瓜类枯萎病研究进展(综述)

瓜类枯萎病是由尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum侵染引起,在全球大部分瓜类产区均有发生。该病已成为影响我国瓜类品质和产量的重要病害。本文从瓜类作物枯萎病的防治方法、致病机理和分子生物学研究等方面综述其研究现状,并对今后的研究方向进行展望。     

菜心组织培养技术初探

为建立菜心(Brassica campestris ssp.chinensis var.utilis)的快繁技术体系,以花药和子叶-子叶柄为外植体进行组织培养研究。结果表明,花药培养以选取未开放的花蕾为宜,且花柱略高于花瓣,此时小孢子多数处于单核靠边期。菜心花粉的萌发率不高,且秋冬季的花粉比夏季的萌发率高。菜心花药愈伤组织诱导培养基为:MS+1.0 mg L–1 KT+1.0 mg L–1 2,4-D+3%糖+6 g L–1琼脂+8%椰乳,不定芽诱导培养基为:MS+2.0 mg L–1 6-BA+0.5 mg L–1 NAA+1.0 g L–1活性炭+2%糖+6 g L–1琼脂或MS+2.0 mg L–1 ZT+0.5 mg L–1 IAA+0.5 g L–1 AgNO3+1.0 g L–1活性炭+2%糖+6 g L–1琼脂。花药培养的不定芽诱导率为36.7%,不定芽培养出现褐化现象,不能形成再生植株;而以子叶-子叶柄为外植体培养获得的植株再生率可达80%。     

均匀设计在枇杷ISSR-PCR反应体系优化中的应用

本实验通过U25(54)均匀设计实验研究,对枇杷ISSR-PCR分子标记体系中模板DNA、dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物5个组分的浓度进行优化.获得25 μL反应体系中各成分的适宜浓度或用量分别是:模板DNA为10ng、dNTPs为0.5 mmol/L、Taq DNA聚合酶为1 U、Mg2+为2.5 mmol/L,引物为0.4 μmol/L.与单因素梯度优化体系相比,操作简便,简化了实验步骤,获得的实验结果可靠,从100条ISSR引物中筛选出27条扩增良好的引物,并获得了这些引物的最佳退火温度,经琼脂糖凝胶电泳获得了清晰的图谱.这一优化体系的建立为进一步利用ISSR标记技术进行枇杷种质鉴定及遗传多样性分析提供了一个标准化程序.     

SRAP 分子标记分析体系的建立及白簕资源亲缘关系分析

本实验对影响SRAP-PCR体系中的Mg2+、dNTPs和引物浓度等因子进行了体系优化,建立了一套适合白簕SRAP检测的25μL反应体系:1.5mmol/LMg2+,1.5mmol/LdNTPs,1μmol/L引物,10ng模板DNA,1.5UTaqDNA聚合酶;进一步以白梗簕菜为模板,利用优化的体系进行多态性标记引物组合分析,共筛选出17对引物;利用这些引物对7个白簕品种进行SRAP遗传多样性分析,共扩增出461条谱带。其中多态性谱带155条,多态性谱带比率为33.6%,白簕品种间的相似系数为0.7077~0.9474。经UPGMA聚类分析结果显示,所检测的7个白簕品种分为两大类,其中亲缘关系较近的青梗簕菜和细叶密刺簕菜聚成了一组;而其余的4个种,包括白梗簕菜、细叶小刺簕菜、紫柄簕菜、大叶大刺簕菜和红梗簕菜,聚成另一组。     

软核与硬核山楂种核木质素积累状况比较

对两份软核山楂资源‘新宾软籽’和‘开原软籽’及两份硬核山楂资源‘垂枝山里红’和‘短枝山里红’的种核硬化期进行显微观察,探明了软核与硬核山楂种核硬化启动期木质素积累状况,用Wiesner试剂法可以快速鉴定山楂种核硬化启动的时期。本结果可为山楂种核硬化期基因表达差异和软核形成机理研究提供基础资料。     

节瓜、冬瓜重要性状资源表型多样性及亲缘关系的SRAP分析

以冬瓜、节瓜38份种质资源为材料,主要对萌芽率、单果重、瓜长、瓜宽、瓜皮色、瓜型、星点多少、果肉厚和果肉色共计9个性状的表型性状进行了研究,供试材料9个性状的表型变异系数在9.12%~123.13%之间,尤以单果重的变异系数最大;遗传多样性指数(H’)在0.122~1.859之间。SRAP结果显示:利用筛选出的20对引物对38份节瓜、冬瓜材料进行扩增,共扩增出多态性条带323条,遗传相似系数在0.95~0.99之间,节瓜和冬瓜的遗传背景非常窄,冬瓜和黄毛型节瓜亲缘关系近于普通类型节瓜。本研究还解决了部分材料同名异物的问题,可为冬瓜和节瓜育种提供有价值的参考。     

AhCYCB1基因的克隆和在ABA抑制花生侧根发生过程中的表达

根据水稻、拟南芥和玉米等植株的CYCB基因序列设计引物,以花生根系成熟区总RNA逆转录得到的cDNA为模板,用PCR扩增克隆花生CYCB1基因片段,命名为AhCYCB1（GenBank登录号为GQ868755）。该基因编码的蛋白具有CYCB1蛋白序列的特征区,与拟南芥的AtCYCB1蛋白聚类关系最近。半定量RT-PCR分析表明,ABA处理后,侧根起始部位的AhCY-CB1基因表达水平降低,ABA合成抑制剂萘普生（naproxen）处理使AhCYCB1基因表达水平明显上调。推测ABA抑制侧根发生与其降低侧根发生部位由G2期进入M期的细胞数目有关。