甘肃贝母离体小鳞茎直接发生途径的研究

目的：建立甘肃贝母组织培养小鳞茎的直接发生技术体系。方法：采用单因子试验设计，筛选适宜甘肃贝母组织培养的外植体及灭菌方法，探究外植体种类、茎段大小、培养温度、激素组合、培养方式等对小鳞茎诱导和增殖的影响。结果：休眠芽的最佳灭菌方式为75%乙醇灭菌30 s,0.1%升汞灭菌1 min，无菌水冲洗3～5次。休眠芽为外植体时培养效果最好，其次为茎段和小鳞叶，叶片效果较差。茎段大小对甘肃贝母组培小鳞茎诱导影响不大。固体培养基更适宜直接诱导小鳞茎，培养基配方为：1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L或1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L，蔗糖3%、琼脂0.7%,pH 5.8。一定的变温培养有利于其鳞茎增殖。适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.5 mg/L+1.5%蔗糖+0.7%琼脂，pH 5.8。结论：建立了甘肃贝母离体培养小鳞茎直接发生技术体系，可为甘肃贝母种质保存及工厂化育苗提供技术支撑。     

高分一号宽幅多光谱影像辐射定标偏差及其植被指数影响

自2013年4月在轨运行以来，高分一号(GF-1)宽幅(WFV)多光谱相机已实现持续对地观测，为包括生态学在内的相关研究领域与行业应用提供了丰富的数据源。当前场地定标频次偏低以及定标参数更新、发布滞后的现状，一定程度上影响了GF-1 WFV多光谱数据的定量应用。然而，现有文献仅在数据预处理流程中谈及对GF-1 WFV影像的辐射定标处理，很少讨论定标参数选取不当甚至误用产生的可能影响。基于已公布的辐射定标参数(2014—2021年)和4景GF-1 WFV Level1A级影像产品数据，重点围绕辐射定标偏差及其对多光谱波段星上反射率和常用植被指数的影响等展开模型分析和讨论。结果显示：即使两个相邻年份间，在多数情况下误用辐射定标参数会导致不可忽视的波段星上反射率相对偏差；进而给不同类型植被指数的实际应用带来不同程度的挑战。因辐射定标偏差的影响，常用的两波段归一化型植被指数在监测稀疏植被覆盖区时会存在明显的误差；而对高植被覆盖区的监测时采用两波段简单比值型植被指数将面临更大的挑战。针对存档GF-1 WFV Level1A数据的应用需求，提出利用时间距离加权的线性内插法来修正基于公开定标参数的辐...     

野油菜黄单胞菌中3-羟基脂酰ACP脱水酶功能研究

细菌采用II型脂肪酸系统合成脂肪酸,其中3-羟脂酰ACP脱水酶催化唯一的脱水反应,是细菌生长的关键酶之一.野油菜黄单胞菌(Xcc)引起几乎所有十字花科植物的黑腐病,在全球范围内造成广泛的经济损失.为研究Xcc中3-羟脂酰ACP脱水酶,本研究利用大肠杆菌3-羟脂酰ACP脱水酶FabZ序列同源比对时,发现其与XC_2876 (XcfabZ)编码蛋白具有同源性,序列一致性达到46.1%,同时还具有保守的α螺旋结构和活性位点.将XcfabZ异体遗传互补大肠杆菌fabZ(EcfabZ)条件突变株HW7,结果显示添加IPTG能恢复突变株的生长,初步表明XcFabZ具有3-羟脂酰ACP脱水酶活性.而体外活性分析显示,XcFabZ能在脂肪酸合成的起始反应和延伸反应中发挥3-羟脂酰ACP脱水酶活性作用.本研究不能直接获得XcfabZ基因敲除突变株,但将携带EcfabZ或XcfabZ的表达质粒导入后,获得基因替换突变株,证明XcfabZ是必需基因. EcfabZ替换突变株的脂肪酸组成与野生菌有差异,对逆境条件(高盐、低pH、H_2O_2和SDS)的耐受性显著下降,运动性也显著降低,但XcfabZ替换突变株恢复到野生菌水平,表明XcFabZ与EcFabZ虽然都具有3-羟脂酰ACP脱水酶活性,但在细胞中生理功能可能有一些差别.     

呼吸机相关性肺炎患者病原菌分布及IL 35的炎症控制机制

目的探讨呼吸机相关性肺炎(VAP)患者病原菌分布及白细胞介素35(IL-35)的炎症控制机制。方法回顾性分析2016年12月至2018年12月在我院重症监护病房(ICU)行机械通气的152例患者的临床资料,根据是否发生VAP将其分为VAP组(n=70)和对照组(n=82)。收集VAP患者痰液进行细菌培养及药敏实验,检测并比较两组患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4~+CD25~+CD127dim/-调节性T细胞(Tregs)比例及血清中白细胞介素35(IL-35)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)水平;同时检测并比较经佛波酯和重组人IL-35刺激后的Tregs细胞培养液上清中IL-35、IFN-γ、TNF-α水平。结果 70例VAP患者共检出病原菌128株,其中革兰阴性菌占82.81%,革兰阳性菌占14.84%,真菌占2.34%。鲍曼不动杆菌对头孢西丁的耐药率最高,对头孢哌酮的耐药率最低。铜绿假单胞菌对头孢西丁的耐药率最高,对亚胺培南的耐药率最低。肺炎克雷伯菌对头孢西丁的耐药率最高,对头孢哌酮的耐药率最低。VAP组患者PBMCs中CD4~+CD25~+CD127dim/-Tregs比例及血清中IL-35、IFN-γ、TNF-α水平显著高于对照组(t=12.675、36.631、13.464、8.482,均P0.001)。经重组人IL-35刺激后的Tregs细胞培养液上清中IL-35水平显著高于佛波酯刺激后(t=8.886,P0.001)。经重组人IL-35刺激后的Tregs细胞培养液上清中IFN-γ、TNF-α水平显著低于佛波酯刺激后(t=14.091、7.588、均P0.001)。结论呼吸机相关性肺炎病原菌以革兰阴性菌为主,呈现多药耐药性,临床应合理使用抗菌药物以防治呼吸机相关性肺炎。IL-35可通过调控Tregs功能降低促炎因子分泌从而在呼吸机相关性肺炎发病过程中发挥抗炎症作用,提示IL-35可能为呼吸机相关性肺炎的治疗提供新的方向。     

乳酸乳球菌生产2'-岩藻糖基乳糖的途径构建及发酵培养基优化

2’-岩藻糖基乳糖（2’-fucosyllactose, 2’-FL）是一种含量最丰富的人乳寡糖，微生物全细胞合成是生产2’-FL的重要方法。乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）作为一种可直接用于乳制品的食品级微生物，目前还没有用于生产人乳寡糖的报道。首先，在两种常用L. lactis底盘NZ3900和NZ9000中利用含有基因fkp、futC、lacF的重组质粒pNZ8148-2f构建2’-FL补救合成途径，在添加10 g/L岩藻糖和5 g/L乳糖的发酵培养基中，测得2’-FL的摇瓶产量分别为0.16 g/L与0.4 g/L，结合对二者生长状况等综合分析，选取NZ9000作为优势底盘。然后，在NZ9000中构建2’-FL从头合成途径，利用同源重组技术并借助L. lactis中特有的敲除整合载体p NZ5319，在敲除非必需基因upp的同时将基因manA、manB、gmd和wcaG整合到染色体上，借助载体pNZ8148-1将基因manC、futC和lacF以质粒的形式引入到细胞中，同时利用不同启动子P32、Pnis对酶的表达水平进行组合调控。获得最优菌株NZ9000 6，...     

慢性粒细胞白血病急性巨核细胞变?? 例实验室诊断

目的：探讨慢性粒细胞白血病急性巨核变的实验室诊断，方法：对两例慢粒急性巨核变进行骨髓象分析、组化染色、免疫分型，结果与结论：诊断主要依赖形态学、组化染色、免疫学特点。