鸭卵泡及精巢中卵泡抑素和抑制素／活化素βB亚基mRNA表达的研究

卵泡抑素是与抑制素/活化素功能密切相关的一种糖蛋白激素,采用定量竞争RT-PCR技术对鸭各级卵泡及成熟与未成熟精巢中的卵泡抑素和抑制素/活化素βB亚基的mRNA表达丰度进行了研究,发现在上述组织中均有此两基因mRNA的表达,且只在小卵泡中表达较丰富.卵泡抑素在小黄卵泡(SYF)中表达量最高,以其mRNA的平均相对丰度为1.00,则F1(最大卵泡)、F2、F3、F4、F5、F6～8,LWF(大白卵泡)、TI(未成熟精巢)和TM(成熟精巢)中卵泡抑素mRNA的平均相对含量分别为0.0ll±0.004、0.019±0.006、0.02l±0.009、0.028±0.007、0.075±0.023、0.15±0.072、0.29±0.068、0.037±0.0l1和0.012±0.004.βB亚基也在小黄卵泡中表达量最高,以其mRNA的平均相对丰度为1.00,则F1、F2、F3、F4、F5、F6～8、LWF、TI和TM中B亚基mRNA的平均相对含量分别为0.009±0.003、0.013±0.005、0.019±0.007、0.023±0.006、0.29±0.084、0.84±0.093、0.031±0.008、0.38±0.072和0.046±0.013.结果显示卵泡抑素和βB亚基mRNA的表达模式是相似的,二者在小卵泡中均出现大量表达说明活化素B(βB-βB)的生物活性可能受卵泡抑素的紧密调节,二者共同在卵泡早期发育中起重要作用.     

仙居鸡抑制素α亚基成熟区的cDNA克隆及其在卵泡中表达的研究

根据发表的鸡抑制素α亚基序列设计引物,用RT－PCR技术从仙居鸡卵泡的颗粒细胞总RNA中扩增出了抑制素α亚基成熟区序列,并进行了克隆和测序,结果显示,仙居鸡成熟α亚基是由113个氨基酸(aa)残基组成的蛋白质,具有1个糖基化位点和7个半胱氨酸残基,与发表的鸡和哺乳类相应序列对比,其核苷酸序列的同源性分别为98％和61．4％－68．7％,其预测氨基酸序列的同源性分别为97．3％和64．6％－69％,且所测鸡α亚基成熟区的糖基化位点及半胱氨酸殖基的数目和位置与发表的鸡和乳类相似,说明该亚基的序列及结构在不同物咱间具有高度保守性,提示其可能具重要的生理功能,鸡各级卵泡中α亚基mRNA表达丰度的定量分析显示,从SYF到F1中,随着卵泡的成熟α亚基的表达量降低,其在SYF和F6－8中表达量最高,在LWF中表达量很低,说明α亚基在卵泡的吸收,选择及优势化过程中起重要调节作用。     

籽鹅不同等级卵泡生殖相关激素受体基因的表达

目的：检测籽鹅不同等级卵泡不同生殖相关激素受体mRNA的表达。方法：选用1只8月龄产蛋期籽鹅,处死后分离各级别卵泡（F1、F2、F3、F4、F5、SYF、LWF）,采用实时荧光定量PCR方法检测促卵泡激素受体（FSHR）、促黄体生成素受体（LHR）、雌激素受体α（ER α）、雌激素受体β（ER β）、生长激素受体（GHR）和胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）6种生殖相关激素受体mRNA的表达量变化。结果：SYF和LWF中LHR、GHR和IFGBP-1 mRNA表达量较低,而F1-F5级卵泡中表达量较高;SYF和LWF中ER βmRNA表达量较高,而等级卵泡中表达量较低。结论：本实验研究了不同等级卵泡FSHR、LHR、ER α、ER β、GHR和IGFBP-1 mRNA的变化规律,为研究禽类产蛋机制提供基础数据。     

卵泡闭锁与其tPA,LH受体及抑制素α,βA亚基基因表达的关系

用DNA 3′-末端标记、免疫组化和原位杂交方法,通过连续切片比较研究了相同卵泡颗粒细胞抑制素亚基和LH受体(LHR)与卵细胞tPA表达和卵泡闭锁的关系.实验结果表明:(1) 卵泡闭锁伴随卵细胞tPA活性明显增加;(2) 颗粒细胞抑制素的产生调节卵细胞tPA活性的表达并与卵泡发育状态密切相关;(3) 卵泡闭锁时,颗粒细胞几乎不表达LHR和抑制素亚基.上述结果提示:卵细胞的tPA在闭锁卵泡中可能参与卵细胞的自我瓦解和清除过程;颗粒细胞表达的抑制素可能是tPA mRNA翻译的一种抑制因子,如其表达受阻,可导致卵细胞tPA蛋白活性增加引起卵泡闭锁.     

卵泡闭锁与其tPA，LH受体及抑制素 α，βA亚基基因表达的关系

用DNA 3′-末端标记、免疫组化和原位杂交方法,通过连续切片比较研究了相同卵泡颗粒细胞抑制素亚基和LH受体（LHR）与卵细胞tPA表达和卵泡闭锁的关系.实验结果表明（1） 卵泡闭锁伴随卵细胞tPA活性明显增加;（2） 颗粒细胞抑制素的产生调节卵细胞tPA活性的表达并与卵泡发育状态密切相关;（3） 卵泡闭锁时,颗粒细胞几乎不表达LHR和抑制素亚基.上述结果提示卵细胞的tPA在闭锁卵泡中可能参与卵细胞的自我瓦解和清除过程;颗粒细胞表达的抑制素可能是tPA mRNA翻译的一种抑制因子,如其表达受阻,可导致卵细胞tPA蛋白活性增加引起卵泡闭锁.     

GH受体、IGF-I型受体、FSH受体和LH受体mRNA在绍鸭各级卵泡颗粒层和膜层中的表达

采用相对定量反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,以β-actin为内标,测定绍鸭排卵前卵泡F1、F3、F5及大白卵泡(LWF)颗粒层与膜层中GH受体(GHR)、IGF-I型受体(IGF-IR)和FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)mRNA表达水平,以分析生长轴和生殖轴激素对绍鸭卵泡发育的协同调节作用。结果表明：在所测定的各级卵泡中,GHR mRNA在膜层的表达水平均显著高于颗粒层,膜层中大白卵泡表达量最高,而颗粒层中GHR mRNA水平在各级卵泡之间没有明显差异;相反,IGF-IR mRNA在同级卵泡颗粒层的表达水平显著高于膜层,颗粒层和膜层中IGF-IR mRNA表达在各级卵泡之间的差异均不显著,只是大白卵泡的膜层与其他等级卵泡的膜层相比,IGF-IR的表达量呈现较高的趋势;FSHR mRNA表达的变化趋势类似于IGE-IR,同级卵泡颗粒层中的表达量高于膜层;LMR mRNA在各级卵泡膜层中表达没有明显差异,而颗粒层中IMR mRNA随着卵泡发育成熟逐级显著增加,且F5和LWF卵泡膜层的IMR mRNA显著高于颗粒层,与GHR mRNA的表达相似。结果提示,GH和IGF-I调节卵巢功能的优势作用位点和机制不尽相同;GHR和LHR协同表达与IGF-IR和FSHR协同表达可能对卵泡发育起到精细的调节作用;而IMR在卵泡颗粒层中表达的逐级显著增加可能与卵泡等级的建立和排卵有关。     

抑制素基因的研究进展

抑制素是性腺分泌的一种糖蛋白激素,它具有抑制垂体促卵泡素合成和分泌的作用。本文介绍了抑制素α亚基基因（INHA）、抑制素βA亚基基因（INHBA）、抑制素βB亚基基因（INHBB）的克隆、结构、定位、多态性、表达、分子调节及其与繁殖性能和癌症的关系。绵羊INHA、INHBA和INHBB基因分别被定位到2q41→q43、4q26和2q31→q33。INHA、INHBA和INHBB基因对绵羊产羔数都有显著的影响。抑制素βB亚基基因突变的雌性小鼠有明显的发育和繁殖缺陷。INHA 基因与妇女卵巢早衰显著相关。 Abstract：Inhibins are gonadal glycoprotein hormones belonging to the transforming growth factor-βsuperfamily that act to suppress pituitary follicle-stimulating hormone synthesis and secretion. In this paper, we briefly introduced the cloning, structure, localization, polymorphism, expression, molecular regulation of inhibin-α(INHA), -βA (INHBA) and -βB (INHBB) subunit genes and their relationships with reproductive performance and cancer. The inhibin genes (INHA, INHBA and INHBB) had significant effect on litter size in sheep. The ovine INHA, INHBA and INHBB genes had been mapped to chromosomes 2q41→q43, 4q26 and 2q31→q33, respectively. The female mice carrying INHBB mutations suffered from distinct developmental and reproductive defects. The INHA gene was significantly associated with premature ovarian failure in women.     

抑制素亚基基因在哺乳类动物卵巢的表达与调控的研究进展

抑制素是由二硫键连接的α和β两个不同亚单位所构成的糖蛋白,它具有抑制卵泡刺激素（ＦＳＨ）的合成和分泌的作用。β亚单位借助二硫键尚可形成β亚单位二聚体－激活素,它则具有刺激ＦＳＨ分泌的作用。本文介绍了抑制素亚基ｃＤＮＡ的克隆及抑制素亚基基因在哺乳类卵巢表达与调控的研究进展,并指出在研究抑制基因表达时应予注意的问题。     

人类黄体组织抑制素与激活素构型的研究

本文观察了抑制素／激活素α、βＢ与βＢ亚基基因在人早（３天）、中（３天）及晚（１５天）期黄体组织的表达。α－ｍＲＮＡｓ在早期黄体最高;βＡ－ｍＲＮＡｓ仅在早期出现,而βＢ－ｍＲＮＡｓ从黄体早期至晚期逐步增高。提示人黄体抑制素可能为抑制素Ｂ。晚期黄体可能有激活素Ｂ的生成。     

卵泡抑素：抑制素相关肽的新成员

卵泡抑素是近年新发现的一类有广泛组织分布的抑制素相关肽,为单链糖蛋白,具有与抑制素相似的抑制分泌促滤泡激素的功能,但效力效弱。卵泡抑素的另一大功能是作为激活素的结合蛋白,通过阻断其作用而参与多种生理功能的调节,在胚胎发育、卵巢颗粒细胞分化、成骨细胞功能的调节、红细胞生成等中起重要作用。卵泡抑素的表达受促性腺激素、孕酮等因素的调节,并且可能涉及ｃＡＭＰ和蛋白激酶Ｃ信号传导途径。