大麦条纹花叶病毒对大麦原生质体侵染的测定

在用大麦条纹花叶病毒(BSMV)接种大麦原生质体时,用免疫过氧化物酶测定其感染率,可排除自发性干扰。因BSMV新疆分离物没有定量寄主,用EIJlsA的双抗体夹心法和BSMV-RNA的,3H-cDNA可以快速测定出感染原生质体中的病毒和核酸的增殖。     

放线菌素C对烟草花叶病毒增殖的抑制作用

已经报导过,在动物和细菌细胞中放线菌素可与DNA强烈结合,并抑制了取决于DNA的RNA的合成。本试验的结果证明,放线菌素C抑制烟草(Nicottana tabacum)正常叶组织中RNA的合成。在30微克／毫升的放线菌素c中培养时,P北向RNA中的参入降低50％。30一60微克／毫升的放线菌素c显著的抑制烟草花叶病毒在寄主体内的合成,病毒浓度降低到对照的28—64％。放线苗秦c对TMV合成的抑制作用可因外加小牛胸腺DNA而抵消     

关于云南蚕豆火风病

1963年3月,云南楚雄彝族自治州农业科学研究所航寄新鲜蚕豆病株标本并附说明:(1)当地称蚕豆火风病。自治州几个县每年均有发生。(2)病状是中间死,两头活;尖尖死,花活着。(3)一般在花期到结荚期(2—3月)     

南芥菜花叶病毒卫星RNA及其核酶的结构分析

以提纯的南芥菜花叶病毒(Arabis Mosaic Virus,ArMV)卫星RNA(sArMV)为模板,以合成的DNA寡核苷酸为引物,经过反转录—PCR扩增合成全长的dscDNA。Ds cDNA的两端连接EcoRI Adaptors插入到经EcoRI酶解的脱磷酸化的pUC 9质粒中,转化E．Coli JM83。用32P标记的sArMV为探针进行菌落原位杂交和EcoRI酶解分析,筛选出含有全长cDNA片段的克隆。用Taq TrackRsequcingSystems。脚的序列分析表明：克隆的sAxMV cDNA由300bp脱氧核糖核苷酸组成,与其RNA序列分析的结果相同,含有一个首尾相连的由54个核苷酸组成的核酶,具有完整的垂头状结构及能自我切割5'GUC↓3'的生物功能。     

表达黄瓜花叶病毒卫星RNA的转基因烟草耐烟草花叶病毒

表达黄瓜花叶病毒(CMV)的卫星RNA的转基因烟草可以抗CMV的侵染.为了决定这些植物对其它病毒,如烟草花叶病毒(CMV)的安全性,我们对这些植物接种CMV.结果发现 卫星RNA可减弱TMV引起的症状,井降低病情指数,然而却对TMV在植物中的积累没有明显影响.这一发现有助于对卫星RNA抗病机制的理解,有助于含卫星RNA的生防制剂及表达病毒卫星RNA的转基因植物的应用.本文在国际上首次报道卫星RNA可减弱非相关病毒引起的症状.1 材料和方法1.1 病毒及植物烟草花叶病毒(TMV),烟草G140种子及枯班三生烟种子均为中国科学院微生物研究所病毒室保存;含黄瓜花叶病毒卫星RNA-R1基因的烟草G140(烟Sat-G140)为中国科学院微生物研究所病毒室培育,所用材料为第三代种子.     

一种改进的快速高效DNA回收法

本文介绍了一种简易、高效、快速的ＤＮＡ回收法。该法回收ＤＮＡ效率可达９０％以上,且省时经济、适用范围广。回收的ＤＮＡ片段稍加纯化处理即可用于酶切、连接等多种分子操作。     

假单胞菌ACP株中氨基环丙烷羧酸脱氨酶基因的克隆和表达

假单胞菌ＡＣＰ株中氨基环丙烷羧酸脱氨酶基因的克隆和表达邱并生,潘其林,王晋芳,张永清,田波（中国科学院微生物研究所,北京１０００８０）乙烯参与高等植物的许多生理过程和发育过程的调节,在跃变型果实如番茄、苹果和香蕉等的果实成熟过程中起着关键作用。氨基环...     

质粒DNA的酚-氯仿一步抽提法

本文介绍了一种极快速提取质粒DNA的方法。该法是对Serghini等发表的方法的改进,全过程只需用酚-氯仿混合液抽提一次,用时少,操作简便,适用于大规模筛选重组克隆子,也可直接用作转化、酶切及DNA序列测定。     

抗水稻矮缩病毒的反义核酶及复制酶部分序列的合成、克隆及其水稻表达载体的构建

采用反转录－聚合酶链式反应方法（ＲＴＰ－ＣＲ）,在人工合成的引物引导下,扩增出水稻矮缩病毒基因组第一片段（Ｓ１）全长序列及第五片段的部分序列（ＳＳⅢ）．将扩增的片段分别克隆到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）及ｐＵＣ１９的ｓｍａｌ位点上,并进行了序列测定。在此基础上,利用ｐＣＲ引入的方法将核酶序列引入到Ｓ５Ⅲ片段反义链上以构成反义核酶基因Ｓ５ⅢＲ,将Ｓ１片段５＇端部分序列（Ｓ１－１）及Ｓ５ⅢＲ基因克隆到植物表达载体ｐＲＯＫⅡ上,构建成水稻转化载体ｐＲＯＫ－Ｓ１－１＇及ｐＲＯＫ－Ｓ５ⅢＲ。