小地老虎β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶基因cDNA序列的克隆及mRNA组织特异性表达

β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶是昆虫几丁质代谢中一种关键酶,在昆虫的多种生理活动中发挥重要作用。本文以小地老虎Agrotis ipsilon Hufngel预蛹期幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到其β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶基因的cDNA序列。该序列含有2701个碱基,包括一个1788个碱基的开放阅读框,编码一个含595个氨基酸的蛋白,分子量约为68.3ku,等电点为5.48。推导得到的氨基酸序列与其他昆虫,尤其是鳞翅目昆虫的β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶高度同源。基因cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号GU985280。该基因在小地老虎取食期和预蛹期的马氏管、中肠、脂肪体、体壁和去中肠虫体中均含有mRNA水平的表达。     

基于湿地植物光谱的水体总氮估测

利用再生水补充城市湿地是目前湿地恢复与重建的主要方向,然而再水中高浓度的氮、磷含量极易导致水体富营养化。遥感技术已成为富营养化监测的重要手段,但对于植被覆盖水域的富营养化直接探测存在一定的局限性。以北京市典型再生水补水湿地奥林匹克公园南园湿地为研究区,利用湿地植物光谱进行水体富营养化主控因子总氮的遥感探测。测定芦苇(Phragmites australis)和香蒲(Typha angustifolia)的叶片光谱及水体总氮含量,在对数据进行预处理的基础上建立二者的关系模型,包括单变量模型(比值光谱指数(SR)模型和归一化差值光谱指数(ND)模型),与多变量模型(逐步多元线性回归(SMLR)模型和偏最小二乘回归(PLSR)模型),并利用交叉验证决定系数(R2cv)和均方根误差(RMSEcv)进行模型精度检验。结果表明,不同回归模型相比,多变量回归模型精度较高;多变量回归模型中,PLSR模型精度较高,R2cv可达0.72,RMSEcv仅为0.24,是建立湿地植物光谱与水体总氮含量关系的最优模型。不同湿地植物类型相比,利用芦苇反射光谱建立的各种预测模型的精度都高于香蒲。其他环境因子(总磷)也是影响TN含量与湿地植物反射光谱关系的重要因素。研究成果可以弥补现有水体富营养化遥感探测的不足,并为再生水利用的城市湿地水质监测与管理提供有力的科学依据。     

铜对秀丽隐杆线虫毒性效应的研究

为了阐明铜(Cu)对秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans长期作用的毒性效应,对实验室多代筛选的耐铜型秀丽隐杆线虫进行了寿命、衰老、发育、生殖和运动等生物学指标的研究.结果显示耐铜型秀丽隐杆线虫与野生型秀丽隐杆线虫相比其寿命缩短、衰老提前、个体发育受到抑制,且出现繁殖率降低、生殖能力减弱、运动行为存在障碍等一系列生理变化.本文为理解与阐明Cu的毒性效应提供了实验资料,有助于深入开展Cu毒性机理的研究.     

" 黑美人" 马铃薯中花色苷提取工艺研究

马铃薯(Solanum tuberosum)是一种重要的粮菜兼用型作物,马铃薯传入我国后产生了许多变种、变型和适合当地种植的地方品种,尤其是块茎的皮色和肉色出现了红色、紫色、黑色品种。"黑美人"马铃薯是甘肃省特有的经航空育种技术培育的新型马铃薯品种,经分析测定"黑美人"马铃薯中花色素含量非常丰富,其富含的花青素还具有抗癌、抗衰老、美容和防止高血压等多种保健作用。因此,"黑美人"马铃薯中花色苷提取工艺的研究,对于花色苷的应用与开发具有重要的研究意义。本研究以甘肃"黑美人"马铃薯为原料,对其所含花色苷提取工艺条件(乙醇浓度,温度,pH,提取时间,料液比,提取次数等)进行优化。研究结果显示最佳提取工艺参数为:乙醇浓度80%,温度75℃,pH 1.0,时间1 h,料液比1:20,提取3次。在优化后的提取工艺条件下,"黑美人"马铃薯的花色苷提取率得到提高,花色苷含量可达到33.05 mg/100g。     

发菜NdhK的抗体制备与蛋白表达

发菜是一种陆生蓝藻,分布于一些干旱和半干旱区域。其NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO₂吸收、围绕光系统Ⅰ的循环电子传递和细胞呼吸。为研究该物种中ndhK基因的功能,本研究利用特异性引物,通过PCR方法从发菜中扩增ndhK基因并克隆到原核表达载体pET-32a上,得到表达载体pET-32a-ndhK,将其转入大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,得到分子量大小为43 kDa的融合蛋白NdhK。随后,采用亲和层析,对融合蛋白进行纯化回收,并以此回收蛋白作为抗原进行免疫,制备NdhK的多克隆抗体。最后,利用Western blot蛋白免疫印迹对所得抗体的特异性进行验证。从而为进一步探索发菜ndhK基因的功能以及发菜中NDH-1复合体各亚基的作用进行前期准备。     

空腹血葡萄糖及糖化血红蛋白在慢性肝病患者中诊断糖尿病的对比研究

目的:比较空腹血葡萄糖(FPG)和糖化血红蛋白(HbA1c)在肝病人群中糖尿病(DM)诊断中的意义.方法:对142例未诊断为DM的对象同时检测FPG和HbA1c.分别按1999年世界卫生组织(WHO)诊断糖尿病标准(FPG-≥ 7.0 mmol/L)和美国糖尿病协会(ADA)新标准(HbA1c≥ 6.5％),对研究对象进行分组(DM和非DM组),比较2个检测指标在诊断DM中的差异.以FPG为诊断DM的金标准,计算HbA1c诊断DM的灵敏度、特异度、预测值、似然比等诊断性能.结果:FPG均值在2种标准诊断的DM患者之间差异有统计学意义(P＜0.05),在2种标准诊断的非DM患者之间差异则无统计学意义(P＞0.05).HbA1c均值在2种标准诊断的DM患者间差异无统计学意义(P＞0.05),在2种标准诊断的非DM患者间差异无统计学意义(P＞0.05).HbA1c≥6.5％诊断糖尿病的灵敏度(S)为100％.特异度(Sp)为93％,阴性似然比(-LR)为0.00和阳性似然比(+LR)为14.29.结论:HbA1c在肝病人群中诊断糖尿病有较高的诊断灵敏度和特异度.     

准分子激光原位角膜磨镶术患者的护理干预研究

目的:研究并探讨护理干预在准分子激光原位角膜磨镶术患者治疗中的应用与价值.方法:以我院2011年6月-2012年3月期间共收治进行准分子激光原位角膜磨镶术的800例患者为研究对象,并运用随机分组的方式将所有的患者分成两组,即治疗组和对照组分别由400例进行准分子激光原位角膜磨镶术的患者组成,对照组的患者在手术治疗之后进行常规的护理即可,而治疗组的患者则在手术之后进行必要的护理干预,对比两组患者的临床治疗效果.结果:治疗组患者的临床治疗效果明显优于对照组患者,治疗组的400例进行准分子激光原位角膜磨镶术的患者中,显效的为341例,有效的为39例,治疗的总有效率为95％,对比P＜0.05,具有显著的统计学意义.结论:在患者进行准分子激光原位角膜磨镶术的治疗之后,对其进行必要的护理干预,不仅能够使其更加积极的配合治疗,更加有助于临床治疗效果的提高,值得在现代的临床中进行大力的推广与应用.     

重组人胰激肽原酶复性工艺的研究

目的:研究重组人胰激肽原酶包涵体变性及复性的工艺。方法:对本实验室构建的重组人胰激肽原酶大肠杆菌进行IPTG诱导表达表达成功后,菌体经超声破碎释放包涵体,包涵体经洗涤、变性、稀释和尿素梯度凝胶过滤色谱这两种方法复性后(Sephadex-G75),通过测定酶活检验复性效果。结果:①重组人胰激肽原酶工程菌经过IPTG诱导后能够表达目的蛋白,目的蛋白以包涵体形式存在,将细胞破碎后,包涵体经过3次洗涤,纯度达到71.93%;②变性包涵体经24小时稀释复性后,蛋白浓度达到72.61μg/m L,酶的比活达到13.84 U/mg;③变性包涵体经过2个小时的尿素梯度凝胶过滤复性后,蛋白浓度可达到830.07μg/mL,酶的比活达到48.61 U/mg。结论:两种复性方法均可以使包涵体达到一定的浓度和比活,比较发现尿素梯度凝胶过滤色谱具有复性时间短和比活力高等优点,可作为重组人胰激肽原酶复性的一种有效的手段。     

槲皮素的热降解机理及其分解动力学研究

利用TG-DTG技术测得槲皮素在氮气气氛中不同升温速率β下的热分解曲线,协同使用Achar法、Coats-Redfern法、Kissinger法和Ozawa法等4种方法同时进行动力学处理,根据热分解的表观活化能Eα和指前因子A计算推断槲皮素的贮存期.随着升温速率的提高,槲皮素的热分解温度逐渐升高;槲皮素热二步分解的机理依次是随机成核与随后生长控制和化学反应控制,对应的函数名称是Avrami-Erofeev方程和反应级数方程;经Gaussian模拟和热重数据结合分析,槲皮素在第一步分解时,失去两个O原子;第二步分解时失去一个苯环;根据第一步热分解的表观活化能Eα和指前因子A推断,在室温25℃下,槲皮素的贮存期为1.5 ～2年.     

密毛番荔枝化学成分的研究

采用正相、反相硅胶,Sephadex LH-20凝胶,MCI树脂等层析方法对密毛番荔枝茎枝的化学成分进行分离纯化,运用现代波谱技术鉴定了9个化合物:槲皮素(1),圣草酚(2),原儿茶酸(3),丁香酸(4),N-p-hydroxy-cis-coumaroyltyramine(5),annonacin(6),annonacin-10-one(7),β-谷甾醇(8)和胡萝卜苷(9)。其中化合物3为首次从该属植物中分离得到,化合物1、2、4、5、8和9均为首次从该植物中分离得到。