番茄多聚半乳糖醛酸酶cDNA的克隆及其对番茄中PG表达的反义抑制

通过PCR扩增获得了包含多聚半乳糖醛酸酶(PG)全部阅读框架的1.5kb cDNA,经限制酶酶谱和部分序列分析鉴定无误后,将其以反方向插入含两个增强子的35s启动子和Nos3＇端之间,构建成表达PG反义RNA的双元载体,经农杆菌途径转化番茄品种“丽春”,获得了60株抗卡那霉素再生植株,经PCR检测,证明有2／3的再生植株有外源PG基因导入,成熟果实的PG粗提液的SDS—PAGE分析表明：若干株系中PG蛋白量较对照有不同程度的下降。PG活性亦同步下降,其中一个株系3^＃,PG酶活下降了93%。这些结果表明外源PG基因的反方向导入有效地抑制了内源PG基因的表达。     

异源单克隆和多克隆抗体在检测无病毒唐菖蒲试管苗中的应用

利用异源的单克隆抗体和多克隆抗体通过间接酶联免疫吸附试验,检测了深圳唐菖蒲的叶组织、块茎和试管苗中的病毒。单克隆抗体检测教果优于多克隆抗体,并与电镜观察结果相符。在间接酶联免疫吸附试验中,同源多克隆抗体对烟草花叶病毒(TMV)检测的灵敏度比侵染性试验高30倍。 同时对该方法在大规模检测其它无病毒试管苗中的重要性和可行性进行了讨论。     

香蕉束顶病及其防治的研究 I．病原物的电子显微镜观察及束顶病的诊断性治疗

对广东、福建等地区香蕉束顶病,进行了病原物的超薄切片电镜观察和诊断性冶疗的研究。在感病埴株的根部,叶片中脉的输导组织和薄壁细胞内,观察到多形态细菌状体。长度约0．8—1．2μm,直径约0．5μm。外缘具有波纹状胞壁结构,胞壁厚度25nm。细胞内可见高电子密度的DNA丝状团聚物。用减压抽提方法,在病株输导组织内获得的组织液,经电镜负染法同样观察到细菌状体,移态结构大小均与超薄切片结果一致。健株相应部位的超薄切片未见该细菌状体。已经萎蔫的束顶病株经青霉素处理后有明显疗效,病株恢复生长,并能结蕉。对照株则已枯死。作者认为香蕉束顶病的病原物为难养细菌(Fastidious Bactevia),这是在香蕉束顶病株中发现难养细菌的首次报道。     

北京苜蓿花叶病毒H-10分离物的研究I．病毒的生物学测定、提纯及其理化性质

从苜蓿上经单斑分离得到H-10分离物,经生物学鉴定和电镜下形态、大小的观察以及理化性质的分析,确认为苜蓿花叶病毒(AMV)。在芸豆和豇豆上只产生局部坏死斑而无系统病状。致死温度50--55℃,l 0分钟,体外存活(室温下)12-24小时,稀释限点2×10-3一10-3,蚜虫传,等电点4．60。提纯制品在电镜下呈现五种颗粒,其宽度大致相等,约18—20nm, 但长度分别为58、45、37、29nm,第五种最小颗粒近球形,直径为18—20nm。病毒经分析超离心后出现四个主峰,其沉降常数分别为97S、87S、77S和675;经3％凝胶电泳后虽可检出16个组分,但其中四个组分是主要的。初步认为这四个组分即B M、T6和Ta。     

葡萄卷叶病毒的纯化、血清学研究及其在脱毒组培苗检测中的应用

将具有典型葡萄卷叶病(Grapevine leafroll diseas,GLRD)症状的葡萄组织,经差速和硫酸铯—蔗糖密度梯度离心,提纯了GLRV,并制备了兔抗血清。电镜下可观察到长度从600～2000nm的线形病毒颗粒,其中以1400nm左右为主。免疫电镜结果表明线形病毒颗粒能被美国的NY-1分离株抗血清(Ⅲ型)所修饰。在间接ELISA中提纯制品与GLRV的Ⅲ、Ⅳ、Ⅱ型抗血清均能产生免疫反应。与Ⅲ型抗血清产生较强的免疫反应,Ⅳ型次之,Ⅱ型最弱。在SDS-免疫双扩散实验中病组织韧皮部粗提液与GLRV的Ⅲ,Ⅳ、Ⅱ型抗血清均产生免疫沉淀线。从而推测我国葡萄园内的葡萄卷叶病很可能由2种或3种卷叶病毒感染所致.采用A蛋白夹心酶联免疫吸附试验(PAS-ELISA)检测葡萄试管苗,Ⅲ型抗血清和自制抗血清的平行测试结果基本相符,共获得11个生食葡萄和10个山葡萄品种的脱葡萄卷叶病毒和扇叶病毒的组培苗,扩繁后田间试种表现出良好的农艺性状。     

迈向廿一世纪的生物工程

迈向廿一世纪的生物工程莽克强（中国科学院微生物研究所北京１０００８０感谢大会给我机会做本届大会主题报告。这个主题中该讲的内容太丰富了,短短几十分钟内不可能面面俱到,只能就个人水平选择可能是开拓性的生长点性质的,下世纪前期较有望开花结果的课题。因此只选了基因组计划（或基因组学）、ＤＮＡ药物和农业生物工程新机遇三个题目。此外,细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）、细胞循环（Ｃｅｌｃｙｃｌｅ）、ＤＮＡ疫...     

植物基因工程进展

一、植物基因工程的回顾和展望 从1974研究Ti质粒开始至今已15年,这期间植物基因工程取得了比预期要快得多的进展,重要的突破集中在以下两方面: 1.外源基因转入植物体内的方法不断改进: 1983年整合型的Ti质粒和双元型Ti质粒转化系统的建立,使外源基因可高频率地整合至受体染色体中并获高效表达 1985-1986利用PEG。     

大麦条纹花叶病毒新疆株3''''端基因组的克隆及分析

我们应用多次加尾的方法,对大麦条纹花叶病毒新疆株的RNAs基因组进行克隆。在所述条件下可以合成2000～3000核苷酸长度的cDNA。通过原位杂交、转印杂交(Northern blot)证明所得克隆属于RNA_1和RNA_3组分,并包含有3′端基因组结构。对部分克隆进行了酶谱分析。