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41.
目的: 真核细胞表达小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4胞外段肽,研究表达肽段与抗原呈递细胞B7分子结合后减轻小鼠淋巴细胞刺激后的增殖抑制,从而启动T淋巴细胞进一步增殖。方法:从小鼠脾脏淋巴细胞获得总RNA,通过逆转录PCR扩增出CTLA-4全长基因,克隆并测序。依据胞外段序列和真核表达载体pcDNA3.1序列,合成引物扩增胞外片段,两者经内切核酸酶处理、连接构建重组表达pcDNA3.1载体,重组质粒经测序验证后,采用lipofectamine 2000转染入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选获得稳定表达细胞株。结果:获得小鼠CTLA-4胞外段真核表达载体和小鼠肝癌细胞Hepa1-6稳定表达转染细胞株,制备了CTLA-4胞外肽段,经His标签抗体和小鼠CTLA-4抗体Western blot检测表达蛋白带均呈阳性。结论:获得CTLA-4胞外段肽,为进一步研究该肽的作用打下基础。 相似文献
42.
本文结合国内外文献综述了油茶化学成分的研究进展,并对该植物的抗肿瘤活性进行了总结。油茶所含化学成分主要为三萜及三萜皂苷类、黄酮类、脂肪酸类、甾体类、木脂素类等。三萜及三萜皂苷类成分为油茶中最主要的化学成分。油茶提取物及单体化合物Oleiferasaponin B1、B2、C1、C2、油茶皂苷B对肿瘤细胞有抑制活性,多糖和油茶皂苷A、B具有抑制移植瘤活性,其作用机制有待进一步深入研究。 相似文献
43.
44.
不同培养条件对铁线莲不定芽增殖及玻璃化的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以铁线莲品种'Multi-Blue'萌发的新芽为外植体,从植物生长调节物质(BA和NAA)及转接周期等方面,探讨控制或减轻铁线莲'Multi-Blue'组培苗玻璃化的途径.结果表明:(1)接种在含MS+1.0 mg·L-1 BA+0.1 mg·L-1 NAA培养基中的'Multi-Blue'不定芽有效增殖系数最高,达4.18,显著高于其他处理;BA/NAA相对比值对不定芽有效增殖率无显著性影响;铁线莲'Multi-Blue'继代培养的最佳周期为14 d.(2)叶片超微结构观察发现,铁线莲'Multi-Blue'玻璃化苗叶肉细胞中的叶绿体膨胀,体积增大,形状不规则;类囊体片层或消失或变得模糊不清;嗜锇滴体积增大,细胞核固缩. 相似文献
45.
苏云金芽胞杆菌(Bt)可以分泌产生有杀虫性的结晶状蛋白,它已被广泛地应用到农业害虫防治中,且起到了重要的作用。钙粘着蛋白Bt—R1是一种结合蛋白,存在于烟草天蛾中肠上皮细胞里,可结合BtCry1A毒素。Adang等科学家先前鉴定出Bt—R1区很接近细胞膜的CR12-MPED区(Cry1Ab介导的细胞毒素途径所必需的一个结合区)。2007年8月28日《PNAS》报道了一个含有CR12-MPED区的肽,并在大肠杆菌中表达,可作为Cry1A毒性的增效剂,防治鳞翅目幼虫。CR12-MPED肽结合在刷状缘膜囊和中肠微绒毛上,但不改变中肠上Cry1Ab或Cry1Ac结合位点。通过BIAcore分析,证明Cry1Ab可结合在CR12-MPED的高、低2个亲合位点上。 相似文献
46.
一种利用STO饲养层细胞制备拟胚体的新方法 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了一种利用STO饲养层细胞制备拟胚体的新方法。该方法选用生长至80%饱和密度的STO细胞,经丝裂霉素C(10 mg/ml)处理4 h后以8×104 cm-2的密度接种培养12 h,制备饲养层,再将ES-D3细胞以1×104 cm-2的密度接种其上,首先用含mLIF的DMEM培养液培养24 h,再更换拟胚体诱导培养液,5~9天后获得了各成熟阶段的拟胚体。形态结构和分化潜能等研究表明,该方法制备的拟胚体结构典型,具有产生3个胚层谱系来源的功能细胞的潜能。与传统拟胚体制作方法如悬滴培养法相比,具有操作简便,拟胚体形成率高,重复性好等优点,是开展哺乳动物早期胚胎发育和干细胞分化研究的理想工具。 相似文献
47.
致病性钩端螺旋体的三个新血清型 总被引:1,自引:0,他引:1
自云南省分离出3株(M48、A31、A82)钩端螺旋体,经鉴定它们分别属于3个新血清型。M48系1960年从耿马县猪肾分离,A31与A82分别于1962、1970年自勐腊县病人血培养物中分离。拟分别命名为耿马型(M48)、版纳型(A31)和勐捧型(A82)钩端螺旋体[Leptospirainterrogans serovars gengma (M48),banna (A3I)和mengpeng (A82)]。其中耿马型应属于塔拉索夫血清群;版纳型和勐捧型的血清学性质界于塔拉索夫和歇尔曼二群之间,其血清学归属尚难肯定。 相似文献
48.
烟草花粉管亚原生质体的分离和培养行为 总被引:1,自引:0,他引:1
应用酶法从烟草花粉管分离出大量亚原生质体。具核的和无核的亚原生质体之比约为1:1。这种亚原生质体在D_2培养基中培养后,不论有核的或是无核的都能生长管状结构和再生厚的壁。管状结构的生长有节律性,常呈结节状。随着管状结构的生长,细胞内含物逐渐流入生长中的管状结构内,有时会从薄的管状结构的顶端排出到培养液中。已生长管状结构的亚原生质体,具核的和无核的比例约为1:1.7,表明管状结构的生长和壁的再生与是否有核的存在无关。对酶液处理后花粉管亚原生质体从花粉管的释放和从单独的花粉管亚原生质体生长管状结构的过程,进行了活体连续观察和照相记录。实验结果说明,结节状的管状结构确实是从单独的一个亚原生质体形成的。管状结构的生长和壁的再生似乎与细胞质进入新生的管状结构有关。讨论了花粉管亚原生质体在植物遗传操作中应用的可能性。 相似文献
49.
二核苷酸重复多态性的非同位素检测及其在基因诊断中的应用 总被引:8,自引:1,他引:8
本文报道了一种检测二核苷酸重复多态性的简便的非同位素法,利用重复序列两侧的特异引物进行PCR扩增,产生的等位片段在薄层变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上分离,再用灵敏的银染法显色。该方法不需要标记PCR产物,简便、快速,分辨率可达1bp,并可用多对引物同时进行多重PCR分析。用此方法对DMD家系成员dystrophin基因的5'-脑型外显子止游区和3'-非翻译区的两个(CA)。位点进行了扩增片段长度多态性分 相似文献
50.