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相似文献
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1.
根据已知的辽宁碱蓬CMO cDNA 5′端序列设计两个基因特异的反向引物(CR1,CR2),通过衔接头PCR获得了CMO基因起始密码子上游498 bp的序列。根据所获得的序列设计两个基因特异的反向引物(CR3,CR4),用CR2、CR3、CR4分别与4个简并引物配对,通过TAIL-PCR扩增,获得了约2 kb的序列。经Sequencer软件拼接上述两段序列,获得了CMO基因起始密码子上游2,332 bp的序列。用TSSP-TCM软件分析此序列,预测出转录起始点(C)位于起始密码子上游128 bp处,由此我们获得了2,204 bp的SlCMO启动子序列。用PLACE软件分析此序列,发现该序列具有启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box,包含多个胁迫诱导元件,如盐诱导元件GAAAAA,冷胁迫诱导元件CANNTG,ABA 响应因子NAACAA,水胁迫元件CGGTTG和伤害诱导元件GTTAGGTTC等,是一个强的胁迫诱导启动子。辽宁碱蓬胆碱单加氧酶基因盐诱导启动子的获得,为盐诱导启动子功能元件分析提供了可能,为进一步研究启动子结构与功能的相互关系、CMO基因的表达调控机制奠定了基础。  相似文献   

2.
根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物,克隆得到苹果品种‘嘎拉’中β-半乳糖苷酶基因(Md-gal)的启动子。序列分析表明,该启动子除含有大多数高等植物启动子具有的保守元件外,还含有大量光响应元件和与激素相关的顺式作用元件,主要有赤霉素响应元件(GARE-motif和P-box)、茉莉酸甲酯(MeJA)应答元件(CGTCA-motif和TGACG-motif)和生长素响应元件(TGA-element);构建5个不同长度Md-gal启动子和GUS基因融合的瞬时表达载体,并进行苹果果实和烟草叶片转化试验,结果显示,5个启动子均具有启动子活性,在Md-gal启动子序列中激活与抑制调节元件并存,正调控元件位于-1206~-754bp区域,负调控元件位于-754~-597bp区域;对Md-gal启动子进行激素响应分析结果显示,激素处理可对其产生诱导作用,且MeJA处理后GUS活性最高。研究表明,Md-gal启动子具有真核基因启动子的基本结构特征和正负调控特性,可响应外源激素处理,可能在苹果果实生长发育和成熟软化方面具有一定的作用。  相似文献   

3.
陈晓童  吕可  刘涛  张荻 《西北植物学报》2021,41(8):1267-1278
在百子莲胚性细胞中筛选到对超低温保存复合逆境具有积极响应的保护类蛋白脱水素(ApY_2SK_2),为探明ApY_2SK_2基因在复合逆境中的应答模式,该研究采用染色体步移技术克隆并分析了ApY_2SK_2编码基因上游1 200 bp的启动子序列。结果表明:(1)序列分析显示,该启动子含有多个与逆境和激素诱导相关的顺式调控元件;实时荧光定量PCR结果表明,ApY_2SK_2基因的表达具有组织特异性,在百子莲的叶和果中表达量较高,且在多种胁迫处理与ABA激素诱导下,其表达量显著升高。(2)成功构建了5个ApY_2SK_2启动子不同缺失片段驱动GUS基因的融合表达载体,经农杆菌转化、抗性筛选和PCR检测鉴定,获得T_3代纯和转基因拟南芥株系。(3) GUS组织化学染色结果显示,GUS基因在拟南芥幼苗全株、成年苗的叶、花和成熟果实中表达活性较强,但在未成熟果实中无明显表达;烟草瞬时表达结果显示,与对照组相比,在脱水胁迫和ABA处理下的ApY_2SK_2启动子不同缺失片段驱动GUS基因表达具有显著差异。(4)转基因拟南芥GUS活性测定结果显示,ApY_2SK_2启动子MBS元件和ABRE元件可响应干旱与渗透胁迫信号;ApY_2SK_2启动子LTR元件参与低温响应;ApY_2SK_2启动子-1 199~-262 bp区域包含多个串联的ABRE顺式调控元件(-373~-211 bp)对响应ABA信号具有主要调控作用。该研究结果揭示了ApY_2SK_2启动子的组织特异性,且启动子上的关键顺式调控元件对不同的胁迫和激素信号响应具有决定性调控作用。  相似文献   

4.
磷酸胆碱是合成磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱的重要前体,磷酸乙醇胺N-甲基转移酶(PEAMT)是磷酸胆碱合成的关键酶。根据已知的SePEAMT cDNA5'端序列设计两个基因特异的反向引物(PP1,PP2),通过锚定PCR获得了PEAMT起始密码子上游1249bp的序列。RLM-RACE反应确定其转录起始位点A位于起始密码子上游301bp处,由此获得了948bp的SePEAMT启动子序列。PlantCARE和PLACE在线启动子预测工具分析表明:该序列除了含有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box外,还含有一些胁迫诱导元件(如ABRE、HSE、LTR)和花粉特异的激活元件AGAAA。构建了SePEAMT启动子与报告基因GUS 融合的表达载体pPro,并通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,染色结果表明SePEAMT启动子可以有效地驱动GUS基因的瞬时表达。  相似文献   

5.
利用PCR技术从马铃薯陇薯3号基因组DNA中扩增出长度约为1.0 kb的DNA片段,经与T载体连接,测序表明,克隆到的DNA片段大小为969 bp,该序列与GenBank中已公布的patatin启动子序列同源性为97.94%;采用植物顺式调控元件数据库PLACE和PlantCare进行序列分析,结果表明,该片段含有启动子的保守序列TATA-box和CAAT-box,且在CAAT-box上游有8 bp的增强子.此外,还具有马铃薯块茎蛋白patatin基因启动子保守调控序列的蔗糖效应元件(SURE)4个及马铃薯储藏物特异结合调控patatin蛋白表达位点(B-box)2个,而这些特异序列可能是基因特异表达所必须的.  相似文献   

6.
为了明确小麦冰重结晶抑制蛋白基因(TaIRI5)在小麦生长发育过程中的作用,该研究以小麦品种‘北京841’为材料,利用RT-PCR方法克隆TaIRI5基因,并对该基因进行生物信息学分析、组织特异性表达分析、启动子活性分析以及亚细胞定位分析。结果显示:(1)成功克隆到TaIRI5基因,该基因全长1203 bp,开放阅读框为858 bp,编码285个氨基酸,蛋白质分子量为70.7 kD,等电点为5.07,属于疏水性蛋白。(2)实时荧光定量PCR结果显示,TaIRI5基因在小麦的根、茎、叶片、雌蕊、雄蕊、护颖、种子中均有表达,其中根部的相对表达量最高,在雌蕊中表达量最低,表明该基因在小麦的生长发育过程中起重要作用。(3)TaIRI5基因的启动子分析表明,该区域除CAAT-box和TATA-box启动子核心元件外,该序列还包含9个光响应元件和6个激素应答元件及其他元件;利用TaIRI5基因不同长度(498 bp、999 bp、1500 bp)的3个候选启动子,构建了含有GUS基因的pCAMBIA1301融合表达载体;烟草转化实验表明,3个候选启动子都能启动该基因的表达,但表达模式略有差异。(4)成功构建含有GFP基因的融合载体pCAMBIA1300-TaIRI5-GFP,亚细胞定位结果显示,TaIRI5定位于细胞膜上。该研究结果为进一步研究小麦TaIRI5基因功能奠定了基础。  相似文献   

7.
Pib启动子中茉莉酸和乙烯响应元件的转基因分析   总被引:2,自引:1,他引:1       下载免费PDF全文
水稻Pib基因的表达受茉莉酸、乙烯等激素诱导,为了确定该基因启动子响应茉莉酸和乙烯诱导的必需区域,进一步阐明茉莉酸和乙烯响应分子元件,文章用PCR制备了Pib全长启动子-3572~2bp及3个5′端有不同长度缺失的Pib启动子片段-2692~2bp、-1335~2bp、-761~2bp。4个不同长度Pib启动子分别置换掉双元质粒中gus基因上游的35S构建为重组质粒,经农杆菌介导转入水稻获得转基因植株。转基因水稻中gus活性的蛋白质水平和mRNA水平的定性和定量分析结果表明,全长Pib启动子(-3572~2bp,pNAR901)启动活性最强,茉莉酸或乙烯诱导6h后,其驱动gus基因在转基因植株各部组织中的表达量明显上升。而-3572~-2692bp区段序列缺失后不但Pib启动子启动活性显著降低而且也丧失了对茉莉酸和乙烯的诱导活性。pNAR902(-2692~2bp),pNAR903(-1335~2bp)和pNAR904(-761~2bp)中的Pib启动子序列的缺失长度相差达2倍和3倍以上,但其对茉莉酸和乙烯的诱导响应没有区别。这些结果显示3个Pib启动子缺失体构建中,其共同缺失序列即-3572~-2692bp区域是Pib启动子茉莉酸和乙烯诱导响应的必需区域。软件检索证实,Pib启动子序列中只在上述共同缺失区段之内的-2722bp处有一个GCCGCC基序。文章报道的转基因实验表明GCCGCC基序可能是Pib基因中有关茉莉酸和乙烯诱导响应的顺式分子元件。  相似文献   

8.
根据已报道的香蕉果实表达ACC氧化酶基因(ACO1)的序列,用改进的接头连接PCR法从香蕉基因组中扩增并克隆了此基因5′旁侧区1526bp的片段。其中包含一个推测的TATA盒序列;与已公布的两个香蕉ACC氧化酶基因启动子序列(分别为934bp和1451bp)的相似性各为97.3%(López-Gómez等)和88.8%(May和Kipp)。将4个含有不同大小启动子区的克隆片段与GUS基因编码区连接构建成嵌合基因,通过基因枪轰击转入香蕉叶、根和果实的细胞后。瞬时表达结果表明不同大小的ACO1-启动子区段都只在果实细胞中指导GUS基因表达,证明该启动子具有指导基因在果实中表达的功能;并推测负责果实特异性的顺式元件可能位于启动子近端0.7kb区段之内,在468至822 的355bp区段内可能存在与正控制有关的顺式元件。  相似文献   

9.
为了进一步明确海巴戟(Morinda citrifolia Linn.)ACO基因(GenBank登录号:ARB05681.1)功能,本研究通过染色体步移法克隆得到2 066 bp启动子.该区域除了含有大量TATA-box、CAAT-box等启动子核心元件外,还含有乙烯等植物激素响应元件、胁迫和防御相关元件、光相关元件等,转录起始位点预测在-96 bp处.为了验证启动子序列中的植物激素响应元件,分别用乙烯利、茉莉酸甲酯、赤霉素、生长素、脱落酸分别处理海巴戟叶片,荧光定量PCR结果 表明,5种激素均能上调ACO基因表达,与启动子中存在相应的元件一致,暗示着这些元件的存在能够调控海巴戟ACO基因的表达;此外,ACO受乙烯诱导表达最强,表明启动子中确实存在乙烯应答元件.  相似文献   

10.
NADP-苹果酸酶(NADP-ME)是C_(4)植物的关键光合酶,在生物和非生物胁迫中发挥了重要的作用。为了进一步研究该酶编码基因的功能,该研究以典型荒漠C_(3)-C_(4)中间型植物松叶猪毛菜为研究对象,在克隆得到NADP-ME家族基因序列的基础上,研究其表达部位及在非生物胁迫下的表达模式,并克隆其启动子序列分析响应非生物胁迫的元件差异。结果表明:(1)成功获得松叶猪毛菜3个NADP-MEs,命名为SaNADP-ME1、SaNADP-ME2和SaNADP-ME4,CDS序列长度分别为1755、1758和1941 bp。(2)SaNADP-ME1主要在根中表达,SaNADP-ME2和SaNADP-ME4主要在叶中表达;在ABA、NaCl、NAHCO_(3)和PEG_(6000)胁迫下松叶猪毛菜幼苗中3个NADP-MEs均可被诱导表达,且SaNADP-ME2和SaNADP-ME4的响应表达模式相似。(3)成功克隆得到SaNADP-ME1、SaNADP-ME2和SaNADP-ME4启动子区域2351、1655和2887 bp。生物信息学分析发现它们都含有基本启动子元件以及响应外界刺激的元件。  相似文献   

11.
赵冰  龚梅香  张启翔 《植物研究》2007,27(2):131-132
描述了蜡梅(Chimonanthus praecox L.)一新变种即卷瓣蜡梅,该变种与原变种的主要区别是中花被片高度反卷,中被片颜色为白色或金黄色,主要分布于神农架林区。其中中被片颜色为白色的卷瓣蜡梅可以被看作一个新变型跳枝蜡梅。  相似文献   

12.
蜡梅(Chimonanthus praecox)是我国二级濒危珍稀植物,是重要的冬季传统观花植物。利用已报道的246个分布点和worldclim中提取的19个气候因子,基于最大熵(Maxent)模型和地理信息系统(Arc Gis)对蜡梅在中国的潜在适生区分布进行预测分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线对预测结果进行检验和评价。结果表明蜡梅的潜在适生范围相对集中,主要集中在西南的四川盆地、华中、华东及华北的中南部地区,其他地区则适应性较低。温度是影响蜡梅分布的决定性因子,其中,当最冷季度平均温度接近0℃,等温性范围为0—10℃,降雨量变异系数约为45时,蜡梅的分布概率最大。与原分布区相比较,蜡梅的适生区范围正向中国东部地区和北部地区迁移。ROC曲线检验评价结果表明,Maxent模型的ROC曲线分析法的面积(AUC)值为0.986,预测结果达到了极高精度。  相似文献   

13.
四川省万源市野生腊梅资源调查研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
开展了四川省万源市野生腊梅资源调查研究,旨在进一步摸清家底,为地方政府制定经济发展规划和进行植物资源保护与合理开发以及腊梅科研提供重要参考资料。调查结果表明,万源野生腊梅保存较为完好,分布面积极广,分布较为集中,生境极其恶劣,变异类型较为丰富,初步调查有33个,伴生植物主要以灌草类为主。根据万源野生腊梅开发利用与保护现状、开发应用前景等,初步提出了保护利用方略。  相似文献   

14.
湘西北腊梅群落优势树种的生理生态学特性研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
对湘西北腊梅群落中 4个优势树种的光合、呼吸、蒸腾以及矿质营养等基本生理生态学指标进行了测试分析。结果表明 ,腊梅和香叶树的光—光合特性较为优良 ,它们对光合有效辐射的适应幅度更宽 ,净光合速率较高。香叶树的暗呼吸强度最低而水分利用效率最高 ,腊梅则对土壤矿质营养的选择性主动吸收能力最强。利川润楠和八角枫的生理生态学特性较之于腊梅和香叶树 ,显示出一定的劣势。  相似文献   

15.
A novel rapid, simple and solvent-free method was developed for determination of the volatile compounds from the flowers of Chimonanthus praecox Link using headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The SPME conditions were firstly optimized and applied to sampling of the volatile compounds emitted from living Chimonanthus praecox L. flowers and excised Chimonanthus praecox L. flowers. Thirty-one compounds emitted from living flowers were identified for the first time, which mainly included 4-methyl-1,3-pentadiene (2.0%), a-phellandrene (4.7%), benzyl methanol (11.1%), trans-linalool oxide (furanyl ring) (5.3%), a-linalool (36.0%), methyl salicylate (24.5%) and acetic acid benzyl ester (5.9%). Comparing the emission from living flowers and excised flowers, twenty-eight compounds were found to be detected in the two emissions, and three compounds, n-pentadecane, n-cetane and n-heptadecane, were only found in the emission from the living flowers, which shows that they might be biomarker compounds.  相似文献   

16.
蜡梅17个品种过氧化物同工酶的研究   总被引:14,自引:0,他引:14  
陈志秀 《植物研究》1995,15(3):403-411
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,多次进行了蜡梅17个品种的过氧化物同工酶测定。测定结果发现:蜡梅酶谱具有多态特性;蜡酶品种间酶谱差异显著,每个品种均有其特征酶谱,或以其酶带数目Rf及活性强弱、酶带宽度与其它品种相区别。同时,采用“排序方法”和聚类分析,对蜡酶17个品种酶谱的相似程度进行了研究。  相似文献   

17.
记述寄生在蜡梅Chimonanthus praecox(Linn.)Link.(蜡梅科Calycanthaceae)叶子上的瘿螨2新种:蜡梅离子瘿螨Leipothrix chimonae sp.nov.和蜡梅双羽爪瘿螨Diptacus praecoxsp.nov.。模式标本保存在河北大学博物馆。蜡梅离子瘿螨,新种Leipothrix chimonae sp.nov.(图1~5)正模♀,副模:25♀♀,2♂♂,2009-06-01,陕西省岚皋县蜡烛村,海拔600m,谢满超采。寄主为蜡梅Chimonanthuspraecox(Linn.)Link.(蜡梅科Calycanthaceae)。新种与悬钩子离子瘿螨Leipothrix yipingae Shi,2000相似,但新种背盾板具背中线,雌生殖盖片基部具纵线,端部饰有斜线,羽状爪3支,而悬钩子离子瘿螨L.yipingae背盾板上无背中线,雌生殖盖片饰有短线和粒点,羽状爪4支。蜡梅双羽爪瘿螨,新种Diptacus praecox sp.nov.(图6~12)正模♀,副模:8♀♀,7♂♂,2009-06-01,陕西省岚皋县蜡烛村,海拔600m,谢满超采。寄主为蜡梅Chimonanthuspraecox(Linn.)Link.(蜡梅科Calycanthaceae)。新种与臭樱双羽爪瘿螨Diptacus maddenis Song,Xue etHong,2007相似,但新种足Ⅰ基节间具胸线,基节饰有线条和粒点,雌生殖器盖片上饰有1排纵肋,而臭樱双羽爪瘿螨D.maddenis足Ⅰ基节间无胸线,基节饰有粒点,雌生殖器盖片基部饰有粒点。  相似文献   

18.
Changes in peroxidase (POD), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and phenylalanine ammonia-lyase (PAL) activities were studied during Chimonanthus praecox seed maturation. According to our findings the protein content increased steadily from 8 to 12 weeks after flowering, and thereafter decreased significantly. Similarly, SOD and POD activities increased gradually up to 12 weeks after flowering and then declined. PAL activity declined gradually during seed maturation. CAT activity, however, showed no changes during seed maturation. By means of polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), SOD and POD isoenzymes were observed during seed maturation. The staining intensities of SOD and POD isoenzymes correlated well with SOD and POD activities as obtained by an assay in solution. These findings suggest that POD, SOD and PAL may be involved in the growth and development during Chimonanthus praecox seed maturation.  相似文献   

19.
湘西北蜡梅群落特征的初步研究   总被引:14,自引:2,他引:12  
陈功锡  李菁  李鹄鸣  李鸣   《广西植物》1997,17(2):118-126
从5个样地900m2的调查资料对湘西北蜡梅群落进行了初步分析,结果表明:(1)群落种类组成丰富,共有维管束植物80科,130属,166种。地理成分复杂,温带成分略占优势并表现出由热带向温带渐次过渡的性质;(2)外貌特殊,主要由革质、单叶和中型叶为主的落叶高位芽植物所决定,季相交替明显并与其他植被显著不同;(3)群落结构可分为林木层、小灌木层、草本层和地被层,其中林木层还可分为3个亚层,各层均以蜡梅占优势。林木结构分析表明,该群落具有一定的稳定性,属于亚热带区域的一类次生的暖性落叶阔叶灌丛,建议加强保护与开发利用的研究。  相似文献   

20.
用便携式全自动光合测定系统测定蜡梅属的蜡梅(Chimonanthus praecox)、浙江蜡梅(C.zhejiangensis)和柳叶蜡梅(C.salicifolius)夏冬季的光合特性。对三个物种夏季和冬季的最大光合速率、光补偿点、光饱和点、净光合速率、羧化效率、气孔传导力、水分利用效率和叶绿素含量的变化进行比较。结果表明,三物种均属典型的耐阴植物,其中蜡梅的耐阴性强于另两种,冬季三物种的耐阴性有所降低。  相似文献   

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