白喉乌头及其炮制品生物碱成分变化与细胞毒性研究

摘要 目的：比较白喉乌头生品、炮制品生物碱成分的含量变化及其细胞毒性。方法：将白喉乌头生品及哈萨克法炮制品（以下简称"炮制品"）采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）分析比较，测定炮制前后各提取液生物碱成分的变化；用MTT比色法分析比较不同浓度白喉乌头生品及炮制品提取液的细胞毒性。结果：白喉乌头经炮制，乌头碱及次乌头碱峰面积显著减少，降低率分别为 45.1 %和 74.5 %；去乙酰高乌甲素峰面积明显升高，升高率为62.2 %；高乌甲素、冉乌头碱及去乙酰冉乌头碱峰面积基本不变；同时，有新的色谱峰产生，说明经炮制有新成分产生；白喉乌头生品及炮制品提取液浓度分别为在5000、2500、1250、625、312.5 μg/mL 给药48 h，与白喉乌头生品提取液相比，其炮制品提取液细胞抑制率明显降低（P＜0.05），白喉乌头生品及炮制品的IC50分别是1826.70 μg/mL、3192.48 μg/mL。结论：白喉乌头经炮制，主要成分的色谱峰面积发生了变化，同时有新色谱峰产生，其毒性成分乌头碱、次乌头碱峰面积明显减少，说明乌头碱、次乌头碱含量减少，通过 MTT 比色法检测细胞毒性，证明其达到减毒目的。     

乌头及其同属近缘种的SSR指纹图谱研究

乌头(Aconitum carmichaeli Debx.)为中国重要的药用植物,种质资源丰富,同属近缘种繁多。该研究采用SSR分子标记技术对采自17个种群的51份乌头样本和13个同属近缘种的65份样本进行扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,分析了乌头及其同属近缘种的遗传多样性、遗传分化和系统发育关系,筛选出稳定性好、多态性高的SSR引物构建乌头及其近缘种的指纹图谱。结果表明:(1)11对乌头微卫星引物均表现出高的多态性,共检测出109个复等位基因,平均每个位点9.91。(2)乌头在物种水平上遗传多样性丰富(A=3.090 9,I=0.889 7,h=0.540 2),种群间的遗传分化显著(Gst=0.277 4);乌头属14种植物表现出了较高的遗传多样性(A=9.909 1,I=1.526 2,h=0.690 5),物种间遗传分化显著(Fst=0.437),基因流微弱(Nm=0.451 8)。(3)聚类分析表明,同一种群的乌头样本首先聚在一起各自形成小支,17个小支聚为一支;13个乌头近缘种材料中,相同物种的样本分别聚为一支;乌头属14个物种聚为5个大支,与形态分类结果一致。(4)利用基因型丰富、多态性高的6对SSR引物(Tchin03、Tchin04Tchin20、Tchin26、Tchin29、Tchin32)可有效区分14种乌头属植物,并以此建立了乌头种质资源和近缘种的DNA指纹图谱。该研究为乌头的种质资源鉴定及混伪品鉴定提供了重要的技术支撑。     

高乌头活性成分提取工艺的优化北大核心CSCD

为开发并优化高乌头(Aconitum sinomontanum)中有效成分高乌甲素及冉乌头碱的提取工艺,采用高效液相色谱法测定高乌甲素及冉乌头碱含量,以二者综合提取率为考察指标,采用正交实验设计优选最佳提取工艺。结果表明,优选工艺为药材粉末加10倍量的80%甲醇及2%药材量的浓盐酸,在75°C下回流提取6小时。经验证,优选所得的工艺稳定可行,可作为高乌头活性成分提取的新工艺。     

高乌头活性成分提取工艺的优化

为开发并优化高乌头(Aconitum sinomontanum)中有效成分高乌甲素及冉乌头碱的提取工艺,采用高效液相色谱法测定高乌甲素及冉乌头碱含量,以二者综合提取率为考察指标,采用正交实验设计优选最佳提取工艺。结果表明,优选工艺为药材粉末加10倍量的80%甲醇及2%药材量的浓盐酸,在75°C下回流提取6小时。经验证,优选所得的工艺稳定可行,可作为高乌头活性成分提取的新工艺。     

云南乌头属花卉资源及其开发利用

本文报道了云南省野生乌头属花卉的种类,分布,观赏特性及园林应用前景,并提出了开发利用建议。     

国产乌头属的化学分类

根据二萜生物碱的类型、生物合成、在乌头属植物中的分布,并参照国产乌头属的系统分类、形态演化和地理分布,本文讨论国产乌头属的化学分类。 1．以牛扁碱型成分为主的牛扁亚属和以乌头碱型成分为主的乌头亚属可能在乌头属进化的初期阶段就已分化,各自沿着独立的道路发展。2．乌头亚属包括以下类群：(1)以阿替生型、维特钦型、乌头碱型胺酵和 酯碱为主的保山乌头系,主要分布于国产乌头属近代发展分化中心之一的横断山脉和金沙江流域,可能国产乌头组的近代分化就是由该系发展而来; (2)以乌头碱、中乌头碱、下乌头碱为主的乌头系,为进化程度较高的群,所含乌头碱及尼奥灵显示了该系与保山乌头系的亲缘关系; (3)以乌头碱和松果灵为主的准噶尔乌头系,所含乌头碱和松果灵显示了该系与保山乌头系的亲缘关系; (4)以滇乌碱类酯碱为主的显柱乌头系和蔓乌头系,为进化程度较高的群,其酯碱有别于乌头碱类。3．以阿替生及C₁₉内酯型为主的甘青乌头系及圆叶乌头系,可能为进化早期形成的高山特化类群。4. 以阿替生和C₁₉乌头碱型胺醇为主的露蕊乌头亚属,可能为特化类群。     

多根乌头的药用资源研究

对多根乌头的生物学特性,有效成分的鉴别,分离等方面进行了研究报道,从多根乌头中首次分得12－表－欧乌碱,其中准噶尔乌头碱,新乌碱,12－表－欧乌碱含量较高,为多根乌头药用资源的开发利用提供了科学依据。     

国产十五种翠雀族植物的核型研究

本文报道了国产乌头属Aconitum L.12种和翠雀属Delphinium L．3种植物的染色体数目和核型。花葶乌头A．scaposum var．scaposum和聚叶花葶乌头A．scaposum var．vaginatum的核型公式为2n=2m+6sm+8st;两色乌头A．alboviolaceum为2n＝16＝2m+6sm(2sat)十8st;高乌头A．sinomontanum var．sinomontanum为2n＝16＝4m+4sm+8st,而狭盔高乌头A．sinomontanum var．angustius为2n＝32＝6m+6sm+20st(1sat);褐紫乌头A.brunneum为2n＝16＝2m(1sat)+14sm 松潘乌头A．sungpanense为2n＝16＝6m(2sat)+10sm(2sat);弯枝乌头A．arcuatum为2n=16=4m+12sm;乌头A．carmichaeli为2n=32＝10m+22sm;北乌头A．kusnezoffii为2n＝32＝10m十22sm;鸭绿乌头A.jaluense为2n＝32=10m+22st;伏毛铁棒锤A．flavum为2n＝16＝2m+14sm; 铁棒锤A．pendulum为2n=16=4m+12sm;缩梗乌头A．sessiliflorum为2n＝16＝2m+10sm+4st;展毛翠雀花D．kamaoense var．glabrescens 为2n=16＝2m+6sm+8st;蓝翠雀花D．caeruleum为2n=16=2m+6sm+8st;多枝翠雀花D．maximowiczii为2n=16=2m+6sm+8st。其中花葶乌头、狭盔高乌头、褐紫乌头、松潘乌头、鸭绿乌头、伏毛铁棒锤、缩梗乌头、展毛翠雀花、蓝翠雀花、多枝翠雀花的染色体数目和核型为首次报道。     

国产7种乌头属植物的核型研究

本文报道了国产7种乌头属植物（两色乌头（Aconitum alboviolaceum Kom.,牛扁 A.barbartum var.puberulum Ledeb.,蔓乌头A.volubile Pall.,展毛蔓乌头 A.ciliare DC.,北乌头 A.kusnezoffii Reichb.,蒿叶乌头 A.artemisiaefolium Bar.et Skv.,细叶乌头 A.macrorhgnchum Turcz.）的核型。其中展毛蔓乌头、蒿叶乌头和细叶乌头的核型为首次报道。本文还首次指出乌头属中具多年生根状茎的牛扁亚属植物的核型没有明显的二型性,而具二年生块根的乌头正属植物的核型的二型性十分明显。此外还讨论了细叶乌头及展毛蔓乌头的系统位置,认为它们与蔓乌头有较近的亲缘关系。     

乌头属植物化学成分、药理作用及其内生菌的研究进展

毛茛科乌头属植物广泛分布于北温带地区,具有重要的药用价值。乌头属植物主要的化学成分是生物碱,其中二萜生物碱是历来的研究热点。现代药理学研究证明,乌头属植物具有镇痛、抗炎、抗肿瘤及杀虫等作用。目前乌头属植物内生菌的研究也逐渐开展。本文对乌头属植物近年来报道的新的化学成分、药理研究和利用植物内生菌产生活性成分等进行了综述,可为乌头属植物的进一步开发利用提供参考。