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相似文献
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1.
AFLP标记及在植物中的应用   总被引:9,自引:0,他引:9  
AFLP是 1 992年由荷兰Keygene公司Zabeau、Vos在PCR和RFLP的基础上发展起来的一种检测DNA多态性的新方法[1] ,并于1 993年获得欧洲专利局专利。与RFLP类似 ,AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。由于RFLP是以传统的Southern杂交为基础的 ,操作繁琐 ,对DNA多态性的检出的灵敏度不高 ,在连锁图上有很多大的空间区。随着PCR技术广泛应用 ,对分子标记技术的发展产生了巨大的推动作用。除了RFLP(限制性内切酶酶切片段长度多态性标记 …  相似文献   

2.
用聚合酶链式反应(PCR)将豆科黄芪亚族7属9种及甘草亚族1属1种植物叶绿体基因组中ndhF和psbA基因中一段约3.1kb的DNA扩增出来,并摸索出一最佳的PCR条件,使得此条带得以特异性扩增,可直接用于限制性内切酶水解。通过对此扩增片段的限制性片段长度多态性(RFLP)的初步分析,认为利用PCR扩增出的DNA进行RFLP分析来探讨植物的系统进化问题在中国现行条件下大有潜力,其方法简单易行,结果  相似文献   

3.
AFLP标记在果树遗传育种研究中的应用   总被引:8,自引:0,他引:8  
1993年 ,Zabeau等发明了一项专利技术 ,扩增片段长度多态性 (amplifiedfragmentlengthpolymorphism ,AFLP) ,该技术结合了RFLP技术和PCR技术的优点 ,以其高效性和高重复性等特点 ,被广泛应用于多种植物的遗传育种研究。1 .AFLP技术的原理和特点AFLP技术是基于对限制性片段的选择性扩增 ,基因组DNA被限制性内切酶切割后 ,将限制性片段末端连上双链接头 ,根据接头序列和相邻的限制性位点序列设计引物对限制性片段进行扩增。扩增产物经电泳检测后再比较其谱带的差异。AFLP…  相似文献   

4.
用RFLP和PCR—RFLP技术研究东北虎和华南虎线粒体DNA多态性   总被引:5,自引:0,他引:5  
吴平  黄恭情 《生物多样性》1997,5(3):173-178
采用mtDNARFLP和PCRRFLP技术研究了东北虎和华南虎的mtDNA的多态性。在mtDNARFLP研究中,分离纯化了东北虎和华南虎肝、肾和心脏组织的mtDNA,用20种识别6碱基对的限制性内切酶消化,结果只有1种限制性内切酶(XbaⅠ)检测到多态性片段,其余19种限制性内切酶消化产生的限制性格局在东北虎和华南虎完全一致。在PCRRFLP研究中,用PCR技术分别扩增了东北虎和华南虎mtDNA的控制区(controlregion),用8种识别4碱基对的限制性内切酶分别对扩增产物进行消化,结果只有1种限制性内切酶(RsaⅠ)检测到多态性片段。mtDNARFLP及PCRRFLP的结果均提示东北虎和华南虎之间的遗传距离极小。这可能与下列因素有关:两者分布区间无天然隔离屏障;具有强扩散能力;近几百年才被相互隔离。  相似文献   

5.
RAPD技术及其在微生物学方面的应用   总被引:4,自引:0,他引:4  
198 0年 ,Botsein提出DNA限制性片段长度多态性 (RFLP)可以作为遗传标记 ,从此开创了直接应用DNA多态的新阶段。 80年代后 ,DNA多聚酶链式反应 (PCR)的发展 ,使直接扩增DNA的多态性成为可能 ,并在此基础上产生了许多种新型分子标记 ,诸如扩增片段多态性 (ALFR)、串联重复序列(VNTR)、单链构型多态性 (PCR SSCP)、序列特异扩增区域 (SCAR)、随机扩增多态性DNA(RAPD)等。而RAPD是较为突出的一种。RAPD是由Williams和Welsh在 1 990年各自独立发现的一种DNA多态检…  相似文献   

6.
美洲黑杨无性系AFLP指纹分析   总被引:27,自引:0,他引:27  
1992年由Zabeau和Vos发明的扩增酶切片段长度多态性AFLP标记技术(Europeanpatent,0535858A1,19930331),是目前国际上构建DNA指纹图谱的最新方法,AFLP能检测到大量的基因位点,因而灵敏度高。选用不同的...  相似文献   

7.
植物病原真菌中DNA分子鉴定技术   总被引:7,自引:0,他引:7  
就基因组DNA中G+C含量、分子杂交、聚合酶链式反应(PCR)、限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性(RAPD),以及扩增片段长度多态性(AFLP)等分子标记技术,在植物病原真菌鉴定工作中的应用情况和发展趋势作了介绍。  相似文献   

8.
用分子生物学技术对草菇进行菌株鉴别   总被引:4,自引:0,他引:4  
陈明杰  赵绍惠 《真菌学报》1996,15(2):129-134
利用AP-PCR和RAPD技术对三个草菇菌株进行鉴别,其结果与用草菇菌株V34基因文库中的中等重复序列为探针进行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP),及对编码核糖体5.8SrRNA的DNA(rDNA)进行PCR扩增后的产物进行限制性内切酶长主多态性分析(PCR-RFLP)的结果相一致。这一结果显示出用这四种方法对草菇菌株进行鉴别具有相似的效果。同时用这四种方法构建的分子生物学标记显示出这三个菌株  相似文献   

9.
利用PCR技术分别以亲本杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb.)Hook.)、柳杉(CryptomeriafortuneiHooibrenk)和杉木×柳杉杂种的总DNA为模板,扩增了叶绿体trnLtrnF和线粒体CoxⅢ基因片段,比较了这些扩增片段的限制性内切酶AluⅠ,DdeⅠ,HinfⅠ,MseⅠ和RsaⅠ的酶切片段多态性,结果表明:F1代的叶绿体DNA为母系遗传,而线粒体DNA为父系遗传。杉木线粒体DNA父系遗传方式与杉科其他植物一致,而叶绿体DNA母系遗传则为在松柏类植物中首次发现。  相似文献   

10.
用PCR—RFLP方法研究藏族HLA0—DQA1和—DQB1基因多态性   总被引:4,自引:1,他引:3  
李霞  张咸宁 《遗传学报》1998,25(5):398-402
应用目前HLA研究领域中成熟的、有效的PCR-RFLP基因分型技术,从DNA水平对藏族健康群体进行了HLA-DQA1(49人)和-DQB1(49人)基因分型,这在国内外属首次。所采用的PCR-RFLP基因分型技术是在HLA-DQA1和-DQB1各等位基因全部序列已知的情况下,对其第2个外显子碱基序列扩增进而进行RFLP分析的方法。这种方法得到的RFLP的所有片段都是已知序列,因而精确度很高,同时为  相似文献   

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