细菌mtl-D朌基因的克隆及在转基因八里庄杨中的表达

运用ＰＣＲ方法克隆了大肠杆菌１－磷酸甘露醇脱氢酶（ｍｔｌ－Ｄ）基因,序列分析表明与已发表序列相比,除第 ４１６位密码子由 ＡＡＡ代替 ＣＡＴ、相应的氨基酸由 Ｌｙｓ代替 Ｈｉｓ外,其他部分均相同。该基因插入植物双元载体中,经土壤农杆菌介导导入八里庄杨［１］,经卡那霉素筛选后再经盐胁迫筛选获得一批较高耐盐性的转化植株,在附加 ０.６％ＮａＣｌ的培养基中生长良好,而对照在附加 ０．４％ ＮａＣｌ的培养基中不能存活。对转化植株进行的 ＰＣＲ检测、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,说明外源基因已整合到染色体上并且有转录。     

红豆草耐盐愈伤组织的筛选及植株再生

将红豆草种子在含１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上萌发以消除盐敏感的幼苗,把存活的幼苗下胚轴切段在含１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ、０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ及１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织,通过连续筛选得到可耐受１．８％ＮａＣｌ的愈伤组织,在有０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ和１ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ存在下该愈伤组织分化出芽,待幼,待幼苗长至３ｃｍ左右时转至含２ｍｇ／ＬＮＡＡ和或ＩＢＡ的１／２ＭＳ培养基上生根。对对照     

酿酒酵母3——磷酸甘油脱氢酶的诱导,提纯和性质

在ＹＥＰＤ培养中添加ＮａＣｌ,可以诱导酿酒酵母细胞内３－磷酸甘油脱氢酶的形成,当ＮａＣｌ浓度达５％时,酶比活从０．０５Ｕ／ｍｇ提高到０．５Ｕ／ｍｇ;若再限制培养基中葡萄糖浓度在１００ｍｇ／Ｌ以下,酶比活可达到０．８９Ｕ／ｍｇ。酶比活与培养基中的ＮａＣｌ浓度的函数关系式为：Ｓａ＝０．１２９Ｃ＾３－０．０３８Ｃ＾２＋０．０３４Ｃ＋０．０６３。粗酶液经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５凝胶过滤,Ｂｌｕｅ Ｓｅｐ     

不同培养基对杜氏藻（DunaliellaSalina）生长和无机离子含量的影响

培养在Ｊｏｈｎｓｏｎ培养液、Ｊｏｈｎｓｏｎ＋０．３％ＮａＣｌ培养液、海水和卤水中的杜氏藻,其生长速度有区别,在Ｊｏｈｎｓｏｎ＋０．３％ＮａＣｌ培养液中生长较好,Ｊｏｈｎｓｏｎ培养液和卤水次之,海水中生长较差。杜氏藻生沃的盐度范围为０～１２％,当培养基中ＮａＣｌ浓度超过１２％时,细胞数几乎不增加,甚至略有降低。在不同培养基中藻细胞Ｈ￣＋含量较稳定,而积累ｃａ￣（２＋）,在Ｊｏｈｎｓｏｎ＋０．３％ＮａＣｌ培养液中,杜氏藻细胞Ｎａ￣＋含量增加;而在含高浓度Ｎａ￣＋的海水和卤水中杜氏藻细胞中Ｎａ￣＋的含量低于培养液。     

酵母pro2基因转化紫云英的研究

用外植体－农杆菌共培养法将酵母脯氨酸合成酶基因２（ｐｒｏ２）导入豆科牧草紫云英,获得转基因植株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析检测到转化植株基因组中存在外源ＤＮＡ的同源顺序,证明酵母ｐｒｏ２基因已整合到紫云英细胞基因组中。转化植株具有强的ＮＰＴⅡ酶活性,而对照植株呈阴性反应。在含０．５％ＮａＣｌ的培养基上,紫云英植株内游离脯氨酸含量增高,一些转化植株叶片内游离脯氨酸含量显著高于对照,而且耐盐性有所     

大肠杆菌海藻糖合成酶基因的克隆和表达

利用Ｍｕ转座子细胞内克隆了大肠杆菌海藻糖合成酶 ｏｔｓＢＡ基因,克隆频率为１．４５ ｘ １０(－３)／ Ｋａｎ(ｒ)转导子。经遗传互补、酶切和部分序列分析表明ｏｔｓＢＡ基因位于克隆质粒。亚克隆 ２．８７ｋｂ ＤＮＡ片段至不同拷贝数表达质粒并分别转化大肠杆菌ｏｔｓＢＡ基因缺失株,转化株恢复 在０．５ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ培养基上生长的功能,高渗透压诱导实验表明,转化株能够合成克隆基因 产物海藻糖,但合成量不受克隆质粒拷贝数影响。海藻糖良好的抗高渗能力可能在农作物育 种方面发挥重要作用。为构建含有海藻糖合成酶基因的植物表达载体,并在农杆菌的介导下 转入植物,赋予其抗高渗、耐干旱能力奠定了重要的研究基础。     

在1／3海水培养基上筛选豆瓣菜耐盐变异体

系统地研究了豆瓣菜（ＮａｓｔｕｒｔｉｕｍｏｆｆｉｃａｉｎａｌｅＲ．Ｂｒ）茎段外植体对６－ＢＡ,ＮＡＡ和２,４－Ｄ的反应,确定了ＭＳ培养基附加６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ为豆瓣菜愈伤组织诱导,继代培养基;ＭＳ培养基附加６－ＢＡ４．０ｍｇ／Ｌ为芽再生培养基;ＭＳ基本培养基为植株的生根的扦插繁殖培养基,将３２５个豆瓣菜茎切段外植体接种到含１／３海水的愈伤组织诱导培养基上,１７块外植体     

亚麻下胚轴离体培养和转化的研究

报道了亚麻（Ｌｉｎｕｍ　ｕｓｉｔａｔｉｓｓｉｍｕｍ）的高频率植株再生和细胞转化。亚麻下胚轴切段培养在ＭＳＢ分化培养基上,诱导分化出不定芽。最佳的激素组合是ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,分化频率可达９７％。在附加ＢＡ１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ培养基上,亚麻下胚轴外植体的不定芽分化频率也可达９０％以上。用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｈａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）感染亚麻下胚轴外植体,在含卡那霉素５０ｍｇ／Ｌ的选择培养基上筛选获得卡那霉素抗性苗,并检测到ＧＵＳ基因活性表达。表明它们是转化植株,转化频率约为２％。     

大鼠前列腺甾体结合蛋白C3基因CAAT区核内结合蛋白…

为了解结合在大鼠前列腺甾体蛋白Ｃ３基因ＣＡＡＴ区的核区结合蛋白在此基因表达活跃的前列腺中和不表达的肝脏中的异同;我们用肝素琼脂糖柱层析将两种组织的核抽提液分别进行分级分离,用ＤＮａｓｅＩ足迹法和凝胶阻滞法分析表明：（１）所有ＣＡＡＴ区结合蛋白被富集在０．２－０．５ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ洗脱液中;（２）在凝胶阻滞谱上的各种蛋白组分能按迁移率的大小分布在不同浓度的ＮａＣｌ洗脱液中;（３）竞争分析表明：在     

红景天叶片诱导再生植株

红景天片接种在ＭＳ培养基上,诱导形成愈伤组织,再稳定在ＭＳ附加６－ＢＡ２ｍｇ／１＋ＩＡＡ０．２５ｍｇ／ｌ的培养基上产生大量丛生芽,丛生芽培养于Ｂ５附加ＩＡＡ０．５ｍｇ／ｌ的培养基上可导生根形成完整植株。