镉、铅对蟾蜍精巢毒作用的酶学研究

为研究镉、铅对精巢的生化毒作用机理 ,应用氯化镉、硝酸铅溶液对成年雄性蟾蜍进行腹腔染毒 (按镉计 0 .1、0 .2、0 .4、0 .8mg/ kg体重 ;按铅计 1、2、4、8mg/ kg体重 ) ,连续染毒 7d后活体解剖 ,测定分析精巢中各种酶的活性。结果显示 ,在镉染毒下 ,精巢乳酸脱氢酶 (L DH)和酸性磷酸酶 (ACP)的活性随镉染毒剂量的增加而降低 ,而碱性磷酸酶 (AL P)未发现明显变化 ;在铅染毒下 ,乳酸脱氢酶 (L DH)和碱性磷酸酶 (AL P)的活性随铅染毒剂量的增加而降低 ,而酸性磷酸酶 (ACP)未发现明显变化 ;乳酸脱氢酶 (L DH)同工酶在镉、铅染毒下则主要表现为酶带 L DH1 、L DH2 的抑制或缺失和 L DH5活性的增强。因此 ,镉、铅对蟾蜍的雄性生殖毒性机理可能与酶的活性存在着一定的关系 ,L DH可以考虑作为反映镉、铅中毒对精巢功能影响程度的一种有价值的生化指标     

镉和铅对鲫鱼肝胰脏过氧化氢酶活性的影响

采用急性毒性实验方法,研究了不同ρCd2+和ρPb2+及二者混合溶液,染毒24、48、72、96 h后,对鲫鱼肝胰脏过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明:在实验剂量范围(ρCd2+为0.5～6.0 mg/L,ρPb2+为10.0～40.0 mg/L),0.5、2.0 mg/L的Cd2+对CAT活性有诱导作用,6.0 mg/L的Cd2+对CAT活性有抑制作用;Pb2+胁迫对CAT活性随着染毒时间的延长而逐渐降低;2.0 mg/L Cd2+与20.0 mg/L Pb2+混合胁迫对CAT活性有明显的诱导作用;0.5mg/L Cd2++10.0 mg/L Pb2+,6.0 mg/L Cd2++40.0 mg/L Pb2+混合胁迫对CAT活性有明显抑制作用.Cd2+和Pb2+胁迫对CAT活性的影响呈剂量效应,二者关系曲线为抛物线,抛物线顶点是鲫鱼对Cd2+和Pb2+污染从适应到中毒反应的阈值,可间接作为检测环境污染情况的指标.     

镉对蟾蜍的4种器官乳酸脱氢酶同工酶的影响

以腹腔注射法对蟾蜍(Bufo bufo gargarizans)给镉,处理一周后,观察了4种镉中毒浓度(0．1、0．2、0．4、0．8mg／kg)条件下的蟾蜍心、肝、肾和睾丸中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的变化。结果表明：随着镉中毒浓度的升高,心脏LDH同工酶的活性明显升高,睾丸LDH同工酶的活性明显下降,肝中的LDH1、LDH2、LDH3、LDH5在0．4、0．8mg／kg浓度组酶活性明显增加,而LDH4则明显减弱,肾中LDH1的活性随镉浓度的升高而明显升高,其它各酶带活性出现先增强而后又逐渐减弱的现象。结果提示了镉对蟾蜍主要器官LDH同工酶的影响具有组织差异性。     

维生素C对镉负荷小鼠睾丸抗氧化功能的影响*

目的: 分析镉(Cd)负荷不同时间对小鼠睾丸抗氧化酶的影响及维生素C(VC)的保护作用。方法: 清洁级雄性昆明小鼠72只分为4组(n=18):对照组、Cd组(CdCl₂ 3 mg/kg)、VC组(200 mg/kg)、VC(200 mg/kg)+ Cd(CdCl₂ 3 mg/kg)组,每日染毒1次,染毒1 d和3 d及同时补充VC保护,第1日和第3日染毒24 h后,每组取半数小鼠称重,取血清和睾丸组织;检测睾丸脏器系数,血清和睾丸组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),及睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)及总谷胱甘肽(T-GSH)。结果: 与对照组比较,Cd组1 d和3 d小鼠体重和睾丸脏器系数下降;染毒3 d,Cd组小鼠血清SOD显著降低、MDA显著升高(P＜0.05);Cd组1 d小鼠睾丸的SOD、GSH-Px、T-GSH及GSH/GSSG显著升高(P＜0.05),而3 d的上述指标均显著降低(P＜0.05),Cd组1 d和3 d MDA水平均显著升高(P＜0.05);VC处理后减轻的程度有所降低。与Cd组比较,VC+ Cd组血清SOD和MDA水平在染毒3 d变化有显著性差异(P＜0.05);VC+ Cd组在染毒1 d和3 d,小鼠睾丸的SOD、GSH-Px、T-GSH及GSH/GSSG水平变化有显著性差异(P＜0.05),VC+ Cd组在染毒3 d睾丸的MDA水平显著降低(P＜0.05)。与Cd组1 d比较,染毒3 d小鼠的血清SOD水平显著降低(P＜0.05),睾丸指标变化也有显著性差异(P＜0.05)。结论: VC处理可在一定程度上改善镉负荷小鼠的抗氧化功能,对睾丸氧化损伤具有保护作用。     

GB对低温胁迫黄瓜叶绿体及SOD、POD同工酶的影响

采用电镜观察和聚丙烯酰胺垂直板电泳法,研究了GB对低温胁迫下黄瓜幼苗叶绿体超微结构和SOD、POD同工酶的影响。结果表明,低温胁迫下,GB可使黄瓜幼苗叶绿体膜结构保持完好,而对照的叶绿体基粒破坏严重;与对照相比,GB处理对SOD、POD同工酶谱带数目均无影响,但POD同工酶的P2(Rf0．24)、P3(Rf0．30)、P4(Rf0．36)酶带的活性增加,SOD同工酶的S1(Rf0．14)、S5(Rf0．58)酶带活性较高,保持了黄瓜幼苗体内相对较高的抗氧化酶活性。GB可保护膜的完整性和稳定性,从而提高黄瓜幼苗的抗冷性。     

铅对蟾蜍肝、肾过氧化物酶和酯酶同工酶的影响

以腹腔注射法对蟾蜍 (Bufobufogargarizans)给铅 ,处理 7d后 ,使用聚丙烯凝胶垂直平板电泳法 ,研究了不同浓度 (按铅计 1、2、4、8mg·kg-1 体重 )的铅对蟾蜍肝脏、肾脏过氧化物酶和酯酶同工酶的影响。结果表明 ,不同浓度的铅均可使肝、肾组织过氧化物酶同工酶带强弱发生明显变化 ;对肝、肾酯酶同工酶的影响表现出一定的组织差异性 ,且在一定范围内主要表现为应激性 ,即低剂量的铅可诱导酶活性的提高。     

双酚A 对雄性大鼠抗氧化能力影响的初步研究

目的:探讨双酚A(BPA)对成年大鼠抗氧化能力的影响。方法:将健康成年雄性SD大鼠84只随机分为5个双酚A染毒剂量组(200、50、5、0.5、0.0005 mg/kg)和1个对照组,连续灌胃染毒8周,并监测体重变化,染毒结束后测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)含量;此外,提取肝脏组织RNA,用荧光实时定量PCR测定肝脏硫氧还原蛋白过氧化物酶2(prdx2)mRNA的表达水平。结果:随着染毒时间的延长,50 mg/kg及200 mg/kg剂量组的动物体重增长速度逐渐减慢,自4周开始,与对照组相比有显著差异(P<0.05);染毒结束时,其体重分别为对照组的90.52%和91.61%(p<0.05),而其它低剂量组间则无明显差异;大鼠血浆GSH-Px含量总体上呈下降趋势,且5 mg/kg以上剂量组与对照组相比差别均有统计学意义(p<0.01);染毒组血浆SOD水平虽也低于对照组,但无统计显著性;此外,大鼠肝脏组织prdx2 mRNA水平随双酚A剂量增高呈剂量依赖性降低,与对照组相比,其在最低剂量组(0.0005 mg/kg)即有显著差异(p<0.01)。结论:双酚A可造成大鼠抗氧化酶系统失衡,导致氧化损伤效应,prdx2可能是反映其氧化损伤敏感的生物学标志。     

花背蟾蜍的染色体组型及核仁形成区硝酸银特异性染色

花背蟾蜍隶属于蟾蜍科 (Bufonidae) ,蟾蜍属(Bufo) ,是常见种之一 ,在安徽及以北各省均有分布。本文研究其染色体组型和 Ag- NORs,以期了解该物种的细胞遗传学特征 ,以及对整个蟾蜍属的分类、进化提供一些资料。1　材料和方法花背蟾蜍 (4♀ 2♂ )取自安徽淮北市郊。　　实验时按 1～ 3mg秋水仙素 / kg体重 ,肌肉注射0 .0 1%秋水仙素 ,8～ 12 h后处死动物取大腿骨。用0 .6 5% Na Cl冲洗骨髓细胞于离心管 ,10 0 0 r/ min离心10 min,弃上清液 ,加 8ml 0 .4 % KCl,混匀 ,于室温下低渗 30 min加 8滴固定液 (甲醇∶冰乙醇 =3∶ 1) ,轻轻打匀 ,…     

重金属镉和铅胁迫对海洋微藻的毒性效应研究

设置不同浓度的重金属Cd2+(0、0.2、0.4、0.6、0.8和1 mg•L-1)和Pb2+(0、0.1、0.2、0. 4、0.8和1.6 mg•L-1)胁迫处理, 检测米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)的生长生理情况, 分析重金属胁迫对海洋微藻生长的毒性效应, 探讨超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)等对重金属胁迫的缓解作用。研究结果发现, 重金属Cd2+和Pb2+对米氏凯伦藻具有较强的毒性, 随着重金属浓度的提高, 细胞生长受到毒害作用增强; 而米氏凯伦藻对重金属Cd2+和Pb2+胁迫具有一定的适应性。重金属Cd2+和Pb2+胁迫导致米氏凯伦藻细胞的叶绿素a、叶绿素b含量下降(1.6 mg•L-1 Pb2+胁迫除外), 类胡萝卜素含量提高, 最大光能转化效率(Fv/Fm)下降, 表明重金属胁迫抑制藻的光合作用, 影响藻的生长繁殖。丙二醛(MDA)随着重金属Cd2+和Pb2+浓度提高而升高, 说明重金属引起藻细胞膜透性增加, 藻细胞遭受破坏。SOD活性整体呈现先升高后下降(或与对照持平)的趋势, 提示海洋微藻的抗氧化酶系统在低浓度重金属胁迫下产生应激性反应, 酶活性增强; 而CAT活性上升, 也对藻细胞起到保护作用, 推测两者共同反应, 以缓解藻体遭受的重金属毒害作用。结果可为了解重金属胁迫对海洋微藻的毒性效应提供参考。     

不同浓度铵态氮对镉胁迫轮叶黑藻生长及抗氧化酶系统的影响

用含有不同浓度NH₄⁺-N (0、0.5、2.0和4.0 mg·L^-1)和10 mg·L^-1Cd的1/10 Hoagland营养液培养沉水植物轮叶黑藻,研究了氨态氮对Cd胁迫下轮叶黑藻的生长及抗氧化酶系统的影响,探讨富营养化污染水体沉水植物退化机理.结果表明,10 mg·L^-1Cd对轮叶黑藻能产生明显的胁迫作用,叶绿素合成量明显降低;超氧化物岐化酶(SOD)与过氧化物酶(POD)活性呈先升高后下降的趋势.NH₄⁺-N能加速Cd对植物的胁迫作用,单因子Cd作用3 h时SOD明显升高,而Cd和NH₄⁺-N共同作用0.5 h SOD就明显升高.Cd与NH₄⁺-N共同作用时,相对于叶绿素和蛋白质,抗氧化酶是早期敏感指标,并且SOD比POD更敏感.本试验条件下,NH₄⁺-N与Cd共同作用2 d后,对轮叶黑藻的胁迫作用主要取决于Cd,NH₄⁺-N的作用几乎可以忽略.     

铅胁迫对黄瓜幼苗抗氧化酶活性及同工酶的影响

采用水培法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法,研究铅胁迫对黄瓜幼苗过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及同工酶的影响.结果表明,铅胁迫下黄瓜幼苗地上部POD活性除第5天外均随铅浓度的增加而逐渐降低,POD同工酶谱带和表达量减少.在0～500 mg·L^-1铅浓度范围内,SOD活性随铅浓度的增加而增加,第7天达到最大值后急剧下降,低于同期对照值,900 mg·L^-1铅处理SOD活性随时间的延长逐步降低,SOD酶谱带和表达量与铅浓度呈负相关.CAT酶谱带无明显变化,而表达量存在差异.     

Effect of mycorrhizal inoculations on heavy metal uptake and stress alleviation of Cajanus cajan (L.) Millsp. genotypes grown in cadmium and lead contaminated soils

The aim of the present study was to evaluate the role of arbuscular mycorrhizal (AM) fungi on metal uptake, oxidative effects and antioxidant defence mechanisms under cadmium (Cd) and lead (Pb) stresses in Cajanus cajan (L.) Millsp. (pigeonpea). Treatments consisted of two concentrations each of Cd (25 and 50 mg/kg of soil) and Pb (500 and 800 mg/kg of soil) singly as well as in combination. Both metals induced oxidative damage through increased lipid peroxidation, electrolyte leakage and hydrogen peroxide levels, but Cd was found to be more toxic than Pb. Compared with the effects of Cd or Pb alone, the combination of Cd and Pb acted synergistically; however, Pb immobilisation in soil controlled the uptake of Cd in plants. There was a direct correlation between the type of genotype, heavy metal content and oxidative damage in concentration dependent manner. Superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and peroxidase (POX) increased under stress. The toxicity symptoms of the metal stress were significantly higher in Sel-141-97 genotype when compared with Sel-85 N. The high ratio of glutathione to its oxidised form, glutathione disulfide (GSH/GSSG), could be restored by means of higher glutathione reductase (GR) activity and increased GSH synthesis in mycorrhizal stressed plants. AM inoculations with Glomus mosseae significantly arrested uptake of Cd and Pb into the root system and further translocation into the above ground parts and led to decreased lipid peroxidation and electrolyte leakage. Increased activities of SOD, CAT, POX as well as GR were observed in all mycorrhizal stressed plants.     

柱状田头菇菌丝对镉胁迫的抗氧化响应

研究了不同浓度Cd处理对柱状田头菇菌丝抗氧化酶及谷胱甘肽含量的影响.结果表明,在低浓度范围内随着Cd处理浓度的增加,菌丝抗氧化酶的活力上升,过氧化氢酶(CAT)与超氧化物歧化酶(SOD)的活性分别在Cd浓度为0.1和0.4mmol·L-1时达最大值;过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)和脂氧合酶(LOX)的活性在Cd浓度为0.2mmol·L-1时达到峰值.而在高Cd浓度处理时,柱状田头菇菌丝抗氧化酶系(POD、CAT、SOD等)显著受到抑制.0.4~1.6mmol·L-1Cd处理可显著提高菌丝体内还原型谷胱甘肽(GSH)水平,却不影响氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量.在整个试验过程中,均未检测到抗坏血酸及抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性.用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析Cd胁迫下柱状田头菇菌丝抗氧化酶的同工酶谱发现,0.1~0.8mmol·L-1Cd处理可诱导过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)和脂氧合酶(LOX)新同工酶的表达,提高组成型过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶的表达强度;1.6mmol·L-1Cd处理显著抑制POD、CAT、SOD等的表达.     

镉长期暴露对黑斑蛙的氧化胁迫和抗氧化能力的影响

在实验条件下,将黑斑蛙暴露于12．5mg／L和25．0mg／L浓度的镉溶液中30d,分别测定了黑斑蛙在暴露10、20和30d时肝、肾组织中镉（Cd）含量、过氧化产物丙二醛（MDA）的含量、还原型谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性,以探讨镉对机体的脂质过氧化作用及机体的抗氧化损伤机制。实验结果表明,不同剂量组黑斑蛙肝、肾镉含量、MDA含量均随着镉暴露时间的延长而升高,且肝MDA含量与镉在肝中的蓄积量呈显著正相关（R^2=0．8643,n=9）。肝脏GSH含量随镉暴露时间的延长而被显著诱导,且与MDA含量呈显著正相关（R^2=0．5933,n=9）;肾GSH含量则随暴露时间的延长而显著下降,与MDA含量呈显著负相关（R^2=0．8609,n=9）。不同剂量组肝SOD活性随镉暴露时间的延长而升高,肾SOD活性在高剂量组随镉暴露时间的延长表现为先升高后回落下降的趋势。可见,在镉的长期暴露下,细胞膜过氧化增强是镉伤害机体的主要原因,而GSH含量、SOD活性的升高则可能是机体抗过氧化的机理之一。     

Zinc Dyshomeostasis in Cardiomyocytes after Acute Hypoxia/Reoxygenation

This study aimed to assess the protective roles of polysaccharides from Agaricus blazei Murill (ABP) against cadmium (Cd)-induced damage in chicken livers. A total of 80 Hy-Line laying chickens (7 days old) were randomly divided into four groups (n = 20). Group I (control) was fed with a basic diet and 0.2 ml saline per day, group II (Cd-treated group) was fed with a basic diet containing 140 mg/kg cadmium chloride (CdCl₂) and 0.2 ml saline per day, group III (Cd + ABP-treated group) was fed with a basic diet containing 140 mg/kg CdCl₂ and 0.2-ml ABP solution (30 mg/ml) per day via oral gavage, and group IV (ABP-treated group) was fed with 0.2-ml ABP solution (30 mg/ml) per day via oral gavage. The contents of Cd and malondialdehyde (MDA), the activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-PX), the messenger RNA (mRNA) levels of inflammatory cytokines and heat shock proteins (HSPs), the protein levels of HSPs, and the histopathological changes of livers were evaluated on days 20, 40, and 60. The results showed that Cd exposure resulted in Cd accumulating in livers and inhibiting the activities of antioxidant enzymes (SOD and GSH-PX). Cd exposure caused histopathological damage and increased the MDA content, the mRNA levels of inflammatory cytokines (TNF-α, IL-1β, and IL-6) and HSPs (HSP27, HSP40, HSP60, HSP70, and HSP90) and the protein levels of HSPs (HSP60, HSP70, and HSP90). ABP supplementation during dietary exposure to Cd reduced the histopathological damage and decreased the contents of Cd and MDA and the expression of inflammatory cytokines and HSPs and improved the activities of antioxidant enzymes. The results indicated that ABP could partly ameliorate the toxic effects of Cd on chicken livers.     

黑斑蛙精巢MDA和抗氧化酶对铅、镉暴露的生态毒性响应

以健康性成熟黑斑蛙为供试动物,以精巢组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性为指标,进行了水体铅、镉暴露的生态毒性响应研究.结果表明:(1)精巢MDA含量随铅、镉暴露浓度的升高而明显增加,且呈明显的浓度-效应关系.说明低水平铅、镉的长期暴露对黑斑蛙精巢具有一定的损伤作用;(2)SOD活性在各处理组响应变化不明显,CAT、GSH-Px活性则被显著诱导,说明GSH-Px、CAT在铅、镉引起的精巢抗氧化损伤中起着重要作用;(3)3种抗氧化酶相比,GSH-Px活性对铅、镉暴露响应最敏感,SOD活性的响应最不明显,精巢GSH-Px活性是指示铅、镉暴露的优选生物标志物。     

黏着箭菌JB19对菊苣幼苗铅镉抗性及黄酮生物合成的影响

【目的】探讨耐重金属细菌对铅(lead, Pb)和镉(cadmium, Cd)胁迫下菊苣(Cichorium intybus L.)幼苗Pb、Cd抗性和黄酮生物合成的调控作用。【方法】在不同浓度Pb和Cd [(200+20) mg/kg、(400+40) mg/kg、(800+80) mg/kg]处理下,接种菌株JB19并测定菊苣幼苗生长指标、Pb和Cd含量、抗氧化酶活性、总黄酮含量和黄酮生物合成相关基因表达量。【结果】菌株JB19可显著提高不同浓度Pb和Cd处理下菊苣的生物量和叶绿素含量;减少氧化损伤,地上部和根部Pb、Cd含量均降低,其中在(Pb200+Cd20) mg/kg处理下H₂O₂和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量分别比对照降低了25.7%和26.1%,地上部Pb、Cd含量降低的幅度最大,分别降低了53.2%和54.1%;加强了菊苣幼苗的抗氧化酶防御系统,黄酮生物合成相关基因均显著上调,其中在(Pb400+Cd40) mg/kg处理下黄酮类化合物的含量增加了105.2%,查尔酮异构酶基因上调最显著,达458....     

镉胁迫对小报春幼苗生长及生理特性的影响

该研究采用盆栽控制试验,测定不同浓度(0、5、50、100、150、200 mg/kg)土壤Cd胁迫下小报春幼苗生长及生理生化指标,以探究小报春(Primula forbesii Franch.)对重金属镉(Cd)污染的抗性和敏感性,为新型香花地被植物应用于Cd污染土壤提供理论依据。结果表明:(1)低浓度(5 mg/kg)Cd胁迫能促进小报春株高和根长的伸长,高浓度(≥150 mg/kg)Cd胁迫下株高、根长和生物量明显降低。(2)随Cd胁迫浓度增加,小报春幼苗叶片光合作用、叶绿素含量、SOD和CAT活性先上升后下降,而其超氧阴离子产生速率、过氧化氢、丙二醛含量、叶相对电导率和POD活性持续升高。(3)在Cd胁迫条件下,小报春体内K、Zn含量降低,叶和根中Ca、Mg含量显著增加,体内Cd含量明显升高,且根系Cd含量远远高于叶和叶柄。研究发现,小报春幼苗对Cd胁迫具有一定的耐性,低浓度(5 mg/kg)Cd胁迫对小报春生长影响较小,但高浓度(≥150 mg/kg)Cd胁迫对小报春产生明显的毒害作用,影响其正常生长;小报春可能通过增强体内抗氧化酶系统活性、增加叶和根中Ca、Mg含量和根系截留镉来减轻镉胁迫的伤害,提高自身耐受镉胁迫能力。     

Cadmium-induced oxidative stress and DNA damage in kidney of pregnant female rats

In the present study, we have investigated the influence of sub-acute treatment with cadmium (Cd) on some parameters indicative of oxidative stress and DNA damage in tissues of pregnant female rats. Pregnant female rats (n=6) were injected subcutaneously, daily with a dose of cadmium chloride of 3 mg/kg body weight (b.w.) from day 6 to day 19 of pregnancy, and they were allowed to deliver normally. MDA level and GPx, CAT and SOD activities were used as markers of oxidative stress in liver and kidney. The 8-oxo-dG level was measured by the HPLC-EC system. Cd treatment increased MDA (+116%, p<0.01) in kidney. Moreover, Cd treatment also decreased CuZn-SOD (-11%, p<0.05) and GSH level (-52%, p<0.05) in kidney. Treated rats displayed an increase of the liver metallothionein (MT) level. Induction of MT in liver was probably implicated in the detoxification of Cd. The high level of Cd (3 mg/kg) used in the present study is partially neutralized by MT in liver, whereas the free fraction could be implicated in the oxidative stress and DNA oxidation observed in kidney. Cd treatment failed to alter 8-oxodGuo, indicating the absence of DNA oxidation in liver; by contrast, the same treatment increased the 8-oxodGuo level (+51%, p<0.05) in the kidney of pregnant female rats, indicating an oxidative stress associated with DNA damage only in kidney.