研究报告: 基于分子对接和步进序列群的蓖麻毒素核酸适配体序列优化

目的 有效结合分子对接预测和表面等离子体共振实验评价技术，获得亲和力更强、序列最短的最优适配体。方法 针对前期筛选出的靶向蓖麻毒素的3条80 nt单链DNA适配体（L14、P3、L7），在明确各自二维随机区茎环序列与靶蛋白结合能力的基础上，以H-DOCK分子对接为指导，分别确定蓖麻毒素适配体随机区的最短结合单元，从而构建两端延长步进序列群，以表面等离子体共振技术测定序列群序列的亲和力和动力学参数，明确适配体的结合关键结构，从而筛选得到最优适配体。结果 3条全长适配体的随机区适配体L14r、P3r、L7r均可形成一定的茎环结构，其中L14r较L14的亲和力增强9倍、L7r增强2倍、P3r基本不变。对随机区适配体和蓖麻毒素进行分子对接，结果显示，L14r、P3r、L7r的对接分数值皆优于阴性序列40T，结合关键氨基酸个数分别为11、8、9个，存在距离小于5 ?的预测结合位点分别为20、12、15个，具有良好的与蓖麻毒素的结合能力。进一步明确了蓖麻毒素活性口袋所容纳的适配体最短结合单元L14rm、P3rm、L7rm的序列构成，在此基础上构建出两端延长步进序列群。针对该步进群，基于结合关键氨基酸个数、结合位点个数、对接得分等参数的变化和表面等离子体共振测定结果筛选出最优适配体。所获得的最优适配体L14rm、L7rm-2亲和力继续增强了1~2倍。结论 随机区适配体能有效地与蓖麻毒素结合，较之全长适配体亲和力更强，分子对接结合步进序列群设计，仅使用17条序列，便有效获得了3条最优适配体并明确其结合作用。3条结合蓖麻毒素的最优适配体——L14rm、P3r、L7rm-2的K_D值分别为（64±30）、（167±19）、（120±1）nmol/L，亲和力提高到全长适配体的14、1、4倍。     

大气CO2浓度升高对粘虫生长发育和繁殖的影响

为明晰大气CO_2浓度升高对粘虫Mythimna separata(Walker)生长发育和繁殖的影响,在人工气候箱800μL/L与400μL/L两种不同CO_2浓度下,用人工饲料连续饲养粘虫3代后,分析其发育历期、体重、存活率等种群参数的变化。结果表明:不同CO_2浓度处理下各世代的粘虫均能正常发育,各虫态的发育历期为:幼虫成虫蛹卵,幼虫1-3代的发育历期在两种CO_2浓度下差异达极显著水平(P0.001);CO_2浓度倍增条件下的蛹重和成虫体重较对照条件下明显下降;CO_2浓度倍增对粘虫的性比影响不大,但可导致粘虫雌成虫寿命缩短,单雌平均产卵量和单雌日均产卵量下降。高CO_2浓度下第1代粘虫种群的平均世代周期(T)和种群加倍时间(DT)分别延长了1.19和1.24 d,1-2代粘虫的净生殖率(R0)、内禀增长率(rm)和周限增长率(λ)呈下降趋势,至第3代略有回升,但未达到显著性差异水平(P0.05);高CO_2浓度条件下粘虫1-3代的存活率分别为44%、31%和33%,分别较对照条件下对应世代粘虫的存活率低10%、27%和22%,其中第2、3代粘虫的存活率在两种CO_2浓度条件下差异显著(P0.05),第1代粘虫在高CO_2浓度下存活率明显下降,至第3代时逐渐趋于稳定,说明随着世代的延长,粘虫对高CO_2浓度的适应能力增强。     

CISH基因多态性与结核病易感性的相关性研究

目的:寻找肺结核的易感位点,探索宿主遗传因素差异对肺结核发病的影响,为肺结核的预防和药物研发提供理论依据。方法:对1218名汉族居民进行病例对照研究,其中病例组600例,对照组618例,进行流行病学调查和生化指标检查。运用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术检测CISH基因rs2239751和rs622502的基因型分布,探讨CISH基因多态性与中国汉族人群肺结核易感性的关联性。结果:CISH基因的rs2239751和rs622502等位基因分布均符合Hardy-Weinberg(H-W)遗传平衡定律(P0.05)。rs2239751位点基因型和等位基因分布在两组间差异有统计学意义,P值分别为0.013和0.01,并且携带C等位基因个体患肺结核的风险是携带A等位基因的个体1.16倍(95%CI=1.03-1.29,P=0.01)。rs2239751基因分型结果在女性病例组和对照组中差异有统计学意义,P值为0.007,OR(95%CI)为1.51(1.12-2.03)。rs2239751基因分型结果在45岁人群病例组和对照组中差异有统计学意义,P值为0.010,OR(95%CI)为1.32(1.07-1.64)。rs622502位点基因型和等位基因分布在两组间差异均无统计学意义(P0.05)。结论:在汉族人群中,rs2239751位点多态性可能是肺结核的危险因素之一,C等位基因为风险等位基因。rs2239751基因多态性与肺结核的关联性仅限于于女性和45岁人群。rs622502位点多态性可能与肺结核无关。     

药用石斛属植物石斛碱研究进展

综述了石斛碱的药用功效、检测方法、含量分布规律以及合成途径等方面的研究进展，并针对存在的主要问题提出解决方案，为石斛碱的进一步开发利用提供研究思路。     

观察探究玉树叶的无性繁殖

在不同环境条件下，观察玉树叶进行无性繁殖的实验过程，能直接观察到受伤的叶片形成愈伤组织，再分化为幼根、幼茎、幼叶的全过程。玉树幼株的分化和生长主要受体内营养物质、激素种类与含量等因素的影响，还受周围环境因素的影响，并能够很好地适应周围环境。玉树叶的无性繁殖力、适应力是很强的。     

新一代微生态制剂--酪酸菌的研究和开发前景

微生态学是近年来迅猛发展的一门生命科学。随着这一学科的建立和不断发展 ,各种微生态制剂应运而生并引起临床医学工作者的高度重视。大量的临床实践证明 ,双歧杆菌、乳酸杆菌等微生态制剂在临床上确实能起到调节肠道菌群紊乱的作用 ,但这些微生态制剂有一个致命的弱点 ,即在贮存和口服过程中易受外界各种生化和物理因素的影响而失去活性。特别是双歧杆菌对外界环境抵抗力极弱 ,室温保存活菌数会大幅度降低 ,直接口服也易被胃酸灭活而降低疗效 ,需制成肠溶胶囊加以保护 ,另外抗生素也对其有杀灭作用 ,因而临床上不宜与抗生素同服。为了克服…     

又见非蛋白氮

现代农业追求高效率的，在饲料中使用了大量添加剂，非蛋白氮就是其中一种。臭名昭著的三聚氰胺就是非蛋白氮的一种，但这一类化合物并不都像三聚氰胺这样对人体有害。反刍动物用它奇特的4个胃来消化代谢，吸取草类饲料中的氮来帮助它们合成所需的蛋白质。所以从生物技术的角度来看，无论是天然氮源还是人工合成氮源都是供给瘤胃中微生物的，并合成微生物蛋白质，再被反刍动物吸收。