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抗CD20嵌合抗体片段Fab′突变体的表达和活性研究 总被引:6,自引:2,他引:4
利用PCR方法从抗CD20单链抗体(ScFv)表达载体上扩增抗CD20抗体轻链可变区基因(VL)、重链可变区基因(VH),同时在抗体的可变区引入突变,然后将VH、VL基因重组到Fab′表达载体pYZF1中,构建抗CD20嵌合抗体Fab′片段表达载体,并在大肠杆菌16c9中进行高效可溶性分泌表达。经大量的筛选,获得一个产量和活性均有所提高的突变克隆。其突变位点在轻链可变区的CDR1区,即G77→A(Ser→Asn)。突变的抗体的表达量为每克干菌3.8 mg,而未突变抗体的表达量为每克干菌1.3 mg。突变体的亲和力常数Ka为2.2×109 L/mol,约为突变前的2倍。竞争性免疫荧光抑制实验表明,突变的Fab′片段能竞争性抑制鼠源性抗CD20抗体HI47和CD20表达细胞Raji细胞的结合,使HI47的结合阳性率由98%下降至37.55%,体外细胞生长抑制试验亦证明突变的Fab′片段的抑制活性明显高于未突变的抗体。 相似文献
994.
Effects of MEK inhibitor U0126 on meiotic progression in mouse oocytes: microtuble organization, asymmetric division and metaphase Ⅱ arrest 总被引:1,自引:0,他引:1
CHAO TONG HENG YU FAN DA YUAN CHEN XIANG FEN SONG HEIDE SCHATTEN QING YUAN SUNI State Key Laboratory of Reproductive Biology Institute of Zoology Chinese Academy of Sciences Beijing China. Department of Veterinary Pathobiology University of Missouri-Columbia MO USA 《Cell research》2003,13(5):375-384
In this study we used U0126, a potent and specific inhibitor of MEK, to study the roles of MEK/ERK/p90~(rsk) signaling pathway in the meiotic cell cycle of mouse oocytes. The phosphorylation of MAP kinase and p90~(rsk) in the oocytes treated with 1.5 μM U0126 was the same as that in oocytes cultured in drug-free medium. With 1.5 μM U0126 treatment, the spindles appeared normal as they formed in oocytes, but failed to maintain its structure. Instead, the spindle lost one pole or elongated extraordinarily. After further culture, some oocytes extruded gigantic polar bodies (>30 μm) that later divided into two small ones. Some oocytes underwent symmetric division and produced two equal-size daughter cells in which normal spindles formed. In oocytes with different division patterns, MAP kinase was normally phosphorylated. When the concentration of U0126 was increased to 15 mM, the phosphorylation of both MAPK and p90~(rsk) were inhibited, while symmetric division was decreased. When incubating in medium c 相似文献
995.
996.
997.
目的:观察单纯高血压痛(essential hypertension,EH)合并糖耐量减低(impaired glucose tolerance,IGT)患者窦性心率震荡(HRT)的变化,探讨其与自主神经功能损伤的关系.方法:45例EH及40例EH+IGT患者以及30例正常对照组入选,均接受24h动态心电图(DCG)记录,计算窦性HRT的初始值(TO)、震荡斜率值(TS),分析其与自主神经功能的关系.结果:原发性高血压患者有显著的HRT减弱,表现为TO升高、TS降低,其中合并IGT患者较普通高血压患者更加明显.结论:EH患者有显著的HRT减弱,其中EH合并IGT者较单纯的EH患者更加明显,证明心脏自主神经功能异常在EH,特别是EH并IGT患者中的重要作用. 相似文献
998.
在全球变暖的背景下, 植物木质部栓塞脆弱性是林木死亡率升高的重要生理学因素。然而不同方法在长导管树种上建立的栓塞脆弱性曲线存在较大差异。该研究以长导管树种刺槐(Robinia pseudoacacia)为研究对象, 利用自然干燥法、Cochard Cavitron离心机法以及Sperry离心机法建立了栓塞脆弱性曲线, 旨在探讨不同检测方法的合理性。在Sperry离心法中, 使用了两种规格的转子, 从而对“开口导管假象”学说进行了检验。研究结果表明: 自然干燥法建立的栓塞脆弱性曲线为“s”形, 而Cochard Cavitron离心机法和Sperry离心机法建立的栓塞脆弱性曲线为“r”形; 自然干燥法与离心机法建立的曲线存在显著性差异, 且两种离心机法建立的曲线也具有显著性差异。尽管刺槐枝条的导管长度分布表明14.4 cm长的刺槐枝条具有更高比例的开放导管, 但用Sperry离心机法在27.4 cm和14.4 cm长茎段上建立的栓塞脆弱性曲线相似, 表明Sperry离心机法检测刺槐脆弱性曲线时未产生“开口导管假象”, 具有更为可靠的检测结果。 相似文献
999.
籼稻标记性状等基因系的构建 总被引:6,自引:0,他引:6
选用涉及水稻(Oryza sativa L.)全部12条染色体的、表现简单遗传且易于识别的形态标记材料27份,以早籼品种浙辐802为轮回亲本,经10余次回交,转育成一套籼型标记等基因系。在此基础上,对同一染色体上的标记进行聚合,育成了15份双标记等基因系。该套材料除所带标记性状外,生育期、株高、分蘖力和穗子大小等主要农艺性状与轮回亲本基本相仿。 相似文献
1000.
依据酶的晶体结构数据对它的分子可及性进行了计算和分析 ,探讨了氨基酸可及性与酶性质的关系 ,研究了氨基酸可及性和酶等电点之间的关系 ,发现了氨基酸可及性与酶等电点之间的线性关系。 相似文献