内皮祖细胞(EPCs)研究进展

组织工程血管以及组织工程化组织的血管化因目前内皮种子细胞扩增能力和生物活力的不足而受到限制。EPCs(内皮祖细胞)是内皮细胞的前体细胞。在胚胎期,内皮细胞系与造血细胞系来源于血岛内共同的祖先细胞;出生后,EPCs存在于骨髓,并可被转移至外周血,参与缺血组织的血管重建和血管的内膜化。因此EPCs有望成为今后组织工程内皮种子细胞的重要来源。     

组织/器官移植后血管重建的研究进展

本文针对组织/器官移植后血管重建相关的问题进行了综述，从组织移植(包括人工和天然组织)到器官移植(包括人工和天然的器官)，所得结论是不能及时有效建立移植物与宿主之间的血液循环网络是导致移植失败的最主要原因。文章介绍了在不同移植情况下移植物与宿主间相互作用导致血管循环系统重建的研究进展。移植物包括了组织移植和器官移植，文章对人工组织/器官和自然组织/器官的优缺点和应用前景进行了综述。作为特例，本文比较详细报道了我们团队近些年来开展的通过移植鹿茸干细胞组织(antlerogenic periosteum, AP)诱导异位或异体鹿茸生成的研究。AP是鹿茸发生的组织基础，如果将AP移植到鹿体其他部位的皮下就能发起异位生茸，如果移植到裸鼠的皮下就能诱导异种生茸。进一步的研究表明，AP移植如此成功(100%)是由于其强烈诱导宿主血管内皮细胞快速长进其组织中所分布的、由于机械损伤(剔除)导致的血管内皮细胞受损的血管中，迅速构建起嵌合血管网络，使移植的AP组织能够得到及时的血液灌注。成功鉴别和分离AP组织中这些内皮细胞诱导因子将对指导临床实现异种/异体组织/器官移植与宿主快速构建血液循环具有重要意义。...     

内皮祖细胞及其在组织工程中的应用

目前,组织工程化血管的构建和工程化组织器官的血管化因内皮种子细胞的扩增能力不足和生物活性不强而受到限制。内皮祖细胞(EPC)是内皮细胞的前体细胞。出生后,EPC主要存在于骨髓,可向外周血液缓慢释放,参与机体缺血组织的血管重建和损伤血管的重新内皮化。现对EPC的来源、分布、表型特征、动员、分化、归巢、分离、培养与鉴定等生物学特性和EPC在组织工程中的应用进行了全面的综述,并指出目前存在的问题和研究方向。     

丹参对冻融入胎儿卵巢组织异种移植早期血管生成的影响

目的：研究冻融人胎儿卵巢组织移植早期血管生成过程中微血管形态和密度的改变以及血管生成相关基因mRNA的表达;探讨丹参注射液对移植物血管生成的影响。方法：冻融胎儿卵巢组织异种移植至裸鼠肾被膜下,按给药不同分为对照组（生理盐水）和丹参组（丹参注射液每只0．09g／d）,分别于移植后48h、7d和28d回收移植物。结果：移植后两组卵巢组织微血管密度均明显增多;对照组移植后7d血管密度达峰,丹参组血管密度在移植后48h即已显著上升,此后两个时间段保持相对平稳。Angiopoietin-2mRNA表达在移植后48h两组均显著升高,丹参组上升幅度大于对照组（P〈0．05）。结论：冻融人胎儿卵巢组织新血管生成开始于异种移植后48h内,移植后7d组织内微血管密度达峰。丹参在移植早期应用可以促进移植后血管生成,其机制可能与它增加了血管生成相关因子Ang-2mRNA的表达有关。     

骨组织工程血管化的研究进展

血管化是组织工程骨成活的关键,组织工程骨的血管化过程与生理情况下的血管发生相似,但又有其独特性,并受多种因素影响。基于对组织工程骨血管化过程的认识,研究者通过联合细胞培养、促血管化生长因子、显微外科等方法重建血运。本文综述了当前骨组织工程的血管化研究进展。     

可降解组织工程血管支架成功用于犬股动脉移植

目的采用可降解的聚己内酯接枝肝素材料,负荷b-FGF(碱性成纤维细胞生长因子),体外构建的小口径组织工程血管,完成犬的股动脉移植动物实验。方法利用可降解的聚己内酯接枝肝素材料,电纺丝技术制备组织工程血管支架,并对支架负荷b-FGF生长因子,并进行材料的内皮细胞粘附实验。将体外构建的小口径组织工程血管,完成犬的股动脉移植动物实验,观察通畅率和移植术后组织工程血管的改变。结果可降解聚己内酯接枝肝素材料支架,负荷细胞生长因子(b-FGF),利于内皮细胞粘附。构建的组织工程血管进行体外动物实验构建,3个月移植物通畅率好,移植后取材,有新生内膜迁移和胶原纤维浸入。结论利用可降解聚己内酯接枝肝素材料构建小口径支架,初步符合构建组织工程血管支架的要求。     

兔支气管动脉的起始与分布

现有文献描述兔支气管动脉均是单侧起始于胸主动脉。为研究兔呼出气中水的来源,我们对兔该动咏的起始和分布作了初步探索,结果与上述记载不同。其多起源于右锁骨下动脉,距右颈总动脉根部外侧1厘米处,与乳内动脉共干起始。本文报告以血管戍形剂灌注法、墨汁灌注法观察其起始与分布;并以氚水示     

大鼠脊髓半横断伤联合架桥模型制作及评估

目的:建立大鼠脊髓半横断伤联合架桥模型,为研究脊髓损伤提供动物模型。方法:制作大鼠脊髓半横断伤模型,然后取大鼠前肢正中神经,并于半横断伤两端行正中神经架桥术。术后4周,左心室灌注固定取材,免疫组化染色检测GFAP、RECA、NF-200;另一部分动物行单宁酸-氯化铁灌注;观察移植物内有无血管、血管内有无血流、血管与周边神经纤维的关系。结果:外周神经架桥后4周,移植正中神经贴合于脊髓背侧1/2。移植神经内有RECA阳性的血管存在,而且有血流可以到达移植物内部,且神经纤维(NF-200阳性)与星形胶质细胞(GFAP阳性)关系紧密。结论:大鼠脊髓半横断伤联合正中神经架桥术后,由宿主可以向移植物内长入新生血管,血管有利于神经纤维的存活及生长。本模型为较好的外周神经移植的存活模型,可为进一步的深入研究提供一定的依据。     

组织工程血管补片动物模型的建立及围术期处理

目的评估组织工程血管补片动物模型的可行性并总结模型建立的围手术期处理。方法10只成年杂种犬,用自身的骨髓细胞和高分子可降解材料构建的组织工程血管补片扩大肺动脉流出道。结果实验中有1例在术中出现心动过缓,暂停手术操作后,其余手术均逐渐恢复,未造成不良后果。术后实验动物均存活。术后5～10min撤离呼吸机,拔除胸引管。术后两周肺动脉造影示左肺动脉通畅,未见动脉瘤形成,移植物处稍狭窄;取出移植物观察,血管管腔通畅,腔面光滑,无血栓,无感染。结论通过自身的骨髓细胞和高分子可降解材料构建的组织工程血管补片扩大犬肺动脉流出道成功建立了组织工程血管补片动物模型。为了保证模型的成功建立,应使用右侧卧位、尽早进行心电监护、及时处理心律紊乱和尽早撤离呼吸机等围术期护理要点。     

利用脱细胞血管基质体外构建小口径组织工程血管

目的探讨利用犬的间充质干细胞诱导分化种子细胞,以异种脱细胞血管基质为基础体外构建小口径血管移植物。方法采用密度梯度离心和贴壁培养的方法从犬骨髓中分离出间充质干细胞并体外培养,诱导分化成内皮样细胞和平滑肌样细胞;采用非离子型去垢剂和胰蛋白酶去除猪颈动脉血管壁结构细胞,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估。在生物反应器内采用旋转种植的方法将犬骨髓间充质干细胞诱导的内皮样细胞种植到脱细胞基质上,体外构建小口径组织工程血管。结果犬的骨髓间充质干细胞体外能够定向诱导分化为平滑肌样细胞和内皮样细胞,可以作为血管组织工程的种子细胞。经过脱细胞处理后,光镜和电镜观察证实血管壁的细胞成分完全去除。具有良好的孔径和孔隙率。支架在生物力学、孔隙率等方面符合构建组织工程血管支架的要求。在生物反应器内剪切力条件下可以初步构建出组织工程血管。结论小口径血管移植物可以将间充质干细胞诱导种子细胞,以异种脱细胞血管支架作为基质,在搏动性生物反应器内培养的方法进行构建。