移植物抗宿主病和移植物抗白血病相关细胞因子的研究进展

异基因造血干细胞移植（allogeneic hemotoic stem cell transplantation,allo-HSCT）是治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法,治疗效果主要依赖于移植物抗白血病效应（graft-versus-leukemia,GVL）,可以清除残存肿瘤细胞,达到完全治愈恶性血液病的目的。然而,GVL与allo-HSCT的并发症移植物抗宿主病（graft-versus-host disease,GVHD）紧密相连。通过合理调节一些细胞因子的作用可以达到降低GVHD、保留GVL的目的。该文就GVHD与GVL发生机制中相关细胞因子作用的研究进展做一综述。     

未成熟树突状细胞防治移植物抗宿主病的实验研究

目的：观察供者未成熟树突状细胞（imDC）刺激自体T细胞增殖的能力,探讨利用imDC防治移植物抗宿主病（GVHD）临床应用的可行性。方法：Ak健康供者外周血分离单核细胞,采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和白细胞介素（IL）4联合培养4d,诱导其分化成imDC;培养7d,分化成mDC。并通过倒置显微镜和HE染色观察细胞形态、流式细胞仪检测细胞表型。采用MLR方法,构建GVHD发生机制的模型,比较供者imDC和mDC刺激自体T细胞增殖的能力。结果：（1）培养4天后细胞具有典型的imDC特征,CDla、CD83和双抗分别表达为55．79％、64、67％和46、67％,成熟标志CD83表达较低;培养7天后具有典型mDC特征,CDla、CD83和双抗表达分别为61．56％、82．40％和64．12％,成熟标志CD83表达较高。（2）MLR法共孵育72小时后,加入CCK-8检测OD值,imDC组与对照组比较无统计学意义（P〉0．05）,不能刺激自体T细胞增殖（SI〈1．00）;mDC组与对照组、imDC组比较均有显著统计学意义（P〈0．01）,能够刺激自体T细胞增殖（SI〉2．00）。结论：供者imDC能够诱导自体T细胞低反应,有望用来防治GVHD。     

脐带间充质干细胞辅助治疗糖皮质激素耐药的慢性移植物抗宿主病5例并文献复习

目的:探讨脐带间充质干细胞输注治疗糖皮质激素耐药的慢性移植物抗宿主病的疗效和安全性。方法:5例糖皮质激素耐药的慢性移植物抗宿主病患者在原有免疫抑制剂治疗基础上联合脐带间充质干细胞治疗,2~4次为1个疗程,每次间隔1周。对患者进行定期随访观察其治疗效果、移植相关死亡、输注相关不良事件和复发率。结果:5例患者接受脐带间充质干细胞输注后2例获得完全缓解(CR)、2例获得部分缓解(PR),1例患者死亡。2例CR患者分别在脐带间充质干细胞治疗368、452d后停用免疫抑制剂,随访1~1.5年慢性移植物抗宿主病无复发;2例PR患者在脐带间充质干细胞治疗84、96d后开始进入免疫抑制剂减量阶段,目前病情仍稳定并存活。1例患者死于原发病无复发性肺部严重感染。治疗过程中及治疗后未观察到与治疗有关的副作用。新鲜制备脐带间充质干细胞的细胞活力(92%~95%)高于液氮冻存37℃水浴复苏细胞活力(72%~76%)。结论:脐带间充质干细胞辅助治疗可以改善糖皮质激素耐药的慢性移植物抗宿主病的临床症状且不增加恶性血液病复发率,新鲜制备间充质干细胞活性高于液氮冻存复苏细胞。     

大鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病模型的建立

目的建立较稳定的异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病动物模型,为异基因骨髓移植后的急性移植物抗宿主病（aGVHD）的相关研究提供实验参照。方法以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A、B、C、D、E 5组,移植当天所有受鼠均接受8.5 GY的全身照射（TBI）,于照射后4～6 h内,A组回输等量培养液,B组经尾静脉输注供鼠骨髓细胞（2×10^8个/kg）,C、D、E组分别回输供鼠骨髓细胞（2×10^8个/kg）＋不同比例的脾细胞。观察各组大鼠生存期、外周白细胞计数、及有无aGVHD的临床及病理表现。结果A组大鼠于15d内全部死亡,外周血白细胞计数明显减低,骨髓病理示造血组织减少,提示死于造血衰竭。B、C、D、E组大鼠外周血白细胞计数均有明显恢复,B组大鼠8只存活超过50 d,C、D、E组大鼠均于50 d观察期内死亡,并有aGVHD的临床表现及病理表现,但C组大鼠aGVHD的程度较轻且时间不集中,其中D、E组大鼠可于相对集中的时间内观察到典型aGVHD临床及病理。结论TBI预处理的方式是可行的,单纯输入异基因骨髓细胞不能引起明显的aGVHD,骨髓细胞与脾细胞1∶1及1∶1.5混合组均可作为异基因骨髓移植后理想的aGVHD动物模型。     

趋化因子及其受体介导的细胞迁移与移植物抗宿主病

移植物抗宿主病(graft-versus-hostdisease,GVHD)是同种异基因骨髓移植中的重要并发征。供者T细胞在输注入受者体内后迁移进入淋巴组织,识别受者同种异基因抗原,被受者抗原递呈细胞(antigenpresentingcell,APC)激活,进而活化、增殖分化,介导急性GVHD的发生。现有的研究已表明,活化的异体效应性T细胞经淋巴组织迁移进入黏膜组织以及实质性靶器官,如消化道、肝脏、肺脏和皮肤,进而造成这些器官和组织的损伤。因此,分子间相互作用尤其是趋化因子及其受体介导的效应性细胞的迁移是GVHD发生发展过程中关键的一环,受到了广泛的关注。进一步以趋化因子及其受体为靶标,亦可能形成有效的免疫生物学治疗,具有广阔的应用前景。     

IL-10在输血相关性移植物抗宿主病小鼠模型中的免疫调节作用

目的:IL-10在输血相关性移植物抗宿主病小鼠模型中的免疫调节作用。方法:取BALB/c实验小鼠免疫活性淋巴细胞,分别输注于BALB/c小鼠(设为A组)及BALB/c裸鼠(设为B组),建立TA-GVHD模型,观察小鼠症状,HE染色判断小鼠肝、肺、小肠、皮肤病理变化情况;采用双夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组小鼠血清IL-10浓度;用逆转录聚合酶链反应法RT-PCR检测移植后外周血单个核细胞中IL-10的表达。结果:A组中2只死亡(12.5%),B组中3只死亡(18.75%),共5只死亡,29只存活,两组死亡率比较无明显差异(P>0.05)。B组小鼠累及肝、肺、小肠和皮肤病理损伤程度较A组严重;存活小鼠IL-10浓度较死亡小鼠明显升高(P2<0.05);存活小鼠IL-10 mRNA表达阳性率96.55%明显高于死亡小鼠(20.00%)。结论:IL-10在输血相关的移植物抗宿主病小鼠模型中发挥负向免疫调节--免疫抑制作用。     

细胞因子在急性移植物抗宿主病中的临床研究

目的:探讨细胞因子IL-21、SIL-2R在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)发病机理中的作用。方法:观察20例Allo-HSCT患者aGVHD的发病情况,移植前后定期采集20例患者的外周血,采用双夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测其细胞因子IL-21、SIL-2R的浓度。结果:1.异基因造血干细胞移植后20例患者全部获得造血功能重建,中性粒细胞恢复到0.5×109/L及血小板恢复到20×109/L的中位时间分别为移植后13.5天及18天。2.发生aGVHD的患者,IL-21、SIL-2R浓度较移植前明显升高,IL-21、SIL-2R浓度在aGVHD阳性组明显高于aGVHD阴性组(P0.01)。结论:1.细胞因子IL-21、SIL-2R在aGVHD的发病中起重要的正向调节作用,检测异基因造血干细胞移植后患者血清的IL-21、SIL-2R水平有助于预测aGVHD的发生。2.IL-21、SIL-2R与感染无相关性。     

慢性抗Thy1抗体肾炎模型的研究进展

慢性抗thy1抗体肾炎模型由于其疾病过程与人类IgA肾病及其他的系膜增生性肾炎的疾病进程相似,可以用作研究慢性肾脏病的发病机制以及新的治疗策略,本文就慢性抗thy1抗体肾炎模型的建立方法、病理演变过程、发病机制及治疗进展做一综述.     

异基因造血干细胞移植后激素耐药胃肠道急性移植物抗宿主病的临床分析

目的探讨异基因造血干细胞移植后激素耐药胃肠道急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响因素。方法回顾性分析西安交通大学第一附属医院2012年1月至2019年12月期间行异基因造血干细胞移植,术后发生胃肠道aGVHD 20例患者的临床资料。按照一线糖皮质激素治疗后的反应分为激素敏感组(13例)和激素耐药组(7例)。单因素Logistics回归分析患者性别、年龄、诊断、移植前微小残留病灶、移植类型、供者年龄、供受者关系、供受者ABO血型、输注单个核细胞数、CD34+细胞数、CD3+细胞数、中性粒细胞及血小板植入时间、CMV及EB病毒感染、胃肠道aGVHD发生的时间等与激素耐药胃肠道aGVHD的关系。观察激素耐药患者治疗后的转归,采用Kaplan-Meier生存分析激素耐药及敏感患者的预后差异。结果20例胃肠道aGVHD患者中7例存在激素耐药。胃肠道GVHD发生时间<1个月,激素耐药的风险增加(OR=13.500,95﹪CI=1.197~152.211,P=0.035),患者性别、年龄、诊断、移植前MRD、移植类型、供者年龄、供受者关系、供受者ABO血型、输注的单个核细胞、CD34+细胞、CD3+细胞、中性粒细胞和血小板植入时间、CMV和EB病毒感染均不影响激素耐药(P>0.05)。7例激素耐药胃肠道aGVHD患者均接受二线CD25单克隆抗体治疗,治疗后5例有效,2例无效死亡。与激素敏感组比较,激素耐药组患者1年总生存率(64﹪比52﹪)降低及无进展生存率(28﹪比32﹪)升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论异基因造血干细胞移植后胃肠道aGVHD激素耐药可能与其发生时间相关,发生时间越早,越容易出现激素耐药。     

狼疮性肾炎病变肾组织中bFGF、CD68和PCNA表达的研究

目的　通过对狼疮性肾炎 (LN)与肾小球轻微病变 (GML)肾组织中bFGF、CD6 8、PCNA的原位检测和相关分析 ,以了解它们在LN发病中的意义及其相互关系。方法　以 14例GML为对照组 ,采用ABC免疫组化法对 2 3例LN病例的肾穿刺组织 ,分别检测其bFGF、CD6 8和PCNA表达情况。结果　与GML病例相比 ,LN组肾小球bFGF表达明显增强 (P <0 0 5 ) ,CD6 8和PCNA表达的阳性细胞数也明显增多 (P <0 0 1) ;IV型LN组肾小球bFGF明显强于II型LN组 ;LN组肾小球内CD6 8+ 与PCNA+ 细胞数间呈正相关 (r =0 5 6 ,P <0 0 5 ) ,其中IV型LN组中有肾小球新月体形成的病例 ,CD6 8+ 与PCNA+ 细胞数间也呈正相关 (r =0 86 ,P <0 0 5 )。结论　LN病变肾小球bFGF、CD6 8和PCNA表达均明显增强 ,其表达在某种程度上可反映临床LN病变程度的严重性。     

血清CXCL12/CXCR4/CXCR7信号轴水平与狼疮性肾炎患者疾病活动度及预后的关系研究

摘要 目的：探讨血清趋化因子C-X-C基元配体12（CXCL12）、趋化因子C-X-C基元受体4（CXCR4）、趋化因子C-X-C基元受体7（CXCR7）表达水平与狼疮性肾炎（LN）患者疾病活动度及预后的关系。方法：选择LN患者274例为LN组,根据LN患者疾病活动度分为LN活动组（n=146）和LN稳定组（n=128）,另选择体检健康的志愿者274例为健康对照组。采用Pearson法分析主要临床指标的相关性。随访2年,根据LN患者预后情况将其分为预后良好组（n=198）和预后不良组（n=70）。采用多因素Logistic回归分析影响因素。结果：LN组血清CXCL12、CXCR4、CXCR7表达水平高于健康对照组（P＜0.05）。LN活动组尿蛋白、C反应蛋白（CRP）、CXCL12、CXCR4、CXCR7水平高于LN稳定组,补体C3、补体C4水平低于LN稳定组（P＜0.05）。LN患者血清CXCL12、CXCR4、CXCR7表达水平与尿蛋白、CRP呈正相关,与补体C3、补体C4呈负相关（P＜0.05）。尿蛋白、CXCL12、CXCR4、CXCR7水平升高是LN患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。结论：LN患者血清CXCL12、CXCR4、CXCR7表达水平升高,与LN患者疾病活动度及预后不良密切相关。     

同种异体淋巴细胞致狼疮肾炎小鼠模型的研究

目的　制备狼疮肾炎小鼠模型。方法　采用昆明小鼠同种异体脾淋巴细胞经Lectin刺激后输入小鼠腹腔皮下的方法。结果　成功地制备了系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型 ,通过光镜、免疫荧光、电镜观察其病理形态、并检测了血清抗ds -DNA抗体、补体以及尿蛋白 ,证实了该模型的可靠性。结论　制备的系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型有实用价值     

小型猪在肾脏疾病研究中的应用

随着对小型猪研究的不断深入,其作为人类疾病模型的优势日益明显,在生物医学研究中的应用也日趋增多。比较解剖学和生理学研究表明,小型猪的诸多生物学特性均与人类极为相似,尤其在肾脏的解剖和功能方面几乎是人类的复制品,使其在复制肾脏疾病模型,研究疾病发病机制和评估治疗策略等中具有无可替代的作用。本文将综述小型猪作为疾病动物模型在肾脏疾病研究中的应用。     

IL-17 与狼疮性肾炎关系的研究新进展

系统性红斑狼疮是一种涉及多系统损害的自身免疫性疾病,其主要并发症及死亡原因之一是狼疮性肾炎。研究表明,IL-17和产IL-17细胞可以浸润肾脏,与其他细胞因子协同作用,引起肾脏局部炎症反应。拮抗IL-17的生物制剂已应用于银屑病、强制性脊柱炎等免疫介导炎症性疾病,但在系统性红斑狼疮及狼疮性肾炎的研究尚少。本文对IL-17与狼疮性肾炎的关系进行综述,探讨IL-17及其抑制剂在狼疮性肾炎治疗的作用及发展前景。     

SOD1 (copper/zinc superoxide dismutase) deficiency drives amyloid β protein oligomerization and memory loss in mouse model of Alzheimer disease

Oxidative stress is closely linked to the pathogenesis of neurodegeneration. Soluble amyloid β (Aβ) oligomers cause cognitive impairment and synaptic dysfunction in Alzheimer disease (AD). However, the relationship between oligomers, oxidative stress, and their localization during disease progression is uncertain. Our previous study demonstrated that mice deficient in cytoplasmic copper/zinc superoxide dismutase (CuZn-SOD, SOD1) have features of drusen formation, a hallmark of age-related macular degeneration (Imamura, Y., Noda, S., Hashizume, K., Shinoda, K., Yamaguchi, M., Uchiyama, S., Shimizu, T., Mizushima, Y., Shirasawa, T., and Tsubota, K. (2006) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 11282-11287). Amyloid assembly has been implicated as a common mechanism of plaque and drusen formation. Here, we show that Sod1 deficiency in an amyloid precursor protein-overexpressing mouse model (AD mouse, Tg2576) accelerated Aβ oligomerization and memory impairment as compared with control AD mouse and that these phenomena were basically mediated by oxidative damage. The increased plaque and neuronal inflammation were accompanied by the generation of N(ε)-carboxymethyl lysine in advanced glycation end products, a rapid marker of oxidative damage, induced by Sod1 gene-dependent reduction. The Sod1 deletion also caused Tau phosphorylation and the lower levels of synaptophysin. Furthermore, the levels of SOD1 were significantly decreased in human AD patients rather than non-AD age-matched individuals, but mitochondrial SOD (Mn-SOD, SOD2) and extracellular SOD (CuZn-SOD, SOD3) were not. These findings suggest that cytoplasmic superoxide radical plays a critical role in the pathogenesis of AD. Activation of Sod1 may be a therapeutic strategy for the inhibition of AD progression.     

慢性应激动脉粥样硬化动物模型和应激与AS的发生研究进展

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是缺血性心脑血管病的主要病理基础,环境、遗传等多因素共同影响下都能促进AS的形成与发展,越来越多研究表明慢性应激对于AS形成起到关键的作用,慢性应激可通过过度激活交感神经系统、肾素-血管紧张素系统与下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴促进AS的形成,并且与Toll样受体、肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6、脂联素等因素有密切联系。在研究慢性应激与AS发生的模型中,目前Apo E-/-小鼠、SD大鼠、Wistar大鼠等啮齿类动物仍然是主要模型,灵长类动物模型研究虽然更具有临床意义,但由于其成本、数量等因素限制了广泛使用。本文主要就慢性应激与AS的动物模型研究、慢性应激促进AS发生发展的相关机制进行综述。