利用EDA融合标签高效表达猪圆环病毒2型壳蛋白

原核生物作为宿主细胞被广泛应用于异源蛋白质的重组表达,并且为生物活性蛋白质的制备提供了一种高效、经济的方法,因而在分子生物学中得到普遍的应用。然而,病毒蛋白在使用原核重组表达系统进行重组表达时,会出现病毒蛋白溶解性差和表达量低等问题。因此,通过使用各种融合标签以增加目的重组蛋白的表达量和溶解性成为有效的方法。本研究通过使用3种融合标签（EDA标签、MBP标签和GST标签）以获得表达量高的可溶性重组表达猪圆环病毒2型壳蛋白;并比较3种融合标签对该蛋白表达量、溶解性和稳定性的影响。研究结果表明,EDA标签可以显著提高重组表达的猪圆环病毒2型壳蛋白表达量,并且能够增强该蛋白的稳定性;MBP标签可增强重组表达的猪圆环病毒2型壳蛋白表达量,但是不能改善该蛋白的稳定性;GST标签能够增强该重组表达蛋白的表达量,但是不能增强该蛋白的溶解性和稳定性。本研究将EDA作为PCV2-CP蛋白的融合标签,显著提高PCV2-CP-EDA重组蛋白的表达量和增强该重组蛋白的稳定性,为病毒蛋白的可溶性重组表达提供了一种新的融合标签。     

冬小麦产量性状的遗传效应分析

以农大139等7个冬小麦品种进行4×3不完全双列杂交,采用加性-显性及其与环境互作的遗传模型对亲本、F_1和F_2的株高、主穗穗长、单株穗数、主穗小穗数、千粒重和单株粒重6个性状进行遗传分析．结果表明,株高和主穗长主要受加性效应控制,而单株穗数、主穗小穗数、千粒重和单株粒重主要受显性×环境互作效应影响．矮2杂交后代易选到矮株,奥里生杂交后代易得到大穗材料,农林10号和奥里生的杂交后代分蘖力将加强,814的杂交后代小穗数增多,814杂交后代千粒重增高．所有产量性状未表现明显的杂种优势．     

癌症疫苗

１９９３年是ＷｉｌｌｉａｍＣｏｌｅｙ首次报道“细菌毒素激活的免疫系统诱导肿瘤消退”的１００周年。而当许多相继而来的癌症疫苗试验已经得到撩拨人心的结果时,主动的免疫治疗仍没有成为确定的癌症疗法。新的分子疫苗方法基于合理的免疫学原理之上,增进了动物模型中的系统抗肿瘤效应,最终,肿瘤特异性抗原的遗传确定将使用于癌症治疗的靶抗原特异性疫苗得到发展。     

胰岛素B链中肽段的合成 Ⅷ.B_(9-16)八肽衍生物的合成

胰岛素B链中段的八肽衍生物,即Cbz·Ser·(Im-Bz)His·Leu·Val·(γ-OCH_3)Glu·Ala·Leu·Tyr·OC_2H5曾自Cbz·Ser·(Im-Bz)His·NHNH_2通过迭氮物与H·Leu·Val·(γ-OCH_3)Glu·Ala·Leu·Tyr·OC_2H_5(B_(11-16b))缩合而成。其中B_(11-16b)由Cbz·Leu·Val·(γ-OCH_3)Glu·Ala·Leu·Tyr·OC_2H_5(B_(11-16))经催化氢解或溴化氢醋酸溶液脱去苄氧羰基而得。结晶的B_(11-16)系从Cbz·Leu·Val·(γ-OCH_3)Glu·OH(B_(11-13a))和H·Ala·Leu·Tyr·OC_2H_5借DCCI法缩合而成。从H·(γ-OCH_3)Glu·OH开始,用活化酯法与Cbz·Val·ONP和Cbz·Leu·ONP逐步自N-端引伸,而得Cbz·Val·(γ-OCH_3)Glu·OH(B_(12-13a))和Cbz·Leu·Val·(γ-OCH_3)Glu·OH(B_(11-13a))。另一八肽衍生物,即Cbz·Ser·(Im-Bz)His·Leu·Val·(γ-OCH_3)Glu·Ala·Leu·Tyr·OH(B_(9-16a))系由Cbz·Val·(γ-OCH_3)Glu·Ala·Leu·Tyr·OH(B_(12-16a))经催化氢解而得的H·Val·(γ-OCH_3)Glu·Ala·Leu·Tyr·OH借迭氮法与Cbz·Ser·(Im-Bz)His·Leu·N_3缩合而得。该五肽片段B_(12-16a)又由Cbz·Val·(γ-OCH_3)Glu·ONP与H·Ala·Leu·Tyr·OH缩合而成。     

胰岛素B链中肽段的合成 Ⅶ.胰岛素B链C-端十四肽衍生物的合成

胰岛素B链中C-端十四肽的衍生物,即Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·(γ-OCH_3)·Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3(B_(17-30))分别从Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·ONP(B_(17-20)ONP)和H·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3(B_(21-30b))直接缩合或Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH(B_(17-23a))和H·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lyg·Ala·OCH_3(B_(24-30b))借DCCI法缩合而得。B_(21-30b)由Cbz·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3(B_(21-30))经溴化氢的三氟醋酸溶液处理后获得;B_(17-20)ONP系由Cbz·Leu·Val·(S-Bz)Cys·Gly·OH和对硝基苯酚用碳二亚胺法缩合而成。按新的方案(3+7)将Cbz·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH(B_(21-23a))和B_(24-30b)用DCCI法缩合生成B_(21-30),其物理常数与以前用(2+8)方案合成的十肽衍生物的数据相同。B_(21-23a)由Cbz·(γ-OCH_3)·Glu·ONP和(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH缩合生成;B_(24-30b)系由Cbz·Phe·Phe·Tyr·Thr·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3经催化氢化而得。该七肽衍生物又由Cbz·Phe·Phe·Tyr·Thr·OH(B_(24-27a))和H·Pro·(ε-Tos)Lys·Ala·OCH_3以DCCI法缩合而得。B_(17-23a)则由B_(17-20)ONP和H·(γ-OCH_3)Glu·(N~G-NO_2)Arg·Gly·OH 缩合而成。     

吗啡和纳洛酮对损毁下丘脑诱致的大鼠胃粘膜损伤之影响

本实验观察了静注吗啡和纳洛酮对电解损毁后部下丘脑诱致的大鼠胃粘膜损伤的影响并观察了在静注吗啡、纳洛酮后和侧脑室注射纳洛酮后其胃酸分泌和血清胃泌素水平之变化。实验揭示,吗啡仅略为降低该神经源性胃粘膜损伤程度,而纳洛酮则明显地减少其胃粘膜损伤;静注吗啡能抑制后部下丘脑损毁后大鼠的胃酸分泌,增加其血清胃泌素水平,而静注纳络酮后,这种大鼠的胃酸分泌增加,但血清胃泌素水平无明显变化;侧脑室注射纳洛酮对后部下丘脑损毁后大鼠胃酸分泌和血清胃泌素水平无明显影响。本结果表明,胃酸可能是导致这种消化道损伤的条件之一,而不是最重要因素;静注纳洛酮对后部下丘脑损毀后大鼠胃粘膜变化有保护作用。后者提示,内源性阿片样肽可能参与这种神经源性胃粘膜损伤的形成。     

探讨笔石反射率对奥陶系、志留系烃源岩成熟度的指示作用

通过对塔里木盆地、鄂尔多斯、江苏等地区奥陶系,志留系笔石反射率的研究,以该地区有机地球化学等综合分析指标为中介,分析笔石反射率与等效镜质体反射率之比关系,建立笔石反射率对奥陶系,志留系烃源岩成熟度的评价标准。认为笔石最大反射率,随机反射率对奥陶率,志留系烃源岩成熟度有良好的指示作用。发现笔石有机质在热演化过程中,由于笔石纺锤层等生物结构的存在,使温度成为影响笔石热演化程度的主要因素。笔石的热演化有     

黄土塬区麦田蒸散特征

利用大型称重式蒸渗仪研究了黄土塬区冬小麦不同时段单元（生育期、月、日、时）的蒸散特征,并分析了叶面积指数、土壤含水量和气温、降水等因子对蒸散的影响.结果表明,在试验年份,各生育期内冬小麦的日蒸散量:孕穗 抽穗期﹥开花期﹥起身期﹥拔节期﹥灌浆期﹥返青期﹥成熟期﹥越冬期;生长前期蒸散受温度影响较大,中期受叶面积指数影响较大,后期土壤水分成为蒸散的限制因子,灌浆期内冬小麦日均蒸散量因受土壤水分亏缺影响而显著下降,日均蒸散量从孕穗 抽穗期的625 mm·d^-1 减小到灌浆期的2.66 mm·d^-1;月蒸散以4～6月最高,3个月蒸散量占试验期间总蒸散量的80％以上;麦田逐日蒸散变化曲线上的波动峰值反映了受降水作用土壤水分状况改善条件下的蒸散特征;时蒸散过程在总体遵循周期性的前提下表现出随天气而改变的现象.     

308例脑出血血胆固醇水平分析

３０８例脑出血，血胆固醇值低于正常参数组９８例，正常组３８例（１２．３３％），Ｐ＜０．００１，高于正常参数组１７２例（５５．８４％），与低组比较，Ｐ＜０．００１。认为对低胆固醇血症与脑出血的关系应予足够重视     

里氏木霉FS10-C固体发酵基质筛选及发酵条件初探

筛选适宜里氏木霉FS10-C菌株固体发酵的基质,并优化其发酵基本条件,以期为将该菌株应用于土壤重金属污染修复中奠定基础。采用单因素试验对固体发酵基质进行筛选,在筛选结果的基础上,再运用正交试验设计初步确定适宜的发酵条件,并在50 L固体发酵罐中进行放大试验。结果表明,桔皮麦麸混合物为木霉FS10-C的最佳发酵基质,优化后的平皿固体发酵条件为:桔皮、麦麸按1∶1比例配伍,固水比为1∶1.2,接种量为5%,发酵温度为28℃,发酵14 d后产孢量可高达2.43×1010 CFU/g,且应用于固体发酵罐中发酵效果良好,产孢量达到1.44×1010 CFU/g。通过对固体发酵基质的筛选和发酵条件的优化,可实现木霉FS10-C的高密度培养,降低制剂成本,具有规模化生产的潜力。