人胰岛素原基因B10位定点突变对增强胰外表达效率的实验研究

目的构建在肝细胞内增强表达成熟人胰岛素的生理调控性人胰岛素原基因重组质粒。方法利用PCR定点突变技术在B-C及C-A连接处已两点突变的人胰岛素原基因上进行B10位突变,并在其上游连接肝细胞特异的3倍体葡萄糖反映元件(GLRE3)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1启动子(IGFBP-1P)。经酶切后将含有调控元件的3点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)插入逆转录病毒载体(pLXSN),脂质体介导转染大鼠肝癌细胞CBRH7919后检测成熟胰岛素表达情况及与含有调控元件的2点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)表达体的表达差异。结果人胰岛素原基因的B10位组氨酸编码序列CAC突变为门冬氨酸编码序列GAC。构建了含调控元件的B10位门冬氨酸人胰岛素原基因逆转录病毒载体质粒(pLXSN-GLRE3-IGFBP-1P-3mINS),酶切、PCR及测序鉴定各段基因碱基序列及连接方向正确。pLXSN-GLRE3-IGFBP-1P-3mINS经脂质体包裹转染大鼠肝癌细胞,细胞外液含5.0、25.0mmol/L的葡萄糖浓度下胰岛素含量分别为5.03±0.72、43.90±2.30mU/L。未进行B10位突变的重组体转染组在同样葡萄糖浓度下胰岛素含量分别为<2.00、2.10±0.23mU/L。结论成功构建了含调控元件的B10位门冬氨酸人胰岛素原基因逆转录病毒载体重组质粒,该重组体已整合入鼠肝癌细胞基因组,其表达效率显著提高并受葡萄糖生理性调控。     

北葶苈子黄酮苷类成分研究Ⅱ

为了解北葶苈子的化学成分,从其50%乙醇提取物中分离鉴定了8个单体成分,经理化性质和波谱数据分析,分别鉴定为:槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(2)、槲皮素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷(3)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(4)、quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-sinapoyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-glucopyranoside (5)、槲皮素-3-O-[(6-O-trans-咖啡酰基)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖]-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (6)、isorhamnetin-3-O-sophoroside (7)和异鼠李素-3-O-β-D-[2-O-(6-O-芥子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖基]-吡喃葡萄糖苷(8)。化合物3为首次从该种中分离得到,化合物2、4、6、7为首次从独行菜属中分离得到,且化合物6的NMR 数据为首次报道。     

不同产地丹参叶解剖学研究

对不同产地丹参叶片和叶柄的主要解剖学特征进行比较,以期为丹参种源鉴定和良种选育提供依据。应用石蜡切片法观察了8个产地丹参叶的解剖结构,测量了表皮、木质部、韧皮部等指标,并应用主成分分析方法对所测数据进行了分析。结果表明:所有产地丹参叶片均为奇数羽状复叶,异面叶,叶片表面均覆有毛被。上下表皮均为1层细胞构成,无角质层;叶柄为半月形,表面亦有毛被。在叶片和叶柄横切面上不同来源丹参的结构有差异。此外,叶的解剖结构可为鉴别主产区和非主产区来源的丹参提供有力依据,并为筛选和培育丹参优良品种提供参考。     

髋关节后侧入路结合大粗隆截骨治疗PipkinⅣ型股骨头骨折

目的:探讨髋关节后侧入路结合大粗隆截骨治疗Pipkin IV型股骨头骨折的疗效。方法:回顾性分析我院2006年3月至2012年10月采用髋关节后侧入路结合大粗隆截骨治疗Pipkin IV型股骨头骨折患者共8例。其中男5例,女3例。结果:本组病例随访时间为18~58个月,平均36个月。按照采用Thompson-Epstein疗效评定标准,优:3例;良:3例;可:2例。结论:髋关节后侧入路结合大粗隆截骨治疗PipkinⅣ型股骨头骨折可获得充分的显露,并为股骨头的复位、固定提供极大方便,损伤相对较小,对股骨头血运影响小,效果良好。     

浅析图书馆计算机网络安全管理

本文介绍的重点是计算机网络安全管理如何运用在图书管管理中,从信息安全和物理安全两方面详细分析了如何做好图书馆计算机网络安全管理工作。     

高校体育器材管理存在的问题及对策研究

体育器材是高校进行体育教育的重要工具和手段。高校进行体育教育时也需要充足的、质量好的体育器材来保证课程和课外体育活动的实施。因此,提高高校体育器材的科学、合理的管理方法对提高高校体育课质量,保证体育课程的正常实施具有重要的意义。     

30M~3植酸酶发酵罐设计

本文从发酵罐的工艺设计和机械设计两个角度,并结合中华人民共和国国家发展和改革委员会2004年公布的《食品工业用不锈钢薄壁容器》(QB/T 2681-2004)即发酵罐行业标准及毕赤酵母高密度发酵特点,对福生公司植酸酶发酵罐做了详细的设计,同时基因工程的发酵生产也代表了发酵行业的一重大方向,如何设计出满足基因工程菌生长、生产的发酵罐成为基因工程菌能否高表达的关键。     

高校健美操体育价值研究

本文以健美操如何适应大学生为切入点,深入探讨了高校健美操的体育价值,并且从健身价值、教育价值、娱乐价值三方面进行论述,使其在高校能得到更好地运用和发展。     

足球游戏在大学足球课教学中的应用

在经济高速发展的今天,健康问题也不容忽视,而对于在校学生来讲,体育锻炼尤为重要,越来越多高等院校的体育教学也在进行着不断的改革与调整。本文根据足球游戏的特征分析,针对足球游戏在大学足球教学中的合理运用及其组织教学要求进行重点探讨,旨在为当前的大学足球教学提供一定的借鉴和指导,提高大学足球教育的质量。     

高血氨大鼠服用乳酸菌后焦虑降低和认知功能改善

相关证据表明,高血氨(HA)引发的神经炎和五羟色胺(5-HT)系统异常可能是导致肝性脑病(HE)认知功能下降和焦虑症状的原因.服用益生菌可能是治疗HE神经精神症状的有效措施,因为益生菌在维护免疫系统平衡和调节5-HT系统活动中发挥了重要的作用.检验了益生菌瑞士乳杆菌NS8改善HA大鼠认知功能下降和焦虑行为的有效性.通过连续4周的腹腔注射醋酸铵造成Sprague-Dawley大鼠的高血氨.然后让HA大鼠每日饮用添加了瑞士乳杆菌NS8(109 CFU/mL)的饮水.Morris水迷宫测试大鼠的认知功能,高架十字测试大鼠的焦虑行为.脑区神经炎的程度以炎性标记物诱导型一氧化氮合酶、前列腺素E2和白介素1β的水平表示.5-HT系统的活动以5-HT,5-HIAA(5-HT的代谢物)以及色氨酸(5-HT的前体物质)的水平表示.益生菌处理显著地降低了HA大鼠的神经炎程度,减少了5-HT系统的活动,改善了认知功能和焦虑行为.这些结果说明,服用益生菌瑞士乳杆菌NS8是治疗HA大鼠认知功能下降和焦虑的有效方法.