pINC－lacZ逆转录病毒载体的构建及其在小鼠胚胎干细胞中的表达

小鼠胚胎干细胞系（ＥＳ）是从囊胚的内细胞团中建立起来的多潜能胚胎干细胞系。ＥＳ细胞系目前正广泛用于将基因打靶后的突变和其它遗传变化导入小鼠的种系中。其中,嵌合鼠的获得是非常必要的一步。这就需要用一个可以广泛表达的基因对ＥＳ细胞进行标记。大肠杆菌β－半乳糖苷酶（β－ｇａｌ）基因的表达在细胞水平就能很容易地观察到,而且对哺乳动物细胞没有任何毒害作用,因而是一个被广泛地用于各种细胞基因表达研究中的报导基因。猿类巨细胞病毒早期（ＳｉＣＭＶＩＥ）启动子是一个广泛用于转基因小鼠研究中的强启动子。然而,该启动子在ＥＳ细胞方面应用的报道尚未见到。本研究用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,从ｐｓｖ－β－ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ中得到３．７Ｋｂ的ｌａｃＺ基因片断,将其插入到ｐＩＮＣ载体上（Ｆｉｇ．１）,得到ｐＩＮＣ－ｌａｃＺ（Ｆｉｇ．２）。用ＮｏｔⅠ线性化ｐＩＮＣ－ｌａｃＺ后,电击导入ＭＥＳＰＵ－１３细胞中。ＭＥＳＰＵ－１３为本实验室从１２９／Ｔｅｒ品系小鼠的囊胚中建立的一个ＥＳ细胞系。转化细胞在含有２５０μｇ／ｍｌＧ４１８的培养基上培养两周,进行ＭＥＳＰＵ－１３细胞稳定转化子的筛选。在一次转化实验中,从１ｘ１０７个转化的ＭＥＳ     

北方狭口蛙个体发育的研究 Ⅲ.几种重要血管的发生与变化

关于北方狭口蛙的个体发育的研究,李汝祺曾在1934年发表过有关早期胚胎发育的观察(Li Ju-Chi,1934)。1958年江先群与李汝祺(1958)又发表了有关鳃和肺的发生与发展的研究。随后在1959年林志春与李汝祺(1959)又做了食物对其消化系统发育影响的分析。在所有这些研究中,作者们一再指出,如果从形态、生理和生态三位一体的角度来研究个体发育,任何器官的发生与变化都是有其适应的意义的。而作为把以上三方面结合起来的一种研究材料,北方狭口蛙是相当适合的,因为它发育速度不仅快,而且它在发育上所需要的条件也很特殊(Li Ju-chi,1934)。     

转基因小鼠

转基因动物是动物基因工程在医学和农业生物学研究中突出的成果。转基因动物在近十年中已取得很多成果,并为研究分子遗传学、发育生物学、医学遗传学提供了许多宝贵的资料,为研究肿瘤病因学及家畜育种开拓了新的途径。     

分子遗传学简介

分子遗传学是一门折兴的学科。它是1953年Watson和Crick提出了DNA双螺旋结构模型,并用它阐明 遗传物质的复制后建立起来的学科。经六十年代,人们揭示了三体密码和蛋白质合成过程,建立了中心法则,与 此同时也揭示了基因调控原理以及突变的分子篆础等知识。这样就大大地乍富了分子遗传学内容。由于它的发 展,不仅使遗传学的发展走在生物学各门学科的前面,同时也推动了其它‘fit-科如医学、农学及工程学的发展。因 此,向读者介绍一点分子遗传学知识,对当前实现四个现代化是有用的。     

分子遗传学简介

现在我们知道并不是所有的病毒都含有DNA,有 些病毒是由RNA和蛋白质组成,它们不含DNA。那 么,在这种病毒中,遗传信息是否储存在RNA分子中 昵？     

摇蚊唾腺多线染色体的研究 Ⅰ.第Ⅳ染色体的组织化学分析

本文研究了北京摇蚊(从它的幼虫期至蛹期发育过程中)的第Ⅳ染色体上“泡”的变化以及对第Ⅳ染色体的组织化学分析。观察结果表明,唾腺细胞第Ⅳ染色体的IVA_3、IVA_5、IVB,斑带上的“泡”在不同发育过程中其表现不一致,每一个“泡”的发生、发展和消退都各自有自己变化的规律性。组织化学分析表明“泡”中含有少量的酸性蛋白、碱性蛋白和大量的RNA。而且还观察到RNA从“泡”释放到核液中的现象。     

低温环境对小鼠乳酸脱氢酶活性的影响

本文以总酶活性测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳为手段,探讨了4℃低温环境对小白鼠LDH的影响。在低温环境下,小白鼠6种组织LDH总活性显著下降(P<0.05),肾脏和心脏的H型LDH相对活性显著上升,而M型LDH相对活性显著下降,相应地B亚基比例显著上升,而A亚基比例显著下降。这种变化可能反应了在低温环境下小白鼠这种恒温动物厌氧代谢急剧下降。本文还从基因表达的角度初步讨论了这种变化的可能原因。     

摇蚊唾腺多线染色体的研究——Ⅱ.第Ⅰ和第Ⅱ染色体在幼虫到成虫期间的可逆性变化

通过观察摇蚊唾腺多线染色体的第Ⅰ和第Ⅱ染色体上的“泡”(疏散区)在不同发育阶段中的活动,表明了染色体上的不同的“泡”的发生、发展、消失在空间和时间上都是不同的。这些变化是与摇蚊个体发育不同阶段的生理和生化代谢的状态相联系的。“泡”是基因活动的表现,同时也表明摇蚊在从幼虫到成虫的变态中,细胞分化和器官有规律的发生都是与染色体上的基因按固定的时空活动密切相关的。     

北京鸭LDH同工酶的研究——Ⅲ.LDH座位在北京鸭发生过程中的表现方式

采用电泳结合光密度扫描的方法,对北京鸭肝脏、胸肌、心肌和肾脏4种组织的LDH同工酶进行了发生遗传学分析。发现LDH座位在北京鸭发生过程中有三种表现方式:肝脏表现出B型酶到A型酶的典型转换;胸肌则表现出AB型酶到A型酶的特殊转换;心肌和肾脏始终保持B型酶为主,只表现出量上的增加趋势,同时也发现LDH1同工酶各亚带也具有组织的和发育阶段的特异性。显然这都是由于LDH座位即ldh a和ldh b两个基因的差别表达所造成的。     

北京鸭HMGs和HP_1的分离纯化及其对细胞核体外转录的影响

本文用改进的CM-Sephadex C-25柱层析的方法,纯化了HMG各组份及HP_1。在北京鸭嗜多染红细胞核体外转录体系中测定了HP_1、HMGs及HP_1+HMGs对转录活性的影响,实验结果表明,单独的HMGs和单独的HP_1对转录活性均无显著性的影响,而HP_1+HMGs对转录活性有明显的抑制作用。