青海湖裸鲤CYP17a2基因的克隆及表达分析

CYP17a2基因是细胞色素CYP17(cytochrome P450,CYP)超家族成员之一,在卵巢发育过程中,可以与CYP17a1共同作用控制卵子的发育和成熟。研究和掌握青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)卵巢发育的基本规律,可为该鱼种的人工增殖放流及其资源保护和恢复提供技术支撑。本研究采用普通PCR和RACE方法克隆得到了青海湖裸鲤CYP17a2基因全长c DNA序列,并分析了其生物信息学意义,通过实时荧光定量PCR确定了CYP17a2基因在青海湖雌性裸鲤各组织中的表达分布特征。该基因的c DNA序列全长为1 871 bp,共编码390个氨基酸,所编码的氨基酸序列与斑马鱼和鲤鱼的同源性最高,分别为69%和64%。该基因在卵巢、卵巢膜、脑、肌肉、肝胰脏中均有表达,以在卵巢中表达量最高(p0.01)。本研究结果将为进一步开展CYP17a2基因在青海湖裸鲤卵巢发育的分子调节机理的研究中提供基础数据。     

藠头大小孢子的发生及雌雄配子体败育的细胞学研究

对栽培Ｊｉａｏ头４个品种大小孢子发生和雌雄配子体发育的细胞学观察表明,Ｊｉａｏ头小孢子细胞减数分裂过程基本正常,四分体左右对称或四面体体型,部分单核小孢子解体。散粉时,多数花粉粒空瘪,无萌发沟;部分花粉粒人单核或二核;极少数花粉粒具有生殖核和营养核。共 粒生活力低或无,无花粉管萌发。囊发育属葱型,部分能发育形成四核胚囊,大部分发育异常,出现二 核至五核胚囊,未观察到正常七细胞八核胚囊的形成。结果表     

慢性肾衰竭患者肠道菌群改变与肾小球滤过率的关系

探究慢性肾衰竭患者肠道菌群结构改变与肾小球滤过率的关系。

选取2017年3月至2020年3月我院收治的202例慢性肾衰竭患者作为试验组, 并选取198例同期健康体检者作为对照组。收集两组入选者粪便标本并进行检测, 对比两组入选者肠道菌群数量; 同时对比两组入选者体质量、肾小球滤过率、血肌酐、血尿素氮、血胱抑素C水平, 采用Pearson相关性分析肠道菌群改变与肾小球滤过率的相关性。

相比于对照组, 试验组患者肠道双歧杆菌(t=21.915, P < 0.001)、大肠埃希菌数量显著降低(t=18.220, P < 0.001), 肠球菌数量显著增高(t=16.782, P < 0.001)。相比于对照组, 试验组患者肾小球滤过率(t=147.035, P < 0.001)显著降低, 血肌酐(t=43.129, P < 0.001)、血尿素氮(t=170.206, P < 0.001)、血胱抑素C(t=22.432, P < 0.001)水平显著增高。Spearman相关性分析显示, 慢性肾衰竭患者肠道双歧杆菌(r=-0.695, P < 0.001)和大肠埃希菌(r=-0.631, P < 0.001)与肾小球滤过率呈负相关。Logistic回归分析显示, 双歧杆菌、大肠埃希菌、肠球菌、血肌酐、血尿素氮和血胱氨酸均是慢性肾衰竭患者肾小球滤过率降低的独立危险因素。

慢性肾衰竭患者肠道双歧杆菌和大肠埃希菌数量降低、肠球菌数量升高, 且与肾小球滤过率呈显著负相关。

     

CircRNA-0028171调控三氧化二砷诱导的血管内皮细胞凋亡

本文旨在研究circ RNA-0028171对三氧化二砷(As₂O₃)诱导的血管内皮细胞凋亡的调控作用。用0～15μmol/L As₂O₃作用人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) 24 h,用MTT法检测HUVECs损伤情况,用实时定量PCR检测circ RNA-0028171及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax m RNA表达水平,用Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达水平。通过转染circ RNA-0028171过表达质粒和si RNA观察circ RNA-0028171是否参与As₂O₃对HUVECs的调控。结果显示,与对照组相比,As₂O₃组细胞活性显著下降,Bcl-2/Bax m RNA比值和蛋白比值显著降低,circ RNA-0028171显著低表达。过表达circ RNA-0028171抑制As_2<...     

新型战伤急救止血剂体外细胞毒性研究

目的:研究新型战伤急救止血剂的体外细胞毒性,初步探讨其用于战伤急救止血时的生物安全性.方法:参照我国医疗器械生物学评价标准,选用小鼠L929细胞,应用MTT法、直接接触培养法、流式细胞检测细胞凋亡法、扫描电镜直接观察细胞生长状况等检测新型战伤急救止血剂的细胞毒性.结果:新型战伤急救止血剂细胞毒性为0-1级,符合我国医疗器械评价标准毒性分级标准,各浓度组与阴性对照组无差异,P＞0.05;L929细胞与沸石直接接触生长良好,流式细胞仪检测细胞凋亡率与阴性对照组无差异;扫描电镜观察在沸石表面生长良好.结论:复合新型战伤急救止血剂细胞相容性良好,符合我国医疗器械安全性评价标准,是一种安全、高效、多功能的战伤止血剂.     

亏缺灌溉对大棚甜瓜果实发育及品质影响

以甜瓜伊丽莎白品种为试验材料,在大棚甜瓜生殖生长期设置5个不同梯度的灌水量,甜瓜坐果后开始不同灌水处理,分别为T85(85%θfc,θfc表示田间持水量)、T75(75%θfc)、T65(65%θfc)、T55(55%θfc)、T45(45%θfc),研究不同亏缺灌溉程度下果实生长发育状况及对果实品质影响。结果表明:果实发育分3个阶段,分别为授粉后的7~10 d(果径增长速率3~5 mm·d-1)、10~19 d(1~2 mm·d-1)和19~35 d(1 mm·d-1);果实增长速率随着补充灌水的进行而呈波动趋势,不同灌溉条件下补充灌水后产生不同程度的复水补偿效应,一定程度上弥补了水分胁迫对产量造成的影响;随着灌水量的减少,各处理与T85相比产量分别降低了0.60%、3.59%、10.18%和16.17%,单果重T75与T85无差异,其他各处理则与T85差异显著;随着亏缺灌溉程度的加深,果实横、纵径减小,果皮变薄,果形指数随之降低;可溶性固形物含量、边糖、心糖先升高后降低的趋势,以T75最高;可溶性糖、可溶性蛋白以T75含量最高,各处理差异不显著;Vc及游离氨基酸含量以T65最高,并与其他各处理差异显著;糖、酸含量以T75最高,T65、T55、T45均与之差异显著。在武汉地区可以T75为甜瓜生殖生长期的灌水指标,指导大棚甜瓜的水分管理。     

非洲爪蟾孵化酶的纯化及其部分生化特性研究

本文以ＧＳＴ－ＵＶＳ．２抗体和卵黄膜为检测手段,采用凝胶过滤和离子交换等方法将非洲爪蟾（Ｘｅｎｏｐｕｓｌａｅｖｉｓ）孵化酶纯化了９０倍以上,并研究了其酶活性和生化特性。实验发现,孵化酶分子量为６０ｋＤ,有很强的蛋白酶活性和卵黄膜溶解活性;它很不稳定,在纯化时极易降解为４０ｋＤ分子,４０ｋＤ分子没有卵黄膜溶解活性,但仍有很强的蛋白酶活性。４０ｋＤ分子很可能只代表６０ｋＤ分子中的蛋白酶功能区,而丢失了两个ＣＵＢ重复区。孵化酶对ＥＤＴＡ和金属离子非常敏感、又为ｐ－ＡＰＭＳＦ等胰蛋白酶抑制剂所强烈抑制,表明它是属于胰蛋白酶类型的一种金属蛋白酶。其特异性ＭＣＡ－底物为Ｂｏｃ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＭＣＡ。     

植物钾离子通道AKT1的研究进展

植物生长发育过程钾具有很多重要的作用,植物吸收钾离子的重要途径中包含钾离子通道。近年来,已从同种植物的不同组织器官和多种植物中分离到多种钾离子通道基因,本文将从钾离子通道AKT1的结构、功能、调控机制以及其应用等四方面综述关于植物钾离子通道AKT1的研究进展,并对应用生物工程手段改良植物钾营养进行讨论。     

非洲爪蟾孵化酶分子对卵黄膜作用方式的研究

非洲爪蟾的孵化液对卵黄膜和二甲基酷蛋白具有降妥活性。用非洲爪蟾孵化酶的特异性抗ＧＳＴ－ＵＶ．２抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交的结果表明,孵化液中出现一种分子量为６０ｋＤ的大组分,有时也会出现一种分子量为４０ｋＤ的小组分。