枳壳外植体离体再生及农杆菌介导的遗传转化

以枳壳实生苗的上胚轴及茎段为材料,在附加有ＢＡ和ＭＴ培养基上进行培养,上胚轴出芽率普遍高于茎段,ＢＡ为１ｍｇ／Ｌ时,出芽率最高,ＢＡ浓度升高,出芽率随之下降。外植体在培养基上的接种方式,对出芽有一定影响,上胚轴切段 形态学下端垂直插入,出芽率高。     

柑桔抗寒砧木枳壳的繁殖技术

枳壳（ＰｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａＬ．）别名枸桔，原产我国。主要分布在长江流域的湖北、安徽、江苏、浙江一带，河北、山东、河南亦有分布。枳壳为灌木状小乔木，多长刺。叶为三出复叶，冬季落叶。性极耐寒，可耐－２０℃的低温。枳壳为著名的中药材，叶、花...     

农杆菌介导的枳壳转化系统建立研究初报

以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植体水平面放置时 ,选择剂的剂量是 50～ 70mg/ L。转化研究中发现感染液中乙酰丁香酮 10 0μmol/ L的加入促进转化外植体 Gus表达阳性率的提高。延迟 1a的选择培养 ,有助于 Gus阳性芽的增多。所得 Gus阳性无性系经 Southern blot杂交检测 ,证明外源基因已稳定整合到了植物基因组中 ,所得 Gus阳性植株确为携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的转化植株     

碳酸钙胁迫对枳壳愈伤组织生理特性的影响

石灰性土壤上富含碳酸钙是导致柑桔缺铁黄化的主要因素。碳酸钙胁迫对枳壳愈伤组织生理影响的研究结果表明除全Fe含量外,CaCO₃浓度与POD活性、SOD活性、CAT活性、活性Fe含量、可溶性蛋白质含量、愈伤组织增殖均呈显著或极显著负相关,与培养液pH值呈显著相关,随着培养天数的增加,POD活性、活性Fe含量、可溶性蛋白质含量、愈伤组织增殖呈降低趋势,SOD、CAT活性先升后降,全Fe含量在25日出现沉积,高浓度CaCO₃下培养液pH值仅在20日左右略有降低。     

中药枳壳中环肽成分的研究

运用硅胶、凝胶和高效液相色谱进行分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物的结构。从中药枳壳中分离并鉴定了7个环肽成分:环-(亮氨酸1-异亮氨酸2-丙氨酸3-苏氨酸4-甘氨酸5-苏氨酸6-苯丙氨酸7)(1)、环-(甘氨酸1-亮氨酸2-缬氨酸3-亮氨酸4-脯氨酸5-丝氨酸6)(2)、环-(亮氨酸1-亮氨酸2-脯氨酸3-酪氨酸4-甘氨酸5-丝氨酸6-脯氨酸7)(3)、环-(甘氨酸1-甘氨酸2-亮氨酸3-亮氨酸4-亮氨酸5-脯氨酸6-脯氨酸7-苯丙氨酸8)(4)、环-(脯氨酸-丙氨酸)(5)、环-(丙氨酸-异亮氨酸)(6)、环-(丙氨酸-亮氨酸)(7)。除2和4外,其余环肽均为首次从中药枳壳中分离得到。     

枳壳CBF转录激活因子基因片段的克隆

根据不同植物CBF同源基因的保守区设计合成简并引物,采用PCR技术首次从枳壳基因组中分离出一个DNA片段并克隆到pMD18-T载体中.序列测定和分析表明,该片段长464bp,与拟南芥3个CBF基因的核酸序列及其推导的氨基酸序列分别具有79%和67%～69%的同源性,而且推导的氨基酸序列含有同源性更高的AP2DNA结合域和CBF蛋白的两段特征序列PKK/RPAGRxKFxETRHP和DSAWR.结果 表明,本研究克隆的片段为枳壳CBF基因片段.     

中药“枳壳”的组织培养与植株再生（简报）

以酸橙的茎段为外植体,进行离体再生体系研究.结果表明,培养基MS + 6-BA 1.0 mg/L + IAA 0.5 mg/L + CH 400 mg/L适宜不定芽诱导;培养基MS + 6-BA 0.5 mg/L+ IAA 0.25 mg/L + CH 400 mg/L适宜不定芽增殖;培养基1/2MS + NAA 1.0 mg/L + IBA 2.0 mg/L生根效果较好,生根率达80%以上.     

碳酸钙胁迫下枳壳愈伤组织的某些生理生化指标变化

测定碳酸钙(CaCO3)胁迫下枳壳愈伤组织的某些生理生化指标的结果表明:除全Fe含量外,CaCO3浓度与过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、活性Fe含量、可溶性蛋白质含量、愈伤组织增重均呈显著或极显著负相关,与培养液pH值呈显著正相关;随着培养的进程,POD活性、活性Fe和可溶性蛋白质含量、愈伤组织增重呈降低趋势,SOD和CAT活性先升后降,含高浓度CaCO3的培养液pH值仅在20日左右略有降低.