在鱼腥藻7120中建立反义glnA系统

应用反义技术对鱼腥藻7120切的内源glnA基因的表达进行调控,首次获得了人工反义系统的蓝藻品系。先从编码谷酰胺合成酶（GS）的基因glnA中取得部分结构基因片段,与表达质粒载体pRL-439及穿梭质粒载体pDC－8相连接。通过酶切鉴定筛选出反向克隆的穿梭表达质粒pDC－AM,然后应用三亲接合转移法把它转入鱼腥藻对7120.通过新霉素筛选,酶谱鉴定,斑点杂交,质粒的交叉转化以及内源glnA基因表达的GS活性分析,GS相关的胞外泌氨分析及所获藻株的形态学变化,证明已在鱼腥藻7120中建立了人工反义glnA基因的品系。     

牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白的中华仓鼠卵巢细胞表达及免疫原性分析

本研究利用中华仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV) E^rns蛋白,并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL标准毒株基因序列为基础,构建BVDV E^rns蛋白重组真核表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E^rns,转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达。SDS-PAGE分析E^rns蛋白的表达和纯化,并用抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清进行Western blotting鉴定纯化蛋白;进一步使用纯化的E^rns蛋白免疫新西兰大白兔,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IFA)实验检测血清抗体水平及其免疫反应活性,用病毒中和实验测定免疫兔血清的中和抗体滴度。BCA蛋白定量试剂盒检测纯化的E^rns     

不同农林废弃物混合基质对崖柏扦插育苗的影响

为研究不同农林废弃物混合基质对崖柏扦插育苗的影响,筛选可替代草炭、成本低廉的环保型育苗基质,配制草炭+蛭石+珍珠岩(T₁)、食用菌菌渣+蛭石+珍珠岩(T₂)、炭化稻壳+蛭石+珍珠岩(T₃)、食用菌菌渣+炉渣+锯末(T₄)和炭化稻壳+食用菌菌渣+炉渣(T₅)5种混合基质,采用随机区组试验设计,综合评价不同混合基质的优劣。结果表明：T₃容重最低,其次是T₂,二者与其他混合基质差异显著;T₂的非毛管孔隙度显著大于T₁,毛管孔隙度低于T₁,总孔隙度低于T₃;T₂的全氮、全磷、全钾、碱解氮、有效磷、基质含水量和pH最高,且与其他混合基质的大多数化学指标差异显著。不同混合基质的插穗生根率和生长发育指标的隶属函数值表现为T₂>T₃>T₁>T₅     

苹果园两种叶螨多维生态位初步研究(英语)

两种叶螨Tetranychus viennensis Zacher和Panonychus ulmi(Koch)的多维生态位由11个生态维组成(它们包括营养,微气候和生物维).主成份分析表明:由6月到8月,在两种叶螨的生态位中叶片营养和微气候维的作用比生物维的作用大.应用主轴技术和比较生态的方法建立了两种叶螨的生态位椭球(即多维生态位).两种叶螨的生态位椭球均随时间改变其体积,在6月份和8月份趋于分离,而在7月份趋于重叠.     

作物籽粒中NO3--N和NO2--N的积累与氮肥种类和数量的关系

1996～1997在芸豆(云南)、红小豆(河北)、大豆(黑龙江)和花生(山东)绿色食品产地,研究了施用有机肥和化肥对这些作物籽粒中NO₃^-、NO₂^-的累积特点.结果表明,芸豆和红小豆不论施用有机肥还是尿素,土壤中的速效氮与籽粒中NO₂^-的灰色关联最好;施用有机肥的最大关联度分别出现在土壤库内部(全氮与速效氮之间)或籽粒库内部(NO₃^-、NO₂^-之间);而施用化肥的最大关联度分别出现在土壤库与籽粒库的全氮与NO₃^-之间.芸豆和红小豆随着施肥水平的提高,籽粒中NO₃^-/NO₂^-比值动态变化趋势因施用有机肥和施用化肥而不同.这4类作物籽粒中的NO₃^-与NO₂^-存在着极显著的负直线相关关系和极显著的直线回归关系.     

作物籽粒中NO-3-N和NO-2-N的积累与氮肥种类和数量的关系

１９９６～１９９７在芸豆（云南）、红小豆（河北）、大豆（黑龙江）和花生（山东）绿色食品产地,研究了施用有机肥和化肥对这些作物籽粒中ＮＯ＾－３、ＮＯ＾－２的累积特点。结果表明,芸豆和红小豆不论施用有机肥还是尿素,土壤中的速效氮与籽粒中ＮＯ＾－２的灰色关联最好;施用有机肥的最大关联度分别出现在土壤库内部（全氮与速效氮之间）或籽粒库内部（ＮＯ＾－３、ＮＯ＾－２之间）;而施用化肥的最大关联度分别出现在土壤     

作物籽粒中NO_3~-N和NO_2~--N的积累与氮肥种类和数量的关系

1996～1997在芸豆(云南)、红小豆(河北)、大豆(黑龙江)和花生(山东)绿色食品产地,研究了施用有机肥和化肥对这些作物籽粒中NO-3、NO-2的累积特点.结果表明,芸豆和红小豆不论施用有机肥还是尿素,土壤中的速效氮与籽粒中NO-2的灰色关联最好;施用有机肥的最大关联度分别出现在土壤库内部(全氮与速效氮之间)或籽粒库内部(NO-3、NO-2之间);而施用化肥的最大关联度分别出现在土壤库与籽粒库的全氮与NO-3之间.芸豆和红小豆随着施肥水平的提高,籽粒中NO-3/NO-2比值动态变化趋势因施用有机肥和施用化肥而不同.这4类作物籽粒中的NO-3与NO-2存在着极显著的负直线相关关系和极显著的直线回归关系     

植物病原真菌中DNA分子鉴定技术

就基因组ＤＮＡ中Ｇ＋Ｃ含量、分子杂交、聚合酶链式反应（ＰＣＲ）、限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）、随机扩增多态性（ＲＡＰＤ）,以及扩增片段长度多态性（ＡＦＬＰ）等分子标记技术,在植物病原真菌鉴定工作中的应用情况和发展趋势作了介绍。     

长叶红砂液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的克隆及表达特性

为研究长叶红砂(Reaumuria trigyna)离子转运分子机制,利用RT-PCR和RACE技术,克隆到其液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(NHX1)的全长cDNA片段,命名为RtNHX1(NCBI序列号为KR919802)。结果表明:RtNHX1的cDNA片段全长2 622bp,开放阅读框1 662bp,5′非编码区509bp,3′非编码区451bp,编码553个氨基酸,推测分子量为60.91kD。该蛋白含有12个跨膜结构域,为疏水蛋白,与其他植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白NHX1的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR对其在NaCl胁迫下的表达检测显示,不同时间和不同浓度NaCl胁迫下,RtNHX1表达量变化均呈先升高后降低趋势,在100mmol/L NaCl胁迫6h和200mmol/L NaCl胁迫后达到最高,表达量分别超过或约是对照的3倍,一定程度反应出RtNHX1参与长叶红砂的盐胁迫应答,是该植物离子转运体系的重要元件。