克隆和动物克隆

１９９７年２月２３日,英国苏格兰爱丁堡罗斯林研究所Ｗｉｌｍｕｔ和Ｃａｍｐｂｅｌ领导的研究小组,用高度分化的乳腺细胞成功克隆绵羊的消息在英国《Ｎａｔｕｒｅ》杂志发表后,在全世界引起轰动［１］。由于哺乳动物的克隆成功,人的克隆已出现成功的可能,因此已引起...     

克隆

1977年2月23日,英国《Nature》发表Wilwut等用羊乳腺上皮细胞成功克隆出绵羊多利的消息后,在全世界引起了很大的反响,克隆问题引起了人们的普遍关注。由于历史     

棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV)G4株Ha109蛋白的原核表达及抗体制备

根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopoly-hedroyirus,HaSNPV)G4 株基因组全序列,设计引物,利用PCR方法扩增出开放阅读框(open reading frame,ORF)109编码片段并将其克隆至载体pGEM-T Easy,测序正确后将其亚克隆至原核表达载体pGEX-KG,经IPTG诱导,融合蛋白GST-Ha109在E.coli BL21中以包涵体形式得到高效表达.表达目的蛋白大小为38.5 kD,经SDS-PAGE分离纯化,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.抗体经1∶6000倍稀释后用于Western b1otting分析,获得特异性显色信号,为深入研究Ha109的功能奠定基础.     

鄂尔多斯高原风蚀沙化梁地克隆植物的分布及其与物种多样性的关系

 采用样线法和点样法对鄂尔多斯风蚀沙化梁地上的植物进行了调查,研究了梁地上克隆植物的分布、克隆植物在群落中的重要性及其与群落物种多样性之间的关系。结果表明：1）在梁顶的典型草原植物群落和梁底的滩地盐生植物群落中克隆植物的物种丰富度较高,而在梁坡的沙生植物群落中较少,非克隆植物物种在梁顶出现频率较高,在梁坡和梁底较少;密集型克隆植物物种丰富度的变化与非克隆植物相同,游击型克隆植物在梁顶植物群落中没有出现,在梁坡群落中也很少,而在梁底的滩地中较多。2）梁底群落中克隆植物的重要值高于梁顶和梁坡群落中克隆植物的重要值,梁顶与梁坡群落中非克隆植物的重要值高于梁底群落中非克隆植物的重要值;在梁坡与梁底群落中,克隆植物的重要值都高于非克隆植物的重要值,而在梁顶群落中克隆植物与非克隆植物的重要值之间无差异;梁顶与梁坡群落中密集型克隆植物的重要值高于梁底群落中密集型克隆植物的重要值,而游击型克隆植物的重要值在梁底群落中较高;在梁顶与梁坡群落中,密集型克隆植物的重要值分别高于游击型克隆植物的重要值,而在梁底群落中,密集型克隆植物的重要值低于游击型克隆植物的重要值。3）梁顶的典型草原植物群落中,群落物种多样性随非克隆植物的重要值、克隆植物的重要值、密集型克隆植物的重要值的变化趋势相同,都为抛物线型。梁坡的沙生植物群落中,群落物种多样性与非克隆植物的重要值呈正相关,而分别与克隆植物和密集型克隆植物的重要值呈负相关。梁底的滩地盐生植物群落中,群落物种多样性与非克隆植物的重要值呈正相关,而与克隆植物和游击型克隆植物的重要值呈负相关。     

不依赖连接反应的高通量克隆方法

以脱脂菜籽粕酶解的复合氨基酸为主要原料,螯合率为考察指标,采用L16(4 5)正交试验设计,考察了pH值、温度、时间和配位比对螯合率的影响.结果显示,影响因素的高低顺序为:配位比＞pH值＞时间＞温度.结果表明,复合氨基酸与铜螯合的主要影响因素为pH值和配位比,且配位比的影响达到极显著水平.最佳工艺条件为:时间50 min,温度50℃,配位比2∶1,pH为9,此条件下的复合氨基酸螯合铜的螯合率为94.59％,氨基酸含量为30.2％.     

自然条件下风箱果的克隆构型

 在自然条件下,风箱果（Physocarpus amurensis）主要靠克隆繁殖维持种群。植物克隆构型的可塑性变化对于其适应环境异质性具有重要意义 。为探求风箱果的克隆构型及根茎生长动态,研究了其地下根茎的构筑型、形态特征、根茎的直径随长度变化的规律和地下根茎间的夹角。结 果表明：风箱果的地下根茎的构筑型基本上属于游击型;风箱果无性系平均含有(6±2)个分株和(9.33±3.48)个根茎;根茎的直径随长度变化 的曲线为抛物线型;分枝夹角较为稳定,多为30°和70°。风箱果生产大量的根茎系统,每一个克隆片段能够占据一定的空间,以保证自身生 存和维持种群繁衍。     

克隆与克隆动物基因相同吗

美籍华人牛满江教授,著名生物学家,１９１２年生于中国河北省。１９３２年考入北京大学,１９３６年毕业留校任助教,１９３７年在昆明西南联大任教。１９４４年由北大派出去美国斯坦福大学深造,１９４６年获博士学位。自此,先后在斯坦福大学,洛克菲勒医学研究所,后改名为洛克菲勒大学和坦普尔大学从事教学和研究工作。并获得坦普尔大学终身教授,名字被载入美国科学家名人录。从１９５３年起,他潜心于“核糖核酸在发育中独特功能”的研究,是这一研究领域的先行者。他创立了“外基因学说”,开创了人工培育新物种的新思路。获得“利利学术”及“古根海姆”奖。１９７０年被选为台湾中央研究院院士。牛教授身居海外,对祖国科学教育事业极为关注,１９７８年,首先接收中科院派去美国的访问学者,打破中美学术交流的禁令,１９８０年中科院授予他科学顾问,中国各地的大学及科研机构授予他名誉教授、顾问头衔者３０多个。近来,为促进中国生命科学的研究和教育事业的发展,在他主持下在北京成立了“牛满江基金会”,将为培养优秀人才,促进国际学术交流方面作更多的贡献。     

克隆的概念,意义与进展

首先介绍了克隆在个体,细胞和分子水平的生物学定义,强调了克隆是一个“群体”概念。然后较为详细地讨论了分子克隆（ＤＮＡ克隆）和通过细胞核移植进行动态（小鼠）克隆的基本,意义,目前进展和有等回答的一些问题。     

匍匐茎草本绢毛匍匐委陵菜对局部遮荫的克隆可塑性

采自林窗和林内生境的绢毛匍匐委陵菜 (PotentillareptansL .var.sericophyllaFranch)“分株对”(即由一匍匐茎节间相连着的两个分株 ,其一为“目标分株” ,另一为“相连分株”)在一户外实验中经历了全不遮荫、全部遮荫和局部遮荫处理。该植物的基株生物量、匍匐茎总长度、分株数、匍匐茎比节间重、叶柄长、比叶柄重在遮荫条件下较小。匍匐茎节间长度没有对遮荫处理发生反应。在局部遮荫处理 ,遮荫斑块的分株的叶柄长度由于连着未遮荫斑块中分株而变得更长。这种克隆整合对克隆形态可塑性的修饰作用只在林窗生境来源的实验植物中观察到。其他克隆生长和克隆形态特征的可塑性在不同生境来源的实验植物间没有差异。     

毛乌素沙地根茎灌木羊柴的遗传多样性和克隆结构

采用淀粉凝胶电泳技术对毛乌素沙地根茎灌木羊柴（ＨｅｄｙｓａｒｕｍｌａｅｖｅＭａｘｉｍ．）８个群体的遗传多样性和克隆结构进行了初步研究。利用１０个酶系统１５个等位酶位点的检测表明,羊柴群体具有较高的遗传变异水平,多态位点百分率Ｐ＝３７．０,等位基因平均数Ａ＝１．４８,平均期望杂合度Ｈｅ＝０．１０１;但８个群体间的分化很小（Ｆｓｔ＝０．０６７）;固定沙丘群体和半固定沙丘群体在等位酶水平上的变异性无显著差异。通过７个多态位点的研究表明,羊柴群体中的克隆多样性很高（Ｄ＝０．９１５６）,但不同克隆在规模上相差很大。同时,群体间的克隆分化较大,广布基因型仅占３．２％。克隆空间结构的分析表明,羊柴的基株分布为游击型构型,克隆之间的镶嵌明显。