四种剧毒鹅膏菌肽类毒素的HPLC分离与鉴定

利用反相市郊和液相色谱（ＨＰＬＣ）、紫外吸收光谱、擀谱分析了灰花纹鹅膏Ａｍａｎｉｔａ ｕｌｉｇｉｎｅａ,白毒鹅膏Ａ．ｖｅｒｎａ,鳞柄白毒鹅膏Ａ．ｖｉｒｏｓａ,豹斑鹅膏Ａ．ｐａｎｔｈｅｒｉｎａ等四种剧毒鹅膏菌的肽类毒素,结果表明：Ａ．ｆｕｌｉｇｉｎｅａ、Ａ．ｖｅｒｎａ含有九种标样毒素中的七种,Ａ．ｖｉｒｏｓａ含有九种标样毒素中的七种,Ａ．ｖｉｒｏｓａ含有标样中的五种;Ａ．ｐａｎｔｈｅｒｉｎａ含有标样     

小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法研究

目的:建立小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法。方法:从7~8周龄的C57BL/6J小鼠唾液腺分离唾液腺干细胞,采用悬浮唾液球法培养唾液腺干细胞,应用倒置显微镜动态观察细胞形态;细胞计数观察细胞生长状况;免疫荧光检测LN(层连蛋白)的表达。结果:倒置显微镜下,接种2 d后细胞(salispheres)小聚集体明显增加;接种4 d后唾液腺球直径逐渐增大,形成直径约100μm的神经球,球周围无明显刺突,存在明显细胞聚集。接种7 d后唾液腺球周围存在较多微刺,10 d后球继续增长,形状明显不同于4 d,表明处于活跃的增殖状态,唾液腺干细胞已经开始分化。生长曲线结果显示随着培养天数的增加,唾液腺球的数目呈明显递增趋势,同时,唾液腺球的直径也明显增大。免疫荧光结果显示,培养2 d后,唾液干细胞球开始表达LN,培养第4 d后,随着唾液干细胞球的增加,层连蛋白表达更明显。结论:应用该方法获得了唾液腺干细胞,具有成体干细胞的特征,具有自我更新和多向分化的潜能。