马传染性贫血病毒弱毒疫苗株与亲本强毒株的体内病毒载量与诱导保护性免疫关系的研究

慢病毒免疫应答的载量阈值学说认为病毒载量决定了机体对病毒反应的类型。为了探讨马传染性贫血病毒(EIAV)血浆病毒载量与马体免疫保护的相关性,本研究利用Real-time RT-PCR方法对EIAV弱毒疫苗株(EIA-VDLV125)免疫马和EIAV强毒株(EIAVLN40)非致死剂量接种马血浆中病毒载量进行了动态比较。结果显示两组马在监测过程中皆可检测到相似水平的病毒载量(103～105copies/mL),且两者之间差异不显著(P0.05)。以上毒株接种23周后,对马匹进行了强毒株(EIAVLN40)的致死剂量攻毒,根据攻毒后典型马传贫急性发病与否确定接种保护率。结果显示,疫苗组的保护率为67%而非致死剂量强毒组的保护率为0。以上结果提示,病毒血浆载量不是决定EIAV弱毒疫苗诱导免疫保护能力的主要或单一因素。     

巨细胞病毒单克隆抗体的建立和应用

应用人巨细胞病毒(CMV)AD169株免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与SP 2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,得到4株(12H、3H、47C和6H)能分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞。其中47C株McAb(滴度≥512 000)经辣根过氧化物酶标记,能与细胞培养中的AD169株和Davis株CMV发生特异性核内染色反应。14份出现CMV典型病变的临床阳性标本中,12份呈明显的阳性反应,另2份为弱阳性反应,而对正常细胞及感染其它病毒的细胞均无染色反应,说明该McAb具有较好的特异性。用于鉴定分离的毒株,一天内可出结果,比中和试验快速、简便。     

盐度对施氏鲟和西伯利亚鲟稚鱼的急性毒性

比较了盐度对施氏鲟(Acipenser schrenckii)和西伯利亚鲟(A. baerii)稚鱼的急性毒性效应.结果表明:施氏鲟稚鱼的96h盐度半致死浓度(LC50)为14.72,西伯利亚鲟为13.08;96h盐度LC50及盐度反应曲线显示,施氏鲟对盐度的耐受力大于西伯利亚鲟;在高盐度(≥14.70)下,2种鲟鱼依次表现出缓慢环游、狂躁环游、活动减弱、身体失衡和活动停止(死亡)等5种行为反应;西伯利亚鲟各行为反应出现的时间均早于施氏鲟,说明西伯利亚鲟对盐度的反应较施氏鲟敏感.     

黄色羊驼皮肤细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)完整CDS区结构域分析

用RT-PCR法获得了黄色羊驼皮肤的CDK5完整CDS区,其长度为891bp,与其他哺乳动物相比,高度保守。通过对其结构域分析,发现羊驼CDK5编码区在第10-203位氨基酸间含有多个激活位点如ATP结合位点和P25底物结合位点(?)第1-9位氨基酸和第204-292位氨基酸为两个非活性部位,其中在第204-292位氨基酸中,亮氨酸排列与亮氨酸拉链结构相似,而且位于羊驼CDK5的C-端,可能是与基因转录调控有关。     

续随子的组织培养与快速繁殖

本文对能源植物续随子（Euphorbia lathyris L．）进行离体培养与快速繁殖技术研究。结果表明：以种子、茎段和顶芽为外植体均能诱导获得无菌苗,其中以茎段或顶芽的芽诱导率较高;幼芽继代增殖的最佳培养基是White＋TDZ0．05mg·L。＋IBA0．01mg·L^（-1）＋0．1％活性炭,培养25d的增殖系数约为4．5;而最适生根培养基为1／2MS＋NAA1．0mg．L^（-1）＋0．1％活性炭,炼苗移栽后,成活率约为60％。培养过程中,通过控制细胞分裂素浓度能有效解决续随子培养中的玻璃化问题,添加0．1％的活性炭对缓解外植体和无菌苗褐化效果较好。     

亚洲玉米螟幼虫拒食活性的一种新生测方法

在研究植物源次生物质对亚洲玉米螟五龄幼虫的拒食活性中,按照改变的人工饲料配方制成饲料柱,发展出一种对饲料被取食的量直接计重的新生测方法。同时也报道了川楝素,紫雪花素和10个新克罗烷二萜化合物的活性测定结果。     

抗HEV嵌合抗体的构建及在CHO细胞中的表达

通过RT-PCR方法从分泌戊型肝炎(戊肝)病毒中和性鼠源单克隆抗体(单抗)8C11的杂交瘤细胞中克隆出抗体基因的重链可变区(VH)、轻链可变区(VK)序列,并分别克隆到含有人gamma 1重链和kappa轻链恒定区序列的pcDNA3.1/Hygro和pcDNA3.1( )质粒中,共转染中华仓鼠卵巢癌细胞(CHO)细胞.RT-PCR结果表明,转染的CHO细胞转录了嵌合重链及轻链基因,间接ELISA及Western blot结果表明:翻译出的两种多肽在细胞内正确组装成嵌合抗体分子,并可分泌至细胞外,表达的嵌合抗体保留了原鼠单抗的抗原结合特异性及对8H3结合抗原的增强作用.8C11嵌合抗体的成功表达可降低鼠源性,为探讨戊肝抗体治疗的可能性奠定了基础.     

酪氨酸酶高产菌株的快速、简便筛选方法

报道了用含酪氨基酸的平板和培养液筛选高产酪氨酸酶菌株的方法。     

微生物学发展的一些事件的启示

我们在编写面向２１世纪的“微生物学”教材中,对国内外微生物学教材进行了比较［１］,对我们编写的教材如何现代化也提出了一些看法［２］,而在重温微生物学发展史时,其中一些事件对我们科研、教学和开发都有所教益,对面向２１世纪的微生物学的发展,也可借鉴。因而编写出几篇小文,发表我们的感想,请批评指正。１提出问题比解决问题更重要１９２９年英国微生物学家弗莱明（Ｆｌｅｍｉｎｇ）在培养金黄色葡萄球菌时,发现一种青霉菌能抑制金黄色葡萄球菌生长,经仔细观察研究,认为是由于这种霉菌产生的代谢产物作用之故,这种代谢产…