自行设计高效RNA提取方法对果树病毒检测效果的研究

目的：建立适合果树病毒检测的高效RNA提取方法。方法：以梨、苹果幼嫩叶片及韧皮部为材料,利用已有的和自行设计的RNA提取方法,研究了苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎痘病毒RT-PCR检测的效果。结果：自行设计的方法能在1h内获得纯度高、含量多、完整性好的总RNA,并能很好地用于RT-PCR扩增,扩增产物经回收、克隆和测序,证实是检测病毒的特异条带。结论：经反复多次实验证实,该方法适合果树RNA的快速提取,操作简便、快捷,可大大缩短RNA的提取时间,降低提取成本,适合大量样品的提取检测,可广泛用于各种果树病毒的研究。     

广西雅长自然保护区洞穴动物调查

洞穴生物多样性是生物多样性的重要组成部分。广西是我国喀斯特地貌主要分布区之一,洞穴生物多样性丰富,但目前研究甚少。2007年5–6月,对广西雅长自然保护区8个洞穴中的动物进行了采集分类,共获标本180余号,隶属4门10纲20目31科36种（或类群）。其中,洞穴灶马、马陆、蜘蛛等为洞穴常见类群,弹尾目、蜈蚣目、双翅目的蚊类、蝇类等是洞穴分布较广泛的类群,蜚蠊目、脉翅目等在洞穴中很少见到,是数量极少的稀有类群。潮湿洞穴比干燥洞穴物种多样性丰富,较深的洞穴比较浅的洞穴物种多样性丰富,在同一洞穴中,潮湿的洞段比干燥洞段分布的洞穴动物数量多。就洞穴动物的居栖习性而言,洞穴温度适中、湿度大、洞穴环境稳定,不受外来洪水或外来生物的侵扰,比较适宜洞穴动物生存。另在调查的过程中,发现部分洞穴生态环境遭到严重破坏,洞穴生物的生存受到威胁,为防止我国洞穴生物多样性的丧失,必须加强当地居民的洞穴生物多样性保护意识,保护洞穴环境,并制定相关法律法规保护洞穴生物。     

三种百合鳞茎提取物的抑菌作用

采用纸片琼脂扩散法测定了宜昌百合、岷江百合及兰州百合鳞茎甲醇提取物对革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)和革兰氏阴性细菌(大肠杆菌、沙门氏菌)的抑制活性,并对3种百合鳞茎提取物的含量与抑菌活性进行了剂量-效应关系分析。结果表明:3种百合鳞茎提取物对4种细菌均具有抑制活性,对革兰氏阳性细菌的抑菌活性高于对革兰氏阴性细菌的抑菌活性,且宜昌百合和岷江百合两种野生百合鳞茎提取物的抑菌活性均高于普通食用的兰州百合;3种百合鳞茎提取物的含量与抑菌活性之间存在明显的剂量-效应关系,即随着提取物含量的升高,抑菌活性明显升高。     

烟草病程相关蛋白基因启动子的克隆及序列分析

在植物的防御反应中,会诱导产生一些宿主编码的蛋白,叫做病程相关蛋白。该文通过PCR扩增,从烟草(Nicotiana tobacwn ce.Samsun)中克隆了水扬酸诱导表达的PR—1a基因的两个启动子TP12及TP13。以期用于构建诱导表达基因敲除系统,并用于无性繁殖植物的无标记基因转化。序列分析表明,启动子TP12含1313个核苷酸,与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为98．6％;TP13含654个核苷酸,与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为99．4％。     

转基因昆虫的应用研究进展

综述转基因昆虫技术的应用研究:转基因昆虫为农林害虫的防治提供了新策略,为削弱媒介昆虫传播能力提供了新方法;该技术已成为一种重要的分析基因功能的实验工具;同时转基因昆虫还是生产高附加值蛋白和昆虫自身改良的重要手段之一,文章还对转基因昆虫的应用前景作了展望。     

干扰素α-2bHis89/His159的分子获得及性能分析

目的：通过结构分析和定点突变,构建干扰素α-2bHis89/His159(IFNα-2bHis89/His159),以期获得高性能干扰素突变体。方法：采用PCR体外定点突变技术,使干扰素α-2b基因的第89位密码子由编码酪氨酸的TAC突变为编码组氨酸的CAC,第159位密码子由编码谷氨酸的GAA突变为编码组氨酸的CAC。将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。表达的IFNα-2bHis89/His159经包涵体变性、复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。以SD大鼠进行初步药代动力学研究。结果：IFNα-2bHis89/His159主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的40%以上。纯化后,IFNα-2bHis89/His159的纯度大于95%,比活性大于2.8×108IU/mg。相对于IFNα-2b较短的消除半衰期,IFNα-2bHis89/His159的消除半衰期得到延长,为2.34±0.27h。结论：构建了IFNα-2bHis89/His159的重组表达载体,并成功地在大肠杆菌中实现了高效表达,建立了IFNα-2bHis89/His159的纯化工艺,获得了体外活性增高并且体内稳定性得到改善的新型干扰素α-2b突变体。     

一株邻苯二甲酸二丁酯降解菌的筛选及其降解特性

【目的】从自然环境中筛选邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate,DBP)降解能力较强的微生物,并研究其降解特性和代谢途径。【方法】从杭州市河道污水出口的淤泥中筛选到DBP降解菌ZJUTW,对其进行形态、生理生化特征、16SrRNA基因序列分析,考察该菌株对DBP的降解特性,并用GC-MS分析降解中间产物。【结果】该菌株经鉴定为Arthrobacter sp.,降解DBP的最适温度和最适pH值分别为30°C和7.0-8.0,可降解多种邻苯二甲酸酯类化合物;当DBP浓度为800 mg/L时,半衰期为10.47 h;菌株的休止细胞(OD_(600)=1.2)可在20 h内将1 200 mg/L的DBP完全降解。利用GC-MS进行中间产物分析,该菌株可通过酯交换方式起始DBP的降解。【结论】Arthrobacter sp.ZJUTW对DBP有较强的降解能力和较高的耐受性,具有潜在的应用前景。     

Cd^2＋对家蝇生长发育的影响以及在家蝇变态过程中的代谢研究

研究重金属镉对家蝇生长发育的影响,以及镉在家蝇变态过程中的代谢。结果表明：低浓度的Cd^2 对家蝇的生长分育几乎没有什么影响,而高浓度的Cd^2 则影响家蝇卵孵化率,幼虫相对存活率,化蛹率,羽化率,百头幼虫理和百头蛹重。进入家蝇幼虫体内的Cd^2 主要分布在消化道,其次是体壁,脂肪体和血淋巴中含量很少。在家蝇变态过程中,Cd^2 的含量变化趋势十分明显：幼虫期Cd^2 逐渐累积,化蛹后Cd^2 含量大幅度下降,羽化后的第6天,成虫体内只剩下极微量的Cd^2 。这些结果表明家蝇对环境中重金属镉的反应是一种在自然选择过程中形成的高度的进化适应。     

阿维菌素对南方小花蝽抑制烟蚜的影响

在室内分别测定了阿维菌素类杀虫剂1% 9512-1乳油和虫螨克对南方小花蝽Orius similis的毒力,研究了无阿维菌素介入后南方小花蝽对烟蚜Myzus persicae捕食效应所受的影响,结果表明：阿维菌素类杀虫剂对南方小花蝽具有一定毒力,不同虫态对阿维菌素的敏感性有差异,卵的敏感性明显低于若虫和成虫;不同的阿维菌素类药剂对南方小花蝽的毒力存在差异,9512-1对南方小花蝽卵、若虫及成虫的LC_５０依次为11.2743±3.8613、2.6584±1.2139、2.4508±1.3266 mg·L^-１,虫螨克则为10.8699±3.7653、6.4422±2.8596、6.4738±3.0124 mg·L^-１;阿维菌素显著降低了南方小花蝽对烟蚜的捕食量和捕食能力,也降低了同种个体间的竞争能力;阿维菌素对南方小花蝽若虫的发育速率有显著的抑制作用,但对发育速率与取食量的线性关系无明显影响,而且对存活个体成虫期的产卵量无显著影响。     

原发性高血压患者α-Adducin基因单核苷酸多态性(Gly460Trp)与血清胆红素含量相关性

探讨了自 2 0 0 0年 9月到 2 0 0 1年 1月来自安徽省霍邱县地区原发性高血压人群中α Adducin基因单核苷酸多态性与血清中总胆红素、直接胆红素和间接胆红素含量的相关性。在原发性高血压女性患者中 ,在校正了许多可能影响胆红素含量的重要因素后 ,与携带有Gly4 6 0Gly基因型的高血压女性患者相比较 ,携带有Trp4 6 0Trp基因型的高血压女性患者血清平均总胆红素 (β =- 1 2 μmol/L ;P =0 0 1)、直接胆红素 (β =- 0 4 μmol/L ;P =0 0 2 )和间接胆红素 (β=- 0 8μmol/L ;P =0 0 3)的含量比较低。在女性中抽取总胆红素、直接胆红素和间接胆红素含量最高和最低的各 2 5 % ,在校正了重要的变量后发现携带Trp/Trp基因型的女性比Gly4 6 0Gly基因型的女性有更大的可能性血清总胆红素含量 (OR值 =4 0 ;95 %可信区间 :1 6～ 10 2 ;P <0 0 1)、直接胆红素含量 (OR值 =4 0 ;95 %可信区间 :1 6～ 9 7;P <0 0 1)和间接胆红素含量 (OR值 =2 7;95 %可信区间 :1 1～ 6 7;P =0 0 3)更低。然而 ,在男性高血压患者中没有发现任何明显的相关性。以上的结果认为在中国原发性高血压女性患者中 ,Trp/Trp基因型与低的血清胆红素含量有直接关系 ,因为Trp/Trp基因型的女性的低血清胆红素 ,进而认为也许增加了患心血