雏番鸭细小病毒vp3基因的原核表达及增殖病毒的检测

近年来,番鸭细小病毒出现新的流行趋势,估计与病毒基因变异有关,因此针对新流行毒株研发新的检测方法很有必要。本研究根据番鸭细小病毒(MDPV)2012年分离株SAAS-SHNH的全基因序列,设计了一对特异性引物,利用PCR技术扩增全长vp3基因,经鉴定正确后,进行同源性比对分析,同时将其克隆到PET28a载体,构建成PET28a-VP3原核表达载体,经转化及IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和Western blotting分析,表达出与预期大小相符的63.1 k Da的蛋白,该蛋白可与临床采集的免疫过MDPV的番鸭血清结合,说明该蛋白可用于MDPV的血清学检测。将纯化后蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔源MDPV-VP3蛋白的多克隆抗体,制备的兔源血清能够与MDPV疫苗弱毒株及J3D6株VP3蛋白发生特异结合;MDPV感染原代鸭胚成纤维细胞(DEF)后,利用兔源血清作为一抗进行免疫荧光分析(IFA)分析,在DEF细胞核和细胞质内均能检测到VP3蛋白,表明利用VP3蛋白制备的抗血清可以用于MDPV免疫荧光分析细胞增殖病毒的检测。这为今后MDPV的快速检测提供了技术基础。     

浅析潜在外来入侵物种——苹浅褐卷蛾

苹浅褐卷蛾Epiphyas postvittana原产澳大利亚,是澳大利亚西南部、新西兰、英国及美国多种经济作物的重要害虫,目前尚未在全球范围广泛分布。由于其地理分布范围窄、寄主植物广泛、形态鉴定困难、能够对农作物造成较大的经济危害以及具有遗传多样性等特点,目前已被多数国家列为检疫对象并提出严格的检疫要求。而2007年该虫在美国加州地区的定殖使得研究人员对该虫能够造成的危害程度引起了再次的关注。在我国,该虫也被列为对外检疫对象,但是相关报道相对较少。作为检疫性害虫,对其相关信息的综合掌握是进一步进行有害生物风险分析的基础和保障。本文详细描述了苹浅褐卷蛾的地理分布、寄主范围、发生为害与环境条件的相互关系等,以期为该虫进行进一步风险分析及对其的检疫措施的制定和实施提供重要的信息与依据。     

重金属Cr6+胁迫下小麦幼苗DNA 5-MeC含量的改变

运用高效液相色谱法(HPLC)研究了3d龄和10 d龄小麦幼苗在5～100mg/L Cr6+胁迫下根系和地上部分DNA 5-甲基胞嘧啶(5-MeC)含量的变化.方法:色谱柱为Hypersil BDS-C18键合柱(5μm,150×4.6 mm I.D.);流动相由5％甲醇,4.75 mmol/L己烷磺酸钠,0.2％三乙醇胺组成,三蒸水配制,pH值为5.5;流速为0.7 mL/min;检测波长为273 nm.结果发现:除100 mg/L Cr6+降低了3d龄小麦幼苗根系DNA 5-MeC的百分含量外,所试不同浓度Cr6+均引起两苗龄幼苗叶片和根系DNA甲基化水平的上升;3d龄幼苗对Cr6+胁迫比10 d龄幼苗敏感,根系比地上部分敏感.结论:Cr6+胁迫引起的DNA甲基化水平改变可能影响到小麦幼苗的正常生长发育.     

唐鱼精巢的组织学观察

应用光学显微镜对唐鱼Tanichthys albonubes精巢的组织结构进行了观察.结果表明,唐鱼的精巢属于小叶型结构.性成熟唐鱼的精巢呈乳白色,长条状,左右各一,合并成“Y”型.小叶间质把精巢分成许多精小叶,每个精小叶由数个精小囊组成,精子就在精小囊中形成.同一精小叶内的精小囊不一定同步发育,但同一精小囊中的生精细胞发育是同步的.唐鱼的精子发生和形成过程经历了初级精原细胞、次级精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和成熟精子6个阶段.精巢内同时存在初级精原细胞和次级精原细胞两种类型的精原细胞.     

天窗加自排气输液器在临床应用中的体会

目的:观察临床应用中传统输液器与天窗自排气输液器的排气效果.方法:随机抽取2010年1月-2012年1月在心内科输液的200名患者,随机分成两组A组与B组,各100例,对照组用传统输液法,观察组用天窗加自排气输液器,比较两组一次与二次排气成功率.结果:观察组与实验组在一次与二次排气成功率差异有统计学意义.结论:天窗自排气输液器作为一种新的输液器,一次排气成功率显著高于传统的输液器,而且还可以进行二次排气,临床效果比传统的输液器更好.     

利妥昔单抗维持治疗弥漫大B 细胞淋巴瘤的初步研究

目的:对弥漫大B细胞淋巴瘤患者进行利妥昔单抗维持治疗(Maintenance Rituximab,MR)的安全性及疗效的研究和探讨.方法:38例患者诱导治疗结束后根据患者及家属意见和经济条件分为MR组和观察组.每组19例.诱导治疗阶段两组患者均接受6～8个疗程R-CHOP(每3周)或R-EPOCH方案治疗.维持阶段,利妥昔单抗在诱导治疗完成后4-8周开始,375mg/m2,每3个月1次共2年(8次)或直至疾病复发、进展、死亡.维持前均经影像学检查证实无复发.结果与结论:MR对R-EPOCH或R-CHOP的诱导治疗后达到CRu/CR初治DLBCL病人,有很好的近期疗效,能提高其DFS率,但OS率无改善,而且其毒副反应小,可以耐受.     

脑梗死后海马神经元β—APP及其产物与ApoE的表达

目的：应用常规HE染色和免疫组织化学染色方法,观察人脑梗死后海马CA1区和CA3区神经元中β-APP、Aβ1-40、Aβ1-42及ApoE的表达,探讨它们表达变化的时间规律,以期对临床治疗提供可靠的实验资料。方法：分脑缺血组和对照组,脑缺血组按缺血时间分为缺血2h-6h组、7h-24h组、25h-48h组、49h-72h组．73h-96h组、97h-144h组和145h-168h组。采用HE染色方法观察神经细胞损伤情况;免疫组织化学染色检测β-APP、Aβ1-40、Aβ1-42与ApoE在尸检脑标本海马CA1区、CA3区神经元的表达,在显微镜下对免疫组织化学染色阳性细胞计数,实验结果应用SPSS12．0统计软件进行分析。结果：与对照组相比,Aβ1-40的表达在缺血2h后明显增加,73h-96h达高峰,以后有所回落,但仍高于对照组;β-APP在缺血2h-6h表达呈峰值,49h-96h呈现第二次高峰,96h以后下降,但仍高于对照组;于缺血24h后,β-APP和Aβ1-40的增加呈显著的正相关。缺血2h后．Aβ1-42表达开始增加,25h-48h达高峰;缺血6h后,ApoE表达开始增加,但97h-144h为高峰期。结论：人脑梗死后β-APP、Aβ1-40和Aβ1-42表达增加,它们可协同加重脑缺血性损伤;而ApoE脑保护作用可能增强。     

两株致病性哈维氏弧菌胞外产物的特性分析

采用硫酸铵分级盐析从哈维氏弧菌EcGY020401株和SpGY020601株培养物中提取其胞外产物,并对胞外产物的一些特性进行了分析。结果表明,两株哈维氏弧菌的胞外产物均具有较强的毒力,对鲫鱼的半致死剂量LJ50为7．1g蛋白／g鱼体重;均具有淀粉酶、酪蛋白酶、脂肪酶活性,而无脲酶和明胶酶活性;除EcGY020401株胞外产物对斜带石斑（Epinephelus coioides）红细胞有较强溶血作用外,对小鼠、鲫、人O型血等红细胞的溶血性都较弱或无;对草鱼吻端成纤维细胞（PSF）都具有细胞毒性。此外,经聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱层析和离子交换柱层析,对SpGY020601株的胞外产物中蛋白酶进行了初步提纯,SDS-PAGE分析得一分子量约为38Kda的蛋白酶,该蛋白酶对鲫鱼有致死毒性,半致死剂量为3．3g蛋白／g鱼体重。     

铅的生物学毒性效应

铅对生物体具有多方面的毒性,可导致智力低下、造血机能障碍、高血压、肾病等,其毒性机理还在探索阶段。本文主要介绍了铅对各个系统如神经系统、心血管系统、泌尿系统、生殖系统以及个体发育的毒性效应。     

健康与长寿十大因素之探讨

《黄帝内经.素问.上古天真论》云:“夫上古圣人之教下也、皆谓之虚邪贼风;避之有时、恬淡虚无、真气从之、精神内守、病安从来”。本段从病因方面认识到对外界环境“虚邪贼风、避之有时”,更重要的是思想上保持安闲清静、没有杂念、真气就能顺从,精与神都能守持于内,疾病就很少发生。“盈缩之期、不独在天;养怡之福,可得永年”。这是曹操在