呼肠病毒感染诱导的细胞凋亡和抗肿瘤作用

呼肠病毒感染可以引起多种细胞凋亡,这种调亡是造成某些动物特定组织损伤的关键机制。呼肠病毒还可以借助活化的Ras通路选择性地杀死癌细胞,因此它在肿瘤临床治疗上具有一定意义。     

重组土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA的融合表达及抗原性分析

目的:探索一种大量表达功能性土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA的方法。方法:采用SignalP 3.0 Server进行信号肽预测,将土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA信号肽的基因序列(75bp)去除,将1107bp的核心序列克隆至原核表达载体pET32a,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。结果:构建了pET32a-fopA载体,重组蛋白FopA表达量约占菌体总蛋白量60%,Western blot分析显示重组FopA蛋白有较好的抗原性。结论:获得了高效表达FopA的pET32a-fopA表达载体,为下一步土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA应用研究奠定了基础。     

蝎毒多肽提取物抑制DU- 145 细胞 COX- 2 和MMP- 9 表达的研究

目的：研究蝎毒多肽提取物（peptide extract from scorpion venom,PESV）对雄激素非依赖性人前列腺癌细胞株DU-145COX-2和MMP-9表达的影响,进一步探讨其抗血管生成的分子机制,为抗前列腺癌骨转移提供有效的治疗手段。方法：采用免疫组只化学方法检测PESV对COX-2、MMP-9蛋白表达的影响,应用RT-PCR检测PESV对MMP-9在mRNA水平表达的影响。结果：蝎毒多肽提取物（40μg／mL）作用于前列腺癌细胞后,COX-2、MMP-9蛋白表达水平明显下调（P〈0．05）,进一步检测发现MMP-9在mRNA水平亦明显下降（P〈0．05）。结论：蝎毒多肽提取物（PESV）通过抑制前列腺癌细胞血管生成因子COX-2的表达而发挥其抗血管生成作用,具有临床应用价值。     

SARS- CoV X4 基因转染对T 细胞 TNF- A及IL- 6 分泌的影响

目的：通过检测SARS-CoV X4基因转染后T细胞细胞因子分泌的变化,研究SARS-CoV X4蛋白潜在的功能及其作用机制,并探讨其与SARS-CoV致病机制的关系。方法：利用RosetteSep分离法分离外周血T细胞,以Amaxa核转染仪将pEGFP-SARS-CoV X4真核表达载体转入T细胞,应用激光共聚焦显微镜观察其瞬时表达情况,流式细胞仪检测转染效率,CBA技术检测T细胞细胞因子。结果：SARS-CoV X4基因转染后12h得到了明显表达,共聚焦显微镜观察到EGFP绿色荧光表达,流式细胞仪检测其表达率为245;与空载体转染组相比,SARS-CoV X4基因转染能显著促进T细胞IL-6及TNF-α的分泌。结论：SARS-CoV X4蛋白可诱导T细胞分泌前炎症因子IL-6及TNT-α,SARS-CoV X4蛋白可能在SARS发病机制中起重要的作用。     

Primary functional identification of gene <Emphasis Type="Italic">TMSG-1</Emphasis>

TMSG-1 was a tumor metastasis-related gene identified using mRNA differential display, whose expression level was lower in cancer cell lines with higher metastatic potential and in tumor tissue with metastasis. TMSG-1 was transfected to prostate cancer cell line (PC-3M-1E8) with high metastatic potential to observe the effects of increased expression of TMSG-1 on V-ATPase activity, intracellular pH and cell apoptosis. Subcellular localization of the encoded protein of TMSG-1 was determined by using GFP. Results showed that there were no differences of V-ATPase activity among parental PC-3M-1E8 cell line, pcDNA3 transfectant and anti-TMSG-1 transfectant, whereas the V-ATPase activity was significantly higher in TMSG-1 transfectant than that in parental PC-3M-1E8 cell line, pcDNA3 transfectant and Anti-TMSG-1 transfectant (p<0.001). Intracellular pH (pHi) was detected by using the pH-dependent fluorescence probe BECEF. Results showed the pHi was significantly increased in TMSG-1 transfectant. Cell apoptosis assay demonstrated cell apoptosis was significantly higher in -1 transfectant (p<0.01) and BCL2 expression was down regulated. Subcellular localization of TMSG-1 protein showed TMSG-1 was a transmembrane protein, which predicted TMSG-1 protein was located in cytoplasm system, such as endoplasmic reticulum and mitochondrial. These results indicated TMSG-1 up regulation in prostate cancer cell line could promote V-ATPase activity, increase pHi and cell apoptosis, and inhibit the expression of BCL2.     

钙调素一级结构保守性和变异性的数量分析──Ⅰ全序列主要免疫反应位点和靶酶结合位点保守性和变异性的数量分析

用计算机为工具对３２种生物钙调素（ＣａＭ）一级结构的保守性和变异性进行了数量分析,结果表明ＧａＭ分子高度保守,其保守性强于同类生物的细胞色素Ｃ,脊椎动物ＣａＭ间的同源性在９８％以上,被子植物ＣａＭ间以及被子植物与脊椎动物ＣａＭ间的同源性高于８８％;脊椎动物与单细胞藻类ＣａＭ间的同源性也在８０％以上。对亲源关系较近的物种,它们的ＣａＭ主要免疫反应位点和靶酶结合位点间的同源性大于全序列间的同源性;对亲     

昆明山海棠的生物碱——雷公藤次碱

昆明山海棠〔Tripteryginm hypoglancum(Levl) Hutch〕根用于治疗类风湿性关节炎据不完全统计已达千余病例,临床疗效较好。目前,已用昆明山海棠根的酒精提取物制成片剂,供临床治疗类风湿性关节炎用。昆明医学院第一附属医院用我们从昆明山海棠根中提出的生物碱A治疗类风湿性关节炎,经初步临床观察认为疗效显著,有效剂量为口服18—27毫克/日,服用5周左右可基本控制症状,对类风湿因子由阳性转为     

家蝇蛆抗菌肽提取工艺研究

蝇蛆抗菌肽多有广谱抗菌、抗癌等功能,是很好的天然抗菌药物来源,但由于得率较低,目 前对其产品开发的研究较少。以家蝇Musca domestica干蝇蛆为原料,利用加热-层析法和海藻酸吸附法2种工艺提取蝇蛆抗菌肽。结果表明：加热-层析法快速、简便,抗菌肽提取得率达0.26％,是海藻酸吸附法提取抗菌肽得率的5.2倍。提取的家蝇抗菌肽主要是分子量6.2～17.2 kD、等电点5.59～5.91的弱酸性小分子多肽,其热稳定性高,能杀灭枯草杆菌Bacillus subtilis等多种革兰氏阳性菌。加热-层析法能有效去除外源性蛋白酶,保证肽类产品的稳定性,同时还能提取出非蛋白类的抗菌成分,提示其对开发具有高附加值的抗菌产品将会有良好的应用前景。     

国产杜鹃共叶解剖与分类群

报道了分别隶属于杜鹃花属（Ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｏｎ）中８个亚属的国产３３个种叶片的解剖特征。根据中脉维管束结构特点：木质部与韧皮部的位置,木质部的形状,木射线排列的方式,可分为５个类型：（１）圆形周韧维管束;（２）羽线肾形周韧维管束;（３）扇线肾形周韧维管束;（４）近周韧维管束;（５）下韧维管束。讨论了中脉维管束类型可能的演化趋势：周韧维管束→近周韧维管束→下韧维管束。还讨论了８个亚属中脉维管束所     

国产杜鹃花叶解剖与分类群

报道了分别隶属于杜鹃花属 ( Rhododendron)中 8个亚属的国产 33个种叶片的解剖特征。根据中脉维管束结构特点 :木质部与韧皮部的位置 ,木质部的形状 ,木射线排列的方式 ,可分为 5个类型 :( 1)圆形周韧维管束 ;( 2 )羽线肾形周韧维管束 ;( 3)扇线肾形周韧维管束 ;( 4 )近周韧维管束 ;( 5)下韧维管束。讨论了中脉维管束类型可能的演化趋势 :周韧维管束→近周韧维管束→下韧维管束。还讨论了 8个亚属中脉维管束所处的演化阶段