基于粪便DNA的东北马鹿遗传多样性

东北马鹿(Cervus canadensis xanthopygus)为国家二级重点保护野生动物,近些年其种群数量急剧下降、分布区不断退缩、种群基因交流受阻,很多地区更是难觅其踪迹。亟需对其种群的遗传变化,特别是遗传多样性和近交衰退等种群遗传信息开展进一步评价,增强保护与管理的针对性。本研究在大、小兴安岭和长白山脉的6个重点研究区域,共收集409份疑似马鹿粪便样本。首先基于mtDNA Cyt b基因测序技术进行物种鉴定,并对鉴定为马鹿的阳性样本利用微卫星技术进行个体识别。结果共识别出172只东北马鹿个体;Cyt b基因序列共检测出14个变异位点和11个单倍型,单倍型多样性为0.849 (0.105～0.732),核苷酸多样性为0.678%(0.099%～0.775%)。10个微卫星位点检测出种群平均等位基因数为5.7 (5.2～7.2),有效等位基因数为3.3 (2.5～4.1),观测杂合度为0.687 (0.644～0.725),期望杂合度为0.619 (0.564～0.689),近交系数为-0.113 (-0.160～-0.037)。结果表明,东北马鹿种群遗传多样性处于中等水平,其...     

中国圈养梅花鹿的遗传多样性和遗传结构

东北梅花鹿(Cervus nippon hortulorum)的野生种群已濒临灭绝,但其圈养种群遍布全国各地,是我国圈养梅花鹿的主要品种(亚种)。为了探讨圈养梅花鹿种群作为东北梅花鹿野外放归项目资源种群的可行性,测定了来自9个圈养种群45只梅花鹿个体的线粒体DNA控制区的部分序列,以此分析我国圈养梅花鹿种群的遗传多样性和遗传结构。结果表明,我国圈养梅花鹿种群的遗传多样性并不贫乏,种群之间并没有发生显著的遗传分化。因此,东北地区的圈养梅花鹿种群可以作为野外放归项目的资源种群,而野外放归项目的建群者应来源于东北地区的多个圈养种群。     

基于DNA分子标记的潘氏闭壳龟遗传多样性分析

潘氏闭壳龟（Cuora pani）是中国特有种,国家二级重点保护野生动物。由于非法贸易加之栖息地破坏等,其野外种群数量十分稀少。本研究旨在利用线粒体基因与核基因标记揭示潘氏闭壳龟的遗传多样性和遗传结构,以期为中国潘氏闭壳龟的种群保护和管理提供科学依据。本次共研究14只潘氏闭壳龟个体,其中,6只原产地为四川广元,8只产地未知。结果表明,在14只潘氏闭壳龟样本中鉴定出Cyt b单倍型、ND4单倍型和R35单倍型各2个,且均有1个新单倍型;Cyt b、ND4和R35基因单倍型多样性分别为0.440、0.143和0.154,核苷酸多样性分别为0.000 41、0.000 19和0.000 63;各单倍型的平均遗传距离（p）均小于0.01。基于三个基因联合数据集的系统发育分析表明,潘氏闭壳龟与金头闭壳龟（C.aurocapitata）互为单系进化支,且中性检测和核苷酸错配分析显示,潘氏闭壳龟群体近期历史上可能未经历群体扩张事件。潘氏闭壳龟群体遗传多样性低,种内变异小,群体应对环境变化的能力低,建议应加强对中国潘氏闭壳龟野外种群的基础研究和保护力度,同时规范人工繁殖,以避免近亲繁殖和种群衰退。     

利用非损伤性方法评估神农架保护区川金丝猴种群遗传多样性

湖北神农架国家级自然保护区是中国川金丝猴(Rhinopithecus roxellana)的重要分布区之一,为了更好地了解神农架川金丝猴种群遗传结构,并制定有效的保护对策,采集了该保护区2个川金丝猴种群126份样品,其中分布在大龙潭的人工补食种群粪便样品60份,分布在千家坪的一个小种群粪便样品63份、肌肉样品3份。通过应用线粒体DNA(mtDNA)引物和筛选出的9对近缘微卫星位点成功地进行了川金丝猴种群的遗传多样性和遗传结构分析,同时使用Y染色体相关标记方法进行性别鉴定。结果显示:在24份川金丝猴mtDNA D-loop区401bp序列中,共检测出27个变异位点,定义了20个单倍型,单倍型多样性(h)为0.9820,核苷酸多样性(π)为0.0129;其中有9对微卫星位点能够在117份粪便样品DNA中稳定扩增,2对位点可能偏离Hardy-Weinberg平衡,平均有效等位基因数(Ne)为3.85,遗传杂合度(Ho)为0.7450;多态信息含量(PIC)为0.5950。使用Y染色体标记方法,在58个特有的基因型中检测到18个雄性和40个雌性川金丝猴。微卫星标记和mtDNA D-loop区基因序列均表明神农架川金丝猴存在较丰富的遗传多样性,同时2个取样点川金丝猴种群间出现了明显的遗传分化。     

东北虎的家园

中国东北虎栖息地主要在吉林省和黑龙江省,其中吉林省在汪清和珲春一带,由6-7只个体组成东北虎繁育种群。黑龙江省则分布在完达山东部,包括东方红、七星砬子、老爷岭等保护区,由6只个体组成东北虎繁育种群。     

鄱阳湖长江江豚的微卫星遗传多样性及发展预测

为了科学评估鄱阳湖长江江豚(Neophocaena asiaeorientalis asiaeorientalis)的遗传多样性并预测其发展趋势,研究基于124头活体长江江豚的血液样本及42头搁浅死亡长江江豚的组织样本,利用微卫星遗传标记对该种群的遗传多样性进行了评估,并利用BottleSim软件对该种群遗传多样性的发展趋势进行了模拟预测。研究结果显示,鄱阳湖长江江豚种群10个微卫星位点的平均等位基因数(N_a)为5.80、平均观察杂合度(H_o)为0.653、期望杂合度(H_e)为0.664,表现出中等程度的核DNA遗传多样性;在剔除死亡个体后,平均等位基因数下降至5.50,并且死亡个体在3个微卫星位点上具有3个稀有等位基因,表明非正常死亡将导致鄱阳湖种群遗传多样性下降。此外,模拟结果表明,如果保持当前有效种群(N_e=62)和雌雄性比(0.87:1),鄱阳湖长江江豚种群的遗传多样性将快速下降;而要实现100年内保存90%以上遗传多样性的目标,则其有效种群至少需要200头或者实际种群数量超过1000头。研...     

中国狼不同地理种群遗传多样性及系统进化分析

为了解中国狼不同地理种群遗传多样性及系统发育情况,从中国境内狼的主要分布区青海、新疆、内蒙古和吉林4个地区采集样品,用分子生物学技术手段成功地获得44个个体线粒体DNA控制区第一高变区(HVRⅠ)序列和40个线粒体Cyt b部分序列。线粒体控制区HVRⅠ共检测到51个变异位点,位点变异率为8.76%;线粒体Cyt b部分序列发现31个变异位点,位点变异率为5.33%,未见插入及缺失现象,变异类型全部为碱基置换。共定义了16个线粒体HVRⅠ单倍型,其中吉林与内蒙种群存在共享单倍型,估计这两地间种群亲缘关系较近。4个地理种群中新疆种群拥有较高的遗传多样性(0.94)。中国狼种群总体平均核苷酸多态性为2.27%,与世界其他国家地区相比,中国狼种群拥有相对较高的遗传多样性。通过线粒体HVRⅠ单倍型构建的系统进化树可以看出,中国狼在进化上分为2大支,其中位于青藏高原的青海种群独立为一支,推测其可能长期作为独立种群进化。基于青海种群与新疆,内蒙种群的线粒体Cyt b遗传距离,推测中国狼2个世系可能在更新世冰川时期青藏高原受地质作用急速隆起后出现分歧,分歧时间大约在1.1 MY前。     

中国东部沿海中小型河流鱼类的整体遗传多样性评价——以曹娥江为例

研究将曹娥江作为东部沿海中小型河流代表, 基于线粒体细胞色素b基因(Cyt b)分子标记对其鱼类的整体遗传多样性水平进行了评估。结果表明, 21个种26个群体鱼类Cyt b基因的单倍型多样性指数(h)和核苷酸多样性指数(π)水平分别为0.074—0.987和0.00019—0.00520, 物种间遗传多样性水平差异较大; 比较不同江段鱼类遗传多样性水平发现, 曹娥江鱼类的单倍型多样性指数水平从河口到中下游再到上游逐渐降低(P<0.05)。比较同一物种的遗传多样性水平发现, 曹娥江鱼类的核苷酸多样性指数水平低于长江、珠江等大型河流鱼类的相应指数水平(P<0.05), 提示曹娥江鱼类的整体遗传多样性处于中等偏下水平, 鱼类资源亟需科学的保护和修复。进一步分析人为扰动因素对曹娥江鱼类遗传多样性水平的影响发现, 敏感型鱼类的单倍型多样性指数水平显著低于中等耐受型鱼类(P<0.05); 麦穗鱼(Pseudorasbora parva)、光泽黄颡鱼(Pelteobagrus nitidus)和刺鳅(Mastacembelus aculeatus)3种鱼类的上游镜岭群体单倍型多样性指数和核苷酸多样性指数水平均低于其中游仙岩群体的相应指数水平。结果提示, 水体污染、过度捕捞可能是造成目前曹娥江鱼类遗传多样性水平较低的主要原因。研究结果将为曹娥江乃至东部中小河流的鱼类资源的管理、保护和开发利用提供重要的理论依据。     

伊洛河马口鱼遗传差异及其种群分化研究

研究利用细胞色素b(Cyt b)基因分析了采自于伊洛河的48个马口鱼(Opsariichthys bidens)个体间的遗传距离, 并构建其系统发育关系。分析结果显示, 48个个体聚为两个支持率为100%的分支, 分支间没有共享单倍型。每个分支的样本覆盖了所有的采样点, 分支内个体间的平均遗传距离为0.2%, 而分支间的遗传距离为3.1%。微卫星分析结果显示, 99.88%的遗传差异来自于种群内个体间, 种群间的差异只占了0.12%, 两个分支种群并没有发生显著的遗传分化(F_st=0.0012, P=1)。以δ13C和δ15N构建了两个分支的生态位, 结果显示, 伊洛河马口鱼的两个分支的营养生态位没有发生分离。基于线粒体Cyt b基因的遗传分歧, 伊洛河马口鱼的两个分支可能代表不同的物种。但它们在种群遗传结构上并没有发生显著的种群分化, 个体间亲缘关系树与系统发育树的分歧暗示种群间不存在生殖隔离, 营养生态位也没有分离。研究结果并不符合隐存种的解释, 伊洛河马口鱼两个分支间线粒体DNA的遗传差异可能源自于祖先种群或者种间杂交。     

滇杨种群遗传多样性与遗传结构

滇杨(Populus yunnanensis)是我国西南地区的特有树种, 具有速生、易无性繁殖、适应性强等优良特性, 是典型的南方型杨属树种。研究滇杨遗传多样性及种群结构对其种质资源的收集、保存和利用具有重要的意义。本研究从我国滇杨主要分布区云南和四川共采集了6个种群, 包括云南的昭通(ZT)、会泽(HZ)、嵩明(SM)、洱源(EY)、拉市海(LS)以及四川的美姑(MG), 共64个个体, 利用34对SSR分子标记和3对cpDNA叶绿体标记开展遗传多样性与遗传结构研究。SSR引物共检测到154个等位基因, 平均等位基因数为4.529, 观测杂合度(Ho)与期望杂合度(He)分别为0.552和0.472, 遗传分化系数(Fst)平均值为0.238, 多态性信息含量指数(PIC)平均值为0.421, 基因流(Nm)为0.806。滇杨的遗传结构分析(DAPC)与遗传距离的主坐标分析(PCoA)、UPGMA聚类分析均将6个种群划分为3个亚类: 第І亚类包括昭通种群、会泽种群和嵩明种群的4个个体, 第ІІ亚类包括嵩明种群的6个个体以及洱源种群和拉市海种群, 第III亚类为美姑种群; 嵩明种群包含第І和第ІІ两个亚类的混合遗传成分。3个cpDNA联合序列中共检测到35个变异位点, 分为13个单倍型, 其中单倍型H5在种群中分布最为广泛, 其余的单倍型均为种群特有的单倍型。分子方差分析(AMOVA)表明种群内的遗传变异大于种群间变异。研究表明滇杨不同种群的遗传分化具有地域性, 可选择就地保护; 昭通种群遗传多样性最高, 且包含7种叶绿体单倍型, 单倍型类型最多, 应优先保护。     

梅花鹿的微卫星多态性及种群的遗传结构

梅花鹿是我国极度濒危的鹿科动物,其野生种群已濒临灭绝。为了探讨我国野生梅花鹿的保护和管理对策,我们选用了16 个微卫星位点检测来自东北、四川、江西和浙江种群的122 份样品,以此分析我国野生梅花鹿种群的遗传多样性和遗传结构。费希尔确切性检验表明,四个种群中均存在偏离哈迪- 温伯格平衡的现象。与其它的濒危动物相比,中国梅花鹿有着相对较高的遗传多样性:每个位点的平均等位基因数为4 个,平均期望杂合度为0. 559。四个种群中,东北种群拥有最高的平均等位基因数(n = 3. 688),东北种群、四川种群、江西种群以及浙江种群的平均期望杂合度分别为0. 584,0. 477,0. 585 和0.589,它们之间不存在显著的差异。同时,利用逐步突变模型、双相突变模型和无限等位基因突变模型检测了种群的瓶颈效应,结果表明:除四川种群外,其他种群在近期内都经历过遗传瓶颈。费希尔确切性检验及配对样品F ST 的结果均表明:四个梅花鹿种群间存在显著的遗传分化(P < 0. 001)。因此,我们建议将我国梅花鹿的野生种群划分为4 个管理单元进行保护和
管理。     

内蒙古赛罕乌拉自然保护区东北马鹿种群遗传多样性与性别结构分析

东北马鹿（Cervus canadensis）种群面临着地理隔绝和生境破碎化等问题,对其种群遗传多样性和性别结构的研究,有助于了解其隔离种群的生存现状,为保护与管理工作提供科学依据。本研究利用8对微卫星分子标记,对内蒙古赛罕乌拉国家级自然保护区的456份马鹿粪便样品进行遗传多样性分析。结果识别出2015年冬季56只个体,2016年秋季41只个体;微卫星位点平均期望杂合度为0.650 1,平均多态信息含量为0.603 5,表明该地区马鹿种群的遗传多样性处于中等偏上水平。种群遗传分化系数为-0.053 99、近交系数为0.086 67、基因流为2.942 11,说明该马鹿种群基因交流普遍,近交水平低。基于SRY基因的方法进行性别鉴定,种群雌雄性比在冬季为1.8：1,秋季为0.71：1。本研究显示,该区域马鹿种群目前遗传多样性较为丰富,但现有种群集中分布于保护区内,处于相对隔离状态,长期发展则存在种群内部近交的风险。因此,加强对种群遗传结构和生存状态的监测,并促进与附近区域马鹿个体的交流,将有助于保持区域性东北马鹿种群长期繁盛。     

神农架川金丝猴人工补食群的遗传多样性和亲缘关系

以湖北神农架国家级自然保护区的川金丝猴人工补食群体为研究对象,利用微卫星遗传标记对该群体的遗传多样性和亲缘关系进行研究,并对其种群的遗传多样性发展趋势进行了预测。结果显示,12个微卫星位点在该补食群体中共检测到50个等位基因,平均观察杂合度和平均期望杂合度分别为0.668和0.630,多态信息含量为0.442-0.696,平均0.567。亲权鉴定中共鉴定出11个父-母-子单元,各单元未有近亲繁殖的状况。亲缘系数结果显示具有亲缘关系的个体对达21.64%,群体平均亲缘系数为0.1108,现6个家庭单元中有两对候选亲本具有亲缘关系,表明该群体存在较高的近交风险。遗传多样性变化趋势的模拟结果表明,种群的数量对遗传多样性的影响比较大,群体中雄雌比例也对遗传多样性的损失有影响;为避免近亲交配,保持群体的遗传多样性水平,建议进一步做好人工补食群金丝猴的个体识别,完善家庭系谱,明确繁殖个体的遗传背景;引入一批有效的建群者来增加种群的数量及优化雄雌的比例。     

Genetic diversity and demographic history of introduced sika deer on the Delmarva Peninsula

The introduction of non‐native species can have long‐term effects on native plant and animal communities. Introduced populations are occasionally not well understood and offer opportunities to evaluate changes in genetic structure through time and major population changes such as bottleneck and or founder events. Invasive species can often evolve rapidly in new and novel environments, which could be essential to their long‐term success. Sika deer are native to East Asia, and their introduction and establishment to the Delmarva Peninsula, USA, is poorly documented, but probably involved ≥1 founder and/or bottleneck events. We quantified neutral genetic diversity in the introduced population and compared genetic differentiation and diversity to the presumed source population from Yakushima Island, Japan, and a captive population of sika deer in Harrington, Delaware, USA. Based on the data from 10 microsatellite DNA loci, we observed reduced genetic variation attributable to founder events, support for historic hybridization events, and evidence that the population did originate from Yakushima Island stocks. Estimates of population structure through Bayesian clustering and demographic history derived from approximate Bayesian computation (ABC), were consistent with the hypothesized founder history of the introduced population in both timing and effective population size (approximately five effective breeding individuals, an estimated 36 generations ago). Our ABC results further supported a single introduction into the wild happening before sika deer spread throughout the Delmarva. We conclude that free‐ranging sika deer on Delmarva are descended from ca. five individuals introduced about 100 years ago from captive stocks of deer maintained in the United Kingdom. Free‐ranging sika deer on Delmarva have lost neutral diversity due to founder and bottleneck events, yet populations have expanded in recent decades and show no evidence of abnormalities associated with inbreeding. We suggest management practices including increasing harvest areas and specifically managing sika deer outside of Maryland.     

Pedigree Analysis of the Sika Deer (Cervus nippon) using Microsatellite Markers

The usefulness of microsatellite markers in pedigree analysis of the sika deer (Cervus nippon) was tested in a herd in which the maternal lineages were recorded. Eighteen sets of microsatellite primers originally designed for bovine, ovine, and cervine loci successfully amplified polymorphic DNA in the deer. The numbers of alleles per locus ranged from two to seven, and the observed heterozygosity ranged from 0.350 to 0.900. The resolution power of the markers in paternity testing was then determined by calculating exclusion probabilities and paternity indices. Parentages of the study population were efficiently discriminated by genotyping 17 microsatellite loci. The microsatellite data were also used to calculate the genetic relatedness between individuals, which significantly correlated with coancestry coefficients for the pairs. Our results demonstrate that the microsatellite markers are efficient tools in studying the social structure and behavior of the sika deer, as well as in monitoring the inbreeding status.     

Microsatellite analysis of genetic diversity of the Vietnamese sika deer (Cervus nippon pseudaxis)

The Vietnamese sika deer (Cervus nippon pseudaxis) is an endangered subspecies of economic and traditional value in Vietnam. Most living individuals are held in traditional farms in central Vietnam, others being found in zoos around the world. Here we study the neutral genetic diversity and population structure of this subspecies using nine microsatellite loci in order to evaluate the consequences of the limited number of individuals from which this population was initiated and of the breeding practices (i.e., possible inbreeding). Two hundred individuals were sampled from several villages. Our data show both evidence for limited local inbreeding and isolation by distance with a mean F(ST) value of 0.02 between villages. This suggests that exchange of animals occurs at a local scale, at a rate such that highly inbred mating is avoided. However, the genetic diversity, with an expected heterozygosity (H(e)) of 0.60 and mean number of alleles (k) of 5.7, was not significantly larger than that estimated from zoo populations of much smaller census size (17 animals sampled; H(e) = 0.65, k = 4.11). Our results also suggest that the Vietnamese population might have experienced a slight bottleneck. However, this population is sufficiently variable to constitute a source of individuals for reintroduction in the wild in Vietnam.     

Genetic Variations Revealed by Microsatellite Markers ina Small Population of the Sika Deer (Cervus nippon)on Kinkazan Island, Northern Japan

Genetic variations within a population of the Japanese sika deer, Cervus nippon, on Kinkazan Island were studied by microsatellite analysis. Seventeen pairs of polymerase chain reaction primers designed for several species of ungulates successfully amplified polymorphic microsatellite DNA in sika deer. About 20% of the Kinkazan population was sampled and genotyped for nine diagnostic microsatellite loci. Alleles at those loci in the Kinkazan population were found to be under the Hardy-Weinberg equilibrium. To determine whether the Kinkazan deer have a reduced level of genetic variability, an average heterozygosity in the population was calculated and compared with the values determined for other populations from Hyogo, Yamaguchi, Shimane, Tsushima, and Nagasaki. Neither the observed nor the expected heterozygosity in the Kinkazan deer significantly differed from that in the other populations. Our result indicated that, despite its small population size, the Kinkazan deer preserve extensive microsatellite variations.     

东北虎豹国家公园梅花鹿的空间遗传格局及其影响因素

东北梅花鹿是东北虎豹国家公园主要的大型食草动物之一,是东北虎豹的主要猎物,对针阔混交林群落的维持有关键的作用,探究其遗传多样性及空间遗传格局对东北梅花鹿的保护以及国家公园生态系统的健康至关重要。在国家公园珲春保护区内,通过非损伤方法获得遗传样本,利用微卫星标记,研究该梅花鹿种群的空间遗传格局及其影响因素。结果表明：本研究区梅花鹿种群平均期望杂合度为0.721,遗传多样性较为丰富。有限的扩散能力常常导致种群在遗传距离上具有显著的空间自相关模式,本研究区梅花鹿种群在0-1km距离等级内在遗传距离上具有显著的空间自相关现象,据此可推测,该地区梅花鹿扩散距离为1km左右。STRUCTURE分析表明,珲春地区梅花鹿种群不存在明显的遗传分化。各种空间变量可以显著影响物种的遗传分化。本研究选取海拔、坡度、坡向、地表起伏率、人类干扰5个变量,研究其对梅花鹿种群遗传结构的影响,这5个变量多被认为与大中型哺乳动物扩散阻碍相关。依据5个变量建立了336个阻力模型,并进行偏曼特尔检验。其中,依据海拔、坡向、地表起伏率、人类干扰假设建立的246个阻力模型与遗传距离之间的关系并不显著,综合所有变量的15个生境适宜性模型阻力模型与遗传距离的关系也都不显著。在依据坡度假设建构的75个阻力模型中,只有1个模型与遗传距离有显著的正相关关系,该模型同时也是在控制空间自相关影响后,在所有模型中与遗传距离相关性最高的模型。根据该模型推测,最适宜梅花鹿扩散的坡度为10°,梅花鹿可能倾向于利用缓坡进行扩散。结果对东北虎豹国家公园梅花鹿种群的保护具有重要意义。     

梅花鹿华南亚种和东北亚种警戒声比较

梅花鹿Cervus nippon是社群性哺乳动物,其声音通讯在社群中发挥十分重要的作用。梅花鹿目前存在3个亚种,本研究采集了浙江省清凉峰国家级自然保护区的野生华南亚种C.n.kopschi和浙江省温州康寿鹿业科技有限公司的圈养东北亚种C.n.hortulorum的警戒声,进行声音特征分析。结果显示:(1)华南亚种具有较为多态性的警戒声,具有单音节和双音节2种不同类型的叫声,明显清晰的频带有3~4个,频率分布在1 726~15 403 Hz,而东北亚种虽也有单音节和双音节2种不同类型的叫声,但明显清晰的频带只有1个,频率分布在307~4 523 Hz;(2)综合其他亚种的相关参数,认为清凉峰华南亚种的警戒声频率范围最广且频带最多,推测由其生存的环境或遗传因素导致;(3)东北亚种的警戒声频带数量少和频率范围较窄,推测与长期的人为养殖有一定的关系。本研究结果将对浙江清凉峰野生梅花鹿种群的保护、管理与利用提供一定的帮助。     

Genetic diversity and breeding system in a group of neotropical epiphytic ferns (Pleopeltis; Polypodiaceae)

Epiphytes are ecologically important components of tropical forests worldwide and yet they have been underrepresented in studies of reproductive biology. Given the presumed ephemeral nature of their substrates, and the importance of dispersal and colonization, epiphytes might be expected to undergo substantial inbreeding to ensure reproductive success, as in weedy terrestrial plants. While there is some evidence for inbreeding in epiphytic angiosperms, the only previous studies of fern epiphytes indicate that they are predominantly outcrossing. The present study reports on the genetic diversity and breeding system of six members of the Neotropical epiphytic fern genus Pleopeltis (Polypodiaceae). A survey of isozyme variability using starch gel electrophoresis revealed high population levels of polymorphism (P = 0.62), allelic diversity (A = 2.3), and individual heterozygosity (Ho = 0.181), but little differentiation among conspecific populations (I 3 0.98; Gst = 0.048), and high interpopulational gene flow rates (Nm > 1). In addition, there was no indication of homozygote excess within populations that might indicate a history of selfing in these ferns: populations generally conformed to Hardy-Weinberg expected genotype frequencies, and both Wright's inbreeding coefficient (Fis) and Holsinger's intragametophytic selfing rates approached zero. Possible mechanisms limiting inbreeding in these ferns include antheridiogen activity and high levels of genetic load that would lead to inbreeding depression upon selfing.