说明三者该片段阅读框架不同。经测序,该片段长202bp,序列内含密码子ATG、ATT、AGA、AGG以及正向重复序列5’TGTAC3’、5’ATTATTTT3’和倒重复序列5’GGGAAACA3’。上述特点表明该片段可能是某一蛋白编码序列,并可能与红莲型水稻雄性不育性状形成有关。     

草酸对黄瓜根中铁还原的促进作用

用黄瓜为材料,研究了草酸对植物根切段还原Ｆｅ（Ⅲ）ＥＤＴＡ的促进作用。在２－１４ｍｍｏｌ／Ｌ范围内随着草酸浓度的加大,其促进作用不断提高;在４ｈ内随着反应时间的推移,Ｆｅ（Ⅲ）ＥＤＴＡ的还原量成线性上升趋势。进一步用完整根、粗酶提取液和提纯的质膜证明：促进作用并非草酸本身作为电子供体直接或间接地加速了铁还原反应,而是形成的草酸铁螯合态是根中铁还原酶更有效的底物。整体根还原草酸铁的活力和质膜铁还原酶     

脑胶质瘤中P53基因突变及其与染色体17p杂合性丢失的比较

为进一步阐明P53基因突变和染色体17p杂合性丢失(LOH)的关系及两者与脑胶质瘤发生发展的相关性。应用PCR－SSCP、DNA序列测定及RFLP分析方法对55例脑胶质瘤中的P53基因突变及染色体17p的杂合性丢失进行了检测。发现P53基因在高级别星型细胞肿瘤(III－IV级)、低级别星型细胞肿瘤(I－II级)和非星型细胞肿瘤中的突变频率分别为：53％(9/17)、7％(1/15)和9％(2/23)。而55例肿瘤组织对应的淋巴细胞中未见P53突变。22％的胶质瘤丢失1个17p等位基因,这部分肿瘤中P53基因的突变频率为50％(6/12),而在43例持有2个17p等位基因的肿瘤中,P53基因的突变频率降为14％,两组相比差异显著(P<0?025)。结果提示P53基因突变是星型细胞肿瘤演变过程中的一个常见遗传事件,可能标志着肿瘤的恶性进展;散发性脑胶质瘤中的P53突变是体细胞型的突变;另外,丢失1个17p等位基因的肿瘤中有50％缺少P53基因突变,提示染色体17p上可能存在另一个参与了部分肿瘤恶性演变的肿瘤抑制基因。 Abstract：To further illustrate the roles of P53 gene and loss of heterozygosity (LOH) on chromosome 17p in the development of malignant gliomas,mutations in the P53 gene were analyzed in 55 gliomas of various malignant grades and histological types by the polymerase chain reaction-single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) technique and were confirmed by sequencing.Loss of heterozygosity (LOH) for chromosome 17p was also assessed using restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis in same tumors.The mutations did not follow a random distribution among various different subtypes,but occurred in 9 of 17 high-grade astrocytomas (53％),in 1 of 15 low-grade astrocytomas (7％) and in 2of 23 (9％) non-astrocytic tumors.Most of the mutations were missense ones and 42％ (5/12) occurred at the sites of CpG dinucleotide.P53 mutations were not detected in any of the 55 leukocyte DNA samples from patients with brain tumors.These studies demonstrated that P53 inactivation is a common genetic event in astrocytoma progression that may signal the transition from benign to malignant tumor stages.P53 gene mutations in sporadic human brain tumors are somatic in origin (i.e.,nonprenatally determined).The majority of glomas (43/55) analyzed here retained both 17p alleles.The frequency of P53 mutations was 14％ in this group of tumors and increased to 50％ (6/12) in tumors with one 17p allele (P<0.025).Allelic loss for chromosome 17p occurred in 6 of 12 gliomas independently of mutations in the P53 gene.Absence of P53 mutations in 50％ of the tumors with one allele suggests that a tumor suppressor gene other than P53 may be located on chromosome 17p and involved in progression to malignancy of some gliomas.     

大黄蒽醌类化合物的组织化学定位研究

利用新鲜材料的秆手切片直接观察,５％ＮａＯＨ水溶液显色、荧光显微镜观察和戊二醛及饿酸固定薄切片法对大黄根茎蒽醌类化合物进行了组织化学定位研究。结果发现大黄根茎内蒽醌类化合物主要积累在次生木质部的木射线和次生韧皮部的韧皮射线细胞中。根据显色程度的不同,可以判断早期形成的维管射线细胞蒽醌类化合物的含量较晚期形成的射线细胞的含量高,二年生根茎的含量高于一所生根茎的含量。     

抗转移癌基因在乳腺癌中的表达及其与淋巴结转移和预后的关系

观察 nm2 3 在乳腺癌中的表达与淋巴结转移和预后的关系。方法 :应用免疫组化 L SAB法检测 15 2例乳腺癌 nm2 3、ER、 PR、 P5 3和 PCNA的表达水平 ,比较 nm2 3 的表达对淋巴结转移和预后的影响。结果 :(1)在淋巴结转移组 nm2 3表达例数 32例 (4 5 .7% ) ,无转移组表达 40例 (4 8.8% ) ,两者差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;(2 )在 PCNA高指数表达组 nm2 3 阳性 42例 (6 0 .9% ) ,低指数表达组 nm2 3阳性 30例 (36 .1% ) ,前者明显高于后者 (χ2 =9.2 39,P<0 .0 1) ,且 PCNA与nm2 3 两因素呈正相关关系 (γs=0 .30 4,P<0 .0 1) ;(3)临床病理多因素比例风险回归分析显示淋巴结转移是影响患者生存的主要因素 ,而 nm2 3 对患者生存期无影响。结论 :nm2 3在乳腺癌中的表达既不能预测淋巴结转移 ,也不能提示较长的生存期 ,可能与肿瘤细胞的活跃增生有关。     

生物完整性指数与水生态系统健康评价

生物完整性指数是目前水生态系统健康评价中应用最广泛的一个生态指标。本文扼要介绍了生物完整性指数的概念、水生态系统健康评价的原理以及大型底栖无脊椎动物完整性指数的构建方法,介绍了生物完整性指数在水生态系统健康评价中的应用及我国开展这方面工作的建议。     

栖息地片断化对动物种群间基因流的影响及其测定方法

栖息地片断化指在人为活动和自然干扰下,大面积连续分布的自然栖息地被其它非适宜栖息地分隔成许多面积较小的斑块(岛屿)的过程。栖息地片断化是导致生物多样性丧失和物种绝灭的主要因素,也是威胁自然界生物生存的重要因素之一。栖息地片断化将影响基因在种群间和种群内的运动(基因流),开展栖息地片断化研究对保持物种间遗传多样性具有重要意义。本文介绍了片断化程度和基因流的测定方法。回顾了国内外的研究现状,并探讨了片断化对种群间基因流的影响和对濒危物种保护的意义。     

拟结晶投料环氧黄体酮犁头霉羟化过程研究

环氧黄体酮羟化产物是多种甾体激素药物的中间体,其11-羟化过程利用犁头霉(Absidiacoerulea)所得转化率远高于其他菌株。采用拟结晶投料方式,将环氧黄体酮颗粒细化后加一定量水,β-环糊精,吐温-80,超声波乳化后投入发酵液中。这种投料方式可避免传统投料中使用有机溶剂毒害细胞的缺点,更利于底物转化。采用多层前传神经网络建立培养基和投料成分配比与转化率关系模型,并将具有全局寻优性能的粒子群优化算法(PSO)应用于培养基和投料成分配比的优化,收敛速度快,效果好。在优化的操作条件下,摇瓶中投料浓度为10g/L时底物转化率达到87.5%,在3.7L发酵罐中投料浓度提高到20g/L时底物转化率仍高达86.6%。     

IL-1ra突变体的构建、表达及初步的药代动力学分析

白细胞介素1受体拮抗剂(Interleukin1 receptor antagonist,IL-1ra)是IL-1家族的一员,由于它可以特异性地抑制IL-1的生物学效应,因此在类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的治疗中倍受重视。为了提高IL-1ra的代谢稳定性,利用Ala代替其序列中的双碱性氨基酸,构建了3个突变体,分别为IL-1ra-1(R6K7-AA),IL-1ra-2(R93K94-AA),IL-1ra-3(K97R98-AA);将突变后的序列插入表达载体pTIG-Trx,转化大肠杆菌BL21(DE3);利用Ni2 金属螯合层析,SephadexG75凝胶过滤纯化表达产物;体外活性检测的结果表明,3个突变体的生物学活性与IL-1ra相比没有显著性差别(P=0·2248);初步的药代动力学分析结果显示:3号突变体IL-1ra-3的半衰期与IL-1ra相比提高了2·26倍。