溃愈散对溃疡性结肠炎患者血清IL-4水平的影响及临床疗效观察

目的：探讨溃愈散对溃疡性结肠炎患者血清IL-4水平的影响及临床疗效观察。方法：将60例UC患者随机分为2组,治疗组和对照组各30例,治疗组用溃愈散保留灌肠治疗,对照组口服柳氮磺吡啶治疗。采用双抗体夹心ELISA法检测2组患者治疗前后血清IL-4水平,并与30例健康志愿者（空白组）对照。结果：治疗组临床总有效率为86．7％,对照组临床总有效率为70．0％,两组总有效率比较差别无统计学意义（P〉0．05）。两组肠黏膜病变疗效相当（P〉0．05）。治疗前两组血清IL-4水平明显低于空白组（P〈0．01）。治疗组与对照组治疗前相互比较,血清IL-4水平无统计学差异,治疗后两组血清IL-4水平较治疗前均明显上升（P〈0．01）,且治疗组上升程度高于对照组（P〈0．01）。结论：溃愈散对UC有良好的治疗作用并提高UC患者血清IL-4水平。     

南京儿童医院PICU病原菌流行分布与耐药性分析

目的了解南京地区儿童重症监护病房（PICU）临床分离病原菌的流行分布与其对抗生素的耐药趋势,指导临床诊断及用药。方法回顾性分析2011年1月至2013年12月南京医科大学附属南京儿童医院PICU住院患儿所分离出病原菌的分布和药物敏感性试验结果。结果 1 476例各类送检标本中共分离出386株病原菌（26.2%）,其中革兰阴性杆菌265株（68.7%）,主要为肺炎克雷白杆菌,大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌;革兰阳性球菌93株（24.1%）,主要为凝固酶阴性葡萄球菌,金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌;真菌28株（7.2%）。3年中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别占62.7%和54.9%。革兰阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡星和头孢哌酮/舒巴坦较敏感;革兰阳性球菌对万古霉素和利奈唑胺较敏感。结论 PICU分离出的主要病原菌对常规抗菌药物的耐药现象严重,应结合患儿临床表现、感染部位和病原菌的流行病学特点合理选用抗菌药物。     

嗜水气单胞菌外膜蛋白W 基因的表达及其免疫原性分析

从患暴发性败血病的草鱼病灶处分离鉴定了嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)Wp3菌株。以其基因组DNA为模板扩增外膜蛋白W基因(OmpW),该基因全长为865 bp,开放式阅读框(ORF)为615 bp,与标准株ATCC7966的OmpW基因的同源性为99.8%。根据ORF序列设计引物扩增OmpW成熟肽编码序列并将其插入到表达载体pQE30中,转化大肠杆菌,经诱导可表达分子量为24.7 kD的带His标签的融合外膜蛋白His-W。用此融合蛋白免疫草鱼,所得草鱼血清经ELISA分析显示呈现阳性反应,说明重组蛋白能诱导产生抗体。采用实时荧光定量PCR分析草鱼头肾组织IgM基因表达水平的变化,结果显示免疫组IgM的表达量均明显高于空白组,其中低浓度免疫组(2μg/g)与空白对照组的差异显著(P<0.05),说明融合蛋白可使草鱼产生良好的免疫应答并上调抗体基因表达、产生高效抗体。保护性实验显示,不同免疫剂量均可使免疫组获得较高保护率(57%?86%)。结果显示,重组嗜水气单胞菌外膜蛋白W可作为草鱼嗜水气单胞菌基因工程亚单位疫苗。     

耻垢分枝杆菌ClpC和ClpX敲低表达菌株的构建及表型分析*

蛋白质平衡稳定对细菌的生长繁殖以及应对宿主免疫压力十分重要。Clp蛋白酶复合体在结核分枝杆菌的蛋白质降解和平衡稳定中发挥重要作用。Clp蛋白酶中负责识别底物蛋白并将其解折叠的蛋白质有两种:ClpC和ClpX。为初步探究分枝杆菌中ClpC和ClpX各自的功能特点,运用CRISPRi的方法成功构建了耻垢分枝杆菌的ClpC和ClpX诱导型敲低表达菌株,并对其生长相关表型进行分析。结果显示:与野生菌株相比,ClpC和ClpX的低表达均能严重影响耻垢分枝杆菌的生长。ClpC低表达可导致菌株丧失生物膜的形成能力,而ClpX低表达则导致菌株无法维持正常细胞形态,电镜显示细胞壁不完整且细胞呈丝状化,提示ClpC和ClpX可能在分枝杆菌中具有不同的生理功能。可为后期深入开展ClpC和ClpX对分枝杆菌生理调控功能研究及新型抗结核药物筛选提供基础。