植物多基因干扰载体体系构建与效用分析

多数重要的功能基因属于多基因家族,这些家族成员间存在功能冗余,高效的多基因干扰体系对研究多基因家族成员的生物学功能及其分子调控机制具有重要意义。对pCAMBIA1301载体改造,构建了适用于植物的多基因干扰体系pCAMBIA1301m和pCAMBIA1301s。使用该多基因干扰体系构建了四基因的干扰载体pCAMBIA1301m：35S∷SlPP2C1-2-3-4,4个目标基因为来源于番茄PP2C家族A组的PP2C1、PP2C2、PP2C3和PP2C4,并通过遗传转化导入番茄,用GUS染色和PCR检测转基因阳性植株,再利用RT-qPCR技术检测T₁和T₂代转基因植株中目标基因的干扰效率,用T₂代种子分析转基因番茄对ABA敏感性。结果表明,应用该干扰体系成功获得了四基因干扰的转基因植株35S∷SlPP2C1-2-3-4。在转基因番茄中4个目标基因的表达量显著低于野生型,其干扰效率均高于70%,转基因番茄种子萌发具有强烈的ABA不敏感性。多基因干扰体系能高效地同时沉默多个目标基因。     

向日葵MADS-Box基因HAM23-like克隆和表达分析

为了解MADS-box基因在向日葵(Helianthus annuus)花发育过程中的作用,采用RT-PCR技术克隆了1个MADS-box基因新成员HAM23-like,开放阅读框为831bp,编码276个氨基酸,相对分子量为30.52k D,理论等电点为9.42。系统发育分析表明,HAM23-like与拟南芥的AGL18聚于同一分支,具有较近的亲缘关系。qRT-PCR分析表明,HAM23-like基因在花和成熟果实(籽粒饱满期)中的表达量较高;HAM23-like在开花当天的雄蕊中的表达量最高;随着花的发育,HAM 23-like表达量逐渐升高,在开花后5 d (果实形成早期)达到最高表达水平。因此,推断HAM23-like基因可能与向日葵花器官后期发育和瘦果早期发育相关。     

猕猴桃主要害虫——椰圆盾蚧的生物学特性及其防治

椰圆盾蚧在湖南1年发生3代,以受精雌成虫在树干上越冬;翌年4月上中旬开始产卵。雌雄性比为1:1.04。各代每雌平均产卵量为32～42粒。在室温26～28℃下,卵期为5天,幼蚧期为17天,雌成蚧产卵前期为25天,雌蚧世代为44天,雄蚧世代为38天。该蚧虫对美味猕猴桃果实的为害较中华猕猴桃轻。     

闪蓝红点唇瓢虫对考氏白盾蚧的捕食作用研究

闪蓝红点唇瓢虫是猕猴桃考氏白盾蚧的主要天敌,在湖南一年发生1代,以幼虫在猕猴桃树干及枝条上的考氏白盾蚧下或以蛹在立架铁丝和猕猴桃小枝上越冬,该瓢虫成虫对考氏白盾蚧卵的功能反应属于Hassell &Comins Ⅲ型,对雌成蚧和雄蛹的功能反应属于Holling Ⅱ型;取食卵的“S”型曲线方程为Na=0.06339N/1+0.06339N+7.16307×10~(-5)·N~2,取食雌成蚧和雄蛹的圆盘方程分别为Na=1.0211N/1+0.008443N和Na=0.7315N/1+0.002394N;一昼夜对卵、雌成蚧、雄蛹的最大捕获量分别为885粒、121头和308头。