一株谦逊迷孔菌Daedalea modesta的分离及其杀线虫的作用

为了研究野生担子菌对线虫的作用效果,从腐木桩上采集担子菌,应用常规组织分离法获得纯培养菌丝,以全齿复活线虫作靶标,初步筛选到1株对线虫有高活性的菌株,应用形态学方法和分子生物学方法进行了种的鉴定,测定了其对全齿复活线虫Panagrellus redivivus、松材线虫Bursaphelenchus xylophilus、爪哇根结线虫Meloidogyne javanica的杀线虫活性,并测定了其在不同条件下的发酵液对全齿复活线虫、松材线虫和爪哇根结线虫二龄幼虫的作用效果。经鉴定该菌株为谦逊迷孔菌Daedalea modesta,其菌丝在平板上能够迅速杀死线虫,平板菌落上接种线虫48h,菌丝对全齿复活线虫、松材线虫和爪哇根结线虫的致死率分别为95.61%、85.75%和100%;其马铃薯葡萄糖液体发酵液25℃处理全齿复活线虫、松材线虫和爪哇根结线虫二龄虫24h线虫死亡率均达100%,发酵液稀释10×时,对爪哇根结线虫仍有致死效果。本研究为该菌株用于线虫防治的进一步研究提供了科学参考。     

产ESBLs肠杆菌科细菌的检测及耐药性

目的对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的病原菌分布及耐药性进行分析,进而为临床合理用药提供依据。方法应用西门子MicroScan autoSCAN4全自动细菌鉴定及药敏分析仪对2014年1月-12月在大连市妇幼保健院住院患者送检的标本进行菌株鉴定及药敏分析,对提示产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行纸片扩散法确认,统计分析其分布情况及耐药情况。采用ERIC-PCR法检测同源性。结果检测出125株产ESBLs的肠杆菌,包括大肠埃希菌88株,肺炎克雷伯菌37株。其病区分布情况:肺炎克雷伯菌主要分布在新生儿科,占67.6%,且存在流行感染。大肠埃希菌主要分布在各个产科病房,占48.9%。产ESBLs的肠杆菌对18种抗菌药物的分析表明对β-内酰胺类及第三代头孢菌素类抗生素耐药率达100.0%,对氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类和磺胺类药物出现不同程度的耐药,对碳青霉烯类抗生素敏感率较高。结论临床分离的产ESBLs的肠杆菌主要以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,且为多重耐药,甚至广泛耐药,因此临床治疗上应严格合理选用抗生素。     

H.pylori抗体鸡蛋制品对H.pylori感染BALB/c小鼠的实验研究

目的通过幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)标准株的接种,建立BALB/c小鼠感染H.pylori胃炎动物模型,评价H.pylori抗体鸡蛋制品对小鼠感染性胃炎的预防效果。方法将灭活的H.pylori国际标准菌株(NCTC 11637)作为抗原,对产蛋鸡进行免疫。免疫后收集鸡蛋,对达到效价的鸡蛋,无菌采集卵黄。BALB/c小鼠60只,适应性喂养1周后,随机分为5组,Ⅰ组为胃炎模型组,Ⅱ组为生理盐水组,Ⅲ、IV、V组分别为低剂量、中剂量和高剂量卵黄抗体组,每组12只。Ⅰ组予H.pylori菌液灌胃造模,Ⅱ组先予生理盐水灌胃后再予H.pylori菌液灌胃对照,Ⅲ、IV、V组分别用不同剂量抗H.pylori卵黄抗体灌胃后再予H.pylori菌液灌胃造模。小鼠均于距最后一次灌胃后8周全部处死,用微需氧细菌培养检测H.pylori定植;HE染色观察小鼠胃黏膜病理组织学改变。结果在接种H.pylori后第8周,Ⅰ组和Ⅱ组小鼠胃内均有大量H.pylori定植,感染率为91.7%,Ⅲ组的感染率是58.3%,IV和V组的感染率均小于30%。结论 H.pylori抗体鸡蛋制品可以抑制BALB/c小鼠感染H.pylori,抗体的保护作用与抗体的剂量呈正相关。     

磷脂酶Dα在拟南芥低温驯化过程中的作用途径分析

本研究对低温驯化和未经低温驯化的磷脂酶α基因敲除突变体与野生型拟南芥植株进行冻害胁迫处理后,通过观测植株表型和膜离子渗漏率的变化,鉴定两种基因型植株的抗冻性.结果发现,低温驯化后,PLDα敲除突变体的抗冻性明显低于野生型,表明PLDα参与植物的低温驯化过程.对其作用途径进行分析发现,PLDα不参与低温驯化过程中ABA信号转导作用,也没有参与SOD、CAT和POD等3种抗氧化酶活性的调节,但是参与低温驯化过程中膜稳定性调节和渗透调节过程.     

有机肥和无机肥对菜地土壤N2O排放及其来源的影响

以北京地区白菜地为研究对象进行肥料试验,结合乙炔抑制试验设置有机肥乙炔组、有机肥无乙炔组、无机肥(尿素)乙炔组、无机肥无乙炔组4个处理,利用N₂O稳定同位素自然丰度技术,研究菜地土壤N₂O排放通量和同位素特征值的变化规律,旨在明确在不同肥料作用下N₂O产生和消耗的微生物途径,为减少菜地N₂O排放和科学施肥提供理论依据.结果表明: 在白菜生长期内有机肥乙炔组、有机肥无乙炔组、无机肥乙炔组、无机肥无乙炔组的N₂O总排放量分别为(374±37)、(283±34)、(458±36)、(355±41) g·m^-2,有机肥处理的N₂O通量显著低于无机肥处理,乙炔组的N₂O通量显著高于无乙炔组;两种肥料处理的N₂O还原程度基本相同,而无机肥处理的硝化作用更高;乙炔仅抑制部分硝化作用,在N₂O排放高峰期也仅抑制部分N₂O还原,当排放降低时才能完全抑制N₂O还原.可见,无机肥尿素能够促进硝化作用进而增加N₂O排放,高浓度的N₂O对乙炔抑制N₂O还原起拮抗作用.因此,在北京地区菜地使用有机肥替代部分无机肥可以有效减少硝化作用触发的土壤N₂O排放,同时在使用乙炔抑制方法研究N₂O来源时应考虑合理的N₂O浓度阈值.     

不同灌溉量对华北平原菜地N2O排放及其来源的影响

以华北平原菜地为研究对象,通过控制灌溉量设置不同的土壤水分对照,利用稳定同位素¹⁵N自然丰度法,结合传统的乙炔抑制试验,对不同土壤水分条件下的N₂O排放、N₂O同位素特征值以及同位素异位体位嗜值(SP值)变化规律进行分析,以阐明不同水分条件下N₂O的排放规律及其来源.结果表明:水分条件显著影响N₂O排放,相比于50%土壤孔隙含水率(WFPS),70%WFPS的水分条件下N₂O的排放较高.N₂O的排放集中在施肥前期,在施肥中后期迅速减弱.50%WFPS条件下,N₂O的排放最初以硝化作用为主,占比约为90%,随后硝化作用迅速下降,反硝化变成主导作用,施肥7 d后即达到80%以上;而70%WFPS条件下初期则以反硝化为主,占比约为70%,随后下降至40%左右,施肥10 d后逐渐升高至80%.整体上,N₂O的排放主要以反硝化作用为主,不同水分处理对土壤硝化、反硝化作用的影响主要体现在施肥前期,后期均以反硝化为主.综上,建议华北地区的菜地生产应适当降低灌溉量,以减少N₂O排放.     

山东潍坊地下水硝酸盐污染现状及δ15N溯源

采用均匀布点选取了山东潍坊居民区、粮田和蔬菜种植区等区域地下水为研究对象,分析了地下水硝态氮含量及污染来源,结果表明:潍坊地区地下水硝态氮平均含量为28.1 mg/L ,按照国家地下水质量标准(GB/T 14848-93)属于Ⅲ类水;饮用水井硝态氮平均含量为23.3 mg/L, 最高值达到了150 mg/L,对国家饮用水标准(10 mg/L)超标率高达73.5%,严重超标率达50%;不同土地利用方式下地下水硝态氮含量不同,设施蔬菜种植区最高,其次是露地蔬菜种植区, 小麦-玉米种植区地下水硝态氮含量较低,但都超过了WHO饮用水中硝酸盐的最大允许含量50 mg/L的规定(折合为硝态氮11.3 mg/L);硝酸盐与水质离子之间的相关性以及水质分析相关的派珀图分析显示地下水硝酸盐污染与氮肥施用有关;根据硝酸盐δ¹⁵N的稳定同位素溯源分析,潍坊地区地下水硝酸盐41.5%来自于化肥,14.6%来自于生活污水,其他是来自化肥、生活污水和家畜粪尿的混合污染。综上,潍坊市地下水硝酸盐污染非常严重,已经对当地居民的身体健康造成了潜在的威胁;因此,亟需从源头控制做起,减少肥料的过量投入和生活污水的随意排放,以控制硝酸盐的继续污染及改善当地水环境。     

杀松材线虫的两株野生担子菌

为了筛选有效的杀松材线虫野生担子菌菌株,以期用于开发安全高效杀松材线虫生防制剂,从野外采集担子菌子实体,采用常规组织分离法获得纯培养菌株303株,以全齿复活线虫Panagrellus redivivus作靶标进行皿内菌丝杀线虫活性测定,获得2株高活性的菌株BSN003和BSN034,结合形态学和ITS序列分析,将菌株BSN003鉴定为Neonothopanus nambi,菌株BSN034鉴定为棕榈微皮伞Marasmiellus palmivorus;两菌株的菌丝在平板上对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus均有较强的杀线虫能力,在长有菌落的CMA平板上接种松材线虫48h,菌株BSN003处理线虫的死亡率为100%,菌株BSN034处理线虫的捕食率为93.6%。本研究表明N. nambi和棕榈微皮伞是松材线虫生物防治的潜在资源。     

HBV感染对肝癌组织MMP-2和PTEN表达的影响

目的探讨肝癌组织MMP-2(基质金属蛋白酶-2)和PTEN(张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶基因)蛋白表达与临床病理参数的关系以及HBV感染对两者表达的影响。方法用免疫组织化学(S-P)链霉菌抗生物素过氧化物酶法检测21例肝癌组织和10例癌旁组织MMP-2和PTEN蛋白表达。结果MMP-2在肝癌组织阳性表达率为69.0%,明显高于癌旁组织的40.0%(P<0.05),在高中分化和低分化组分别为31.6%和50.0%(P>0.05),门脉癌栓转移和未转移组分别为100%和21.1%(P<0.01)。在血清HBsAg阳性和阴性组MMP-2表达阳性率分别为66.7%和33.3%(P<0.05);PTEN蛋白在肝癌组织表达缺失率为32.5%,明显高于癌旁组织的10.0%(P<0.05),在高中分化和低分化组缺失率分别为47.4%和50.0%(P>0.05),门脉癌栓转移与未转移组分别为50.0%和26.3%(P<0.05),在血清HBsAg阳性和阴性组PTEN表达缺失率分别为11.1%和0(P>0.05)。结论HBV感染对肝癌细胞基质金属蛋白酶的分泌起上调作用,有利于癌细胞的浸润和转移;HBV感染能使PTEN蛋白表达缺失增加。     

磷脂酶D的细胞信号转导作用

磷脂酶D(PLD)是一类重要的跨膜信号转导酶类.分别由一个基因家族的不同成员编码.植物PLD的总体域结构相似,只是不同类型之间在某些单元上有重要差异.它们各具独特的生物化学特性.不同的PLD在不同的胁迫类型启动的特定的细胞过程中执行独特的细胞信号转导功能.PLD与其它磷脂酶及Ca2 信使之间有交互作用,形成复杂的信号转导网络.这一网络在不同植物种类、器官、组织和细胞类型中表现出特异性.文章最后讨论了PLD研究中有待揭示的问题并展望了今后的发展方向.