微生物流式分选的单细胞样品制备及存活率提高的方法优化

【背景】以流式细胞技术为代表的高通量筛选技术能够高效筛选具有目标性状的微生物工程菌株。在流式分选中微生物的粘连会造成分析数据不准确，分选纯度降低，因此快速简便的单细胞样品制备是流式检测的关键。优势菌大多是通过筛选偶联荧光蛋白的随机突变库获得，阳性率低，杂质和死细胞的自发荧光较强，容易混入分选门内造成存活率降低，亟须提高分选存活率的方法。【目的】建立一种简便的微生物流式分选的单细胞样品制备方法，并通过碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色提高分选样品存活率。【方法】分别在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、谷氨酸棒状杆菌和酵母菌4种底盘细胞中探索超声波、消化酶、表面活性剂及超声-表面活性剂联合作用4种方式对单细胞制备效率的影响。提高微生物流式分选存活率，用常压室温等离子诱变(atmospheric and room temperature plasma, ARTP)技术处理含有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的酿酒酵母HZ848 (简称HZ848-GFP)，形成不同强度GFP文库后，按照GFP强度分选全细胞和PI染色阴性细胞的前0.5%，统计单细胞存活率。【结果】酵母细胞分散条件为：0.01% Tween-80联合超声1 min，单细胞率达到88%以上，PI染色细胞破损率＜1.4%。谷氨酸棒状杆菌单细胞分散条件为：0.01% Tween-80联合超声5 min，单细胞率达到97%以上，PI染色细胞破损率＜1%。分选存活率结果表明，未用PI染色的酿酒酵母分选后单细胞存活率是4.3%，用PI染色去除死细胞后再分选单细胞存活率是18.3%，后者是前者的4.3倍，且具有显著性差异。【结论】本研究为微生物流式分选建立了一套简单快捷的单细胞样品制备方法，证实了PI染色法能够显著提高分选样品存活率。     

γδT17细胞活化机制的研究进展

IL-17是一种重要的促炎细胞因子，在炎症性疾病和自身免疫性疾病中发挥重要作用。研究发现，除Th17细胞外，γδT17细胞也是IL-17的重要来源。γδT17细胞参与多种免疫应答过程，与感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等疾病的发生发展密切相关，本文综述γδT17细胞活化机制的研究进展，探明γδT17细胞的分化和活化机制将为上述疾病的治疗提供新思路。     

金属帽光纤传输连续式Nd:YAG激光消蚀动脉粥样斑块的生物物理特性

本文对传输激光束的金属帽光纤的物理特性,传输连续Nd:YAG激光消蚀动脉粥样斑块的生物物理特性,以及其在临床上的应用效应等作了分析介绍,认为在一定条件下,它不失为一种能传输激光能量有效消斑的光纤。     

新麦草的核型分析

新麦草的核型分析孙震晓，夏光敏，陈惠民（山东大学生物系，济南２５０１００）ＫＡＫＹＯＴＹＰＥＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＰＳＡＴＨＹＲＯＳＴＡＣＨＹＳＪＵＮＣＥＡ￥ＳｕｎＺｈｅｎ－ｘｉａｏ；ｘｉａＧｕａｎｇ－ｍｉｎ；ＣｈｅｎＨｕｉ－ｍｉｎ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎ...     

汽枪子弹击中右心室及心电图改变一例

汽枪子弹击中右心室及心电图改变一例史训凡，夏斌赞（湖南医科大学湘雅医院－心内科·长沙·４１０００５）ＴＨＥＣＨＡＮＧＥＯＧＥＣＧＡＦＴＥＲＲＩＧＨＴＶＥＮＴＲＩＣＬＥＳＨＯＯＴＥＤＢＹＧＡＳＧＵＮＳｈｉＸｕｎｆａｎ；ＸｉａＢｉｎｚａｎ（Ｄｅｐａｒｔｍ...     

藏南喜马拉雅地区晚侏罗世-早白垩世双壳类雏蛤动物群

藏南喜马拉雅地区晚侏罗世地层中雏蛤化石丰富,其它化石仅有少量箭石和菊石,而且属种单一,多为地方种,无法进一步划分和对比,因此,雏蛤属(Buchia)的组合特征具有重要的地质意义。结合菊石Uhligites和Substeuraces,作者在藏南喜马拉雅地区上侏罗统中识别出:1)Buchia concentrica-Buchia spitiensis;2)Buchiamosquensis- Buchia rugosa;3)Buchia blanfordiana- Buchia piochii等3个雏蛤动物组合;在下白垩统中识别出Buchiasubokensis雏蛤动物组合,其中,Buchia mosquensis-Buchia rugosa组合为证明拉弄拉地区存在晚侏罗世晚基末利期至早提塘期地层提供了新的证据,并与斯匹提地区、北美等地区进行了动物群和地层的对比,初步探讨了本区雏蛤动物群在生物地层方面的研究价值。