碎米莎草茎总生物碱对植物和病原菌的生物活性

以水稻(Oryza sativa)等5种植物和水稻稻瘟病(Magnaporthe grisea)等6种植物病原真菌为试验对象,测定了碎米莎草(Cyperus iria)茎总生物碱对植物和病原菌的生物活性.结果表明,250～4000 μg mL-1的总生物碱对水稻种子的萌发无显著影响,对千金子(Leptochloa chinensis)幼苗的苗高有显著抑制作用.4000μmL-1的总生物碱对烟草(Nicotiana tabacum)、鳢肠(Eclipta prostrate)和车前草(Plantago asiatica)种子的萌发、烟草幼苗的苗高以及水稻、烟草和鳢肠幼苗的鲜重有显著抑制作用,相对较低浓度总生物碱对千金子种子萌发、千金子和车前草幼苗的鲜重以及5种植物幼苗的根长和苗高(烟草幼苗的苗高除外)有显著抑制作用.25～400 μg mL-1的碎米莎草茎总生物碱对小麦赤霉病菌(Fusarium gramblearum)的生长无显著影响,而对苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)的生长有显著抑制作用,100～400μg mL-1的总生物碱对稻瘟病菌、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiovum)和番茄早疫病菌(Alternaria solani)的生长有显著抑制作用,200～400 μg mL-1的总生物碱对杨树溃疡病菌(Dothiorella gregaria)的生长有显著抑制作用,400μg mL-1的总生物碱对上述病原真菌的抑菌率分别为8.20%、74.87%、40.93%、60.91%、52.70%和16.28%.     

纳米TiO_2对杉木种子萌发和幼苗生长及生理的影响

本文以杉木种子和纳米TiO_2为实验材料,研究不同浓度(50、100、500、1000 mg·L-1)纳米TiO_2溶液对杉木种子萌发、幼苗生长及生理特性的影响,探究纳米材料对林木种子萌发及幼苗生长发育的调节作用。结果显示:纳米TiO_2溶液对杉木种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数均有促进作用,促进作用随处理浓度的增加呈现先增强后减弱的趋势,且100 mg·L~(-1)溶液处理对种子发芽指标提高效果最佳,分别比对照增加66%、92%、71%和299%;杉木幼苗的鲜重和根长均在100 mg·L~(-1)时达到最大值,分别比对照显著增加35%和143%。500 mg·L~(-1)纳米TiO_2溶液处理显著提高了CAT、SOD和POD活性,分别比对照提高108%、488%、182%,但降低了MDA含量(降低82%)。研究表明,适当浓度纳米TiO_2溶液处理不但能有效促进杉木种子萌发与幼苗生长,而且能改善幼苗的生理功能,可能会增强其对逆境的适应能力。     

菊芋块茎浸提液对生菜种子萌发生长的化感作用

以新鲜菊芋块茎、烘干菊芋块茎全粉和菊粉的水浸液作为化感物质,以发芽率、芽长、根长、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、可溶性蛋白作为种子萌发和幼苗生长的指标,探讨不同菊芋块茎浸提液对生菜种子萌发生长的化感作用。结果表明:当菊粉溶液浓度为40 mg·mL~(-1)(T4)时,发芽率最高,比对照高20.1%;当干样浸提液浓度为5 mg·mL~(-1)(T1)时,发芽率比对照高9.6%;当干样浸提液浓度为40 mg·mL~(-1)(T4)时,对生菜种苗芽长促进作用最明显,比对照高9.2%,在干样浸提液浓度为5 mg·mL~(-1)(T1)时,根长最长,比对照高28.3%;当菊芋块茎鲜样浸提液浓度为20 mg·mL~(-1)(T3)时,SOD的活性达到最高,而MDA含量低于对照,说明菊芋鲜样浸提液可以有效提高生菜的抗逆性;当菊粉溶液浓度为5 mg·mL~(-1)(T1)和10 mg·mL~(-1)(T2)时,MDA含量和蛋白含量极低,显著低于对照。采用化感综合效应指数分析菊芋块茎浸提液对生菜种子萌发的影响,结果表明,块茎鲜样和干样浸提液对生菜的种子萌发具有明显促进作用,而菊粉溶液具有较强的抑制作用。在实际生产中,应根据不同的生长要求,使用不同浓度的浸提液,以达到最佳的促进效果。研究表明,菊芋全粉可以更有效地作为化感物质,促进生菜种子萌发和幼苗生长。     

聚多曲霉菌对Cd胁迫下芥菜种子萌发、生长和Cd吸收的影响

为了探明聚多曲霉菌[Aspergillus sydowii(Bain.et Sart.)Thom et Church]对芥菜[Brassica juncea(Linn.)Czern.]种子萌发、生长和Cd吸收的影响,以聚多曲霉菌菌株DJ515-2为供试菌株,对1 mmol·L~(-1)Cd胁迫下接菌组(接种浓度为1.0×108CFU·mL~(-1)的DJ515-2菌悬液)和对照组(未接种DJ515-2菌悬液)芥菜的种子萌发状况进行了比较,并采用盆栽法对0、28、56和112 mg·kg~(-1)Cd胁迫下接菌组和对照组芥菜单株地上部和地下部的鲜质量和干质量、地上部和地下部的Cd含量、单株Cd吸收量及根际土壤有效态Cd含量进行了比较。结果表明:与对照组相比,接菌组的种子发芽率、根长、茎长和种子活力指数分别升高了20.0%、52.4%、56.3%和83.7%。在不同质量浓度Cd胁迫下,接菌组的单株地上部和地下部的鲜质量和干质量、地上部和地下部的Cd含量、单株Cd吸收量及根际土壤有效态Cd含量均高于对照组;并且,除地上部Cd含量外,28 mg·kg~(-1)Cd胁迫下接菌组的其他指标均显著(P0.05)高于对照组。随着Cd质量浓度的提高,对照组和接菌组的单株地上部鲜质量及单株地上部和地下部的干质量总体上逐渐降低,地上部和地下部的Cd含量、单株Cd吸收量及根际土壤有效态Cd含量总体上逐渐升高。研究结果显示:聚多曲霉菌菌株DJ515-2能够促进芥菜种子萌发、生长和Cd吸收,并能提高土壤中Cd的生物有效性,对芥菜修复低浓度(28 mg·kg~(-1))Cd污染土壤具有明显的促进作用。     

Flor-essence对小麦种子萌发和幼苗生长的影响

研究不同浓度Flor-essence对小麦种子萌发及幼苗生长的影响,以开拓其在植物生长调节剂领域的新应用。通过室内水培试验,分别设定50、100、150、200和250 mg/L 5组不同浓度的Flor-essence溶液处理,测定小麦种子发芽和植株生长的相关指标,同时选取清水(0 mg/L Flor-essence)和0.015 mg/L的油菜素内酯(BR)作对照。结果显示,与对照相比,不同浓度Floressence浸种均促进了小麦种子的萌发和生长,小麦的发芽势、发芽率、发芽指数、根长、株高、鲜重、干重、叶绿素含量和根冠比均有不同程度提高。不同浓度处理中,以200和250 mg/L处理的幼苗发芽情况最好;以150 mg/L处理的株高最高;以200 mg/L处理的根长最长、根冠比最大;以250 mg/L处理的鲜重、干重和叶绿素含量最高。利用Flor-essence浸种可促进小麦种子萌发和幼苗生长,且浓度为150-250 mg/L Flor-essence更能够在不同程度上促进小麦苗期的生长。     

盐分和母树大小对黑松海防林种子萌发和幼苗早期生长的影响

研究了盐度(0、0.02、0.04和0.08 mol·L~(-1))和黑松母树大小对山东半岛北部海防林的主要造林树种黑松种子萌发和幼苗早期生长的影响.结果表明:盐度对黑松种子的发芽率有显著影响,随着NaCl浓度的升高,种子萌发率逐渐下降;盐分抑制黑松幼苗的早期生长,随着盐浓度升高,黑松幼苗的根长、芽长及根干质量均显著降低;母树大小在总体上对种子萌发率没有影响,但显著影响黑松幼苗的根长、芽长和芽干质量;盐度和母树大小的相互作用显著影响黑松幼苗的根长和芽长.而对黑松种子萌发率、幼苗根干质量和芽干质量的影响不显著.

Abstract：

Pinus thunbergii is the main forestation tree species of coastal protection forests in northern Shandong Peninsula of China. Its seed germination and seedling early growth were stud-ied under the conditions of different water salinity (0, 0. 02, 0. 04, and 0. 08 mol·L~(-1)) and mother tree sizes. With increasing sea water salinity, the seed germination rate, root-and plu-mule length, and the dry weights of root and plumule decreased significantly. Mother tree size had little effects on the seed germination rate, but affected the root-and plumule length and the plumule dry weight significantly. The interaction of sea water salinity and mother tree size affect-ed the root-and plumule length significantly, but less affected the germination rate and the dry weights of root and plumule.     

外来入侵植物牛膝菊和野茼蒿水浸提液化感作用的生物测定

采用培养皿滤纸法,以小麦(Triticum aestivum L. )和玉米(Zea mays L. )为实验材料,以种子的发芽率、发芽指数、活力指数以及幼苗的株高和根长为测定指标,结合化感效应指数的综合效应值,对外来入侵植物野茼蒿[Crassocephalum crepidioides (Benth. ) S. Moore]和牛膝菊(Galinsoga parviflora Cav. )茎叶水浸提液的化感活性分别进行了测定.结果表明,随野茼蒿和牛膝菊水浸提液质量浓度(0.01～0.10 g·mL-1)的提高,小麦和玉米种子的发芽率、发芽指数、活力指数以及幼苗的株高和根长总体上逐渐减小;与对照组相比,0.01 g·mL-1牛膝菊水浸提液对小麦的幼苗株高以及玉米的种子发芽率和幼苗株高具有一定的促进作用,但对小麦和玉米的幼苗根长有显著抑制作用;而0.01 g·mL-1野茼蒿水浸提液仅对小麦种子的发芽率略有促进作用.0.04～0.10 g·mL-1野茼蒿和牛膝菊水浸提液对小麦和玉米种子萌发及幼苗生长的各项指标基本上均有显著的抑制作用;野茼蒿和牛膝菊水浸提液对玉米种子萌发和幼苗生长的抑制作用大于小麦.0.01～0.10 g·mL-1野茼蒿和牛膝菊水浸提液对小麦和玉米种子萌发和幼苗生长的化感效应指数的综合效应值均小于0,表现为抑制作用,并随2种植物水浸提液质量浓度的提高综合效应值逐渐降低,且前者的化感效应指数的综合效应值大于后者.研究结果显示,野茼蒿和牛膝菊水浸提液对小麦和玉米的化感活性均表现为抑制作用,且化感作用的强度与水浸提液的质量浓度相关;野茼蒿水浸提液的化感作用效应大于牛膝菊.     

龙柏枝叶水浸提液及其萃取物除草活性的生物测定

采用培养皿滤纸法,以油菜(Brassica campestris L. )、反枝苋(Amaranthus retroflexus L. )、生菜(Lactuca sativa L. var. ramosa Hort. )、番茄(Lycopersicon esculentum Miller)和小麦(Triticum aestivum L. )为供试植物,对龙柏(Sabina chinensis 'Kaizuca')枝叶水浸提液的除草活性进行了生物测定,并以番茄为测定对象,对水浸提液的不同溶剂萃取物的除草活性也进行了生物测定;另外,采用薄层层析法对乙酸乙酯萃取物的除草活性成分进行了初步定性分析.结果显示,在0.05～0.2 g·mL-1质量浓度范围内,龙柏枝叶水浸提液对5种植物的种子萌发及幼苗根长和茎高均有一定的抑制作用,且随质量浓度的提高,抑制作用逐渐增强,其中0.2 g·mL-1水浸提液对5种植物的种子萌发及幼苗根长和茎高的抑制率均在80.00%以上, 对番茄种子萌发及幼苗根长和茎高的抑制率最高, 均达到100.00%.在龙柏枝叶水浸提液的石油醚、乙酸乙酯和水萃取物中,0.01、0.02和0.04 g·mL-1石油醚或乙酸乙酯萃取物以及0.02和0.04 g·mL-1水萃取物对番茄种子萌发及幼苗根长和茎高均有一定的抑制作用,且随质量浓度的降低,抑制率逐渐降低;其中,乙酸乙酯萃取物的抑制作用最强,水萃取物的抑制作用最低.薄层层析显色结果表明,龙柏枝叶水浸提液乙酸乙酯萃取物的主要除草活性成分为酚类成分.     

ZT和2iP对3个南方高丛蓝浆果优选系丛生枝增殖及生长的影响

研究了不同质量浓度ZT和2iP对南方高丛蓝浆果(Vaccinium corymbosum hybrids)优选系A47、A119和A167丛生枝的增殖倍数、质量、含水量和长度的影响.结果表明,在0.5～3.0 mg·L~(-1)质量浓度范围内,随ZT质量浓度提高,3个优选系丛生枝的总增殖倍数、有效增殖倍数、鲜质量、干质量、含水量及总长度均呈增加趋势,而平均长度则呈下降趋势.在2.5～15.0 mg·L~(-1)质量浓度范围内,随2iP质量浓度提高,3个优选系丛生枝的总增殖倍数和含水量先增加后下降,在2iP质量浓度为5.0～10.0 mg·L~(-1)时达到峰值;有效增殖倍数、总长度和平均长度一直呈下降趋势;鲜质量和干质量无明显的变化规律.在改良WPM培养基中添加2.0～3.0 mg·L~(-1) ZT或5.0～10.0 mg·L~(-1) 2iP可使3个南方高丛蓝浆果优选系丛生枝有较高的增殖倍数,而添加0.5～1.0 mg·L~(-1) ZT或2.5 mg·L~(-1) 2iP可使丛生枝生长较好.此外,优选系A47和A167丛生枝的增殖倍数显著高于优选系A119.     

干旱胁迫下外源钙对石灰岩地区复羽叶栾树种子萌发的影响

以石灰岩生态恢复优选树种复羽叶栾树种子为试材,采用聚乙二醇(PEG6000)设置0％(CK)、5％、15％、25％、30％模拟石灰岩山区不同干旱环境,以CaCl2设置0(CK)、15、20、25、30 mmol·L-1为外源钙离子梯度,模拟石灰岩地区的土壤高钙环境,研究不同浓度CaCl2、PEG及二者交互作用对种子萌发特征的影响.结果表明:单纯CaCl2作用下,中低浓度的外源钙对复羽叶栾树种子萌发参数无显著影响,而高浓度的外源钙对种子萌发具有抑制作用,中低浓度CaCl2可以增加萌发后幼苗的鲜质量.PEG浓度从0％增至25％,各处理组的种子发芽率、发芽势、发芽指数及活力指数均与对照呈显著递减趋势,幼苗鲜质量明显减小.对各干旱处理组施加一定浓度的外源钙后,中低浓度的CaCl2可提高种子的萌发特性,而当CaCl2浓度达到30 mmol·L-1时,种子难以萌发.PEG浓度达到30％时,种子无萌发.施加一定的外源钙可以提高PEG胁迫下幼苗的鲜质量,使幼苗更加适应干旱缺水的环境.     

石菖蒲根茎挥发油对稗、鳢肠和水稻的萌发与生长的影响

在实验室和温室条件下,用从石菖蒲根茎中提取的挥发油经减压蒸馏获得的组分四,对稗草、鳢肠和水稻的萌发与生长进行了生物学效应测试。结果表明,在低浓度时促进供试植物的萌发和生长,而在高浓度时则抑制萌发和生长。实验室培养皿条件下,50～400mg／L浓度抑制作用产生并逐渐增加,400mg／L以上达到90％或更高。但是,温室盆钵条件下,3000mg／L时才出现抑制作用,在1000mg／L以下均表现促进作用。     

不同前处理条件对薄荷种子萌发的影响

研究了不同质量浓度(10～250 mg·L~(-1))赤霉素(GA_3)以及清水浸种不同时间(6～36 h)、层积不同时间(5～20 d)和超声波处理不同时间(5～25 min)对薄荷(Mentha haplocalyx Briq. )种子萌发的影响. 结果表明, 用100～200 mg·L~(-1) GA_3处理6 h, 薄荷种子的发芽启动时间缩短且发芽率和发芽势均显著高于对照, 其中, 用150 mg·L~(-1)GA_3浸种,薄荷种子的发芽率最高(57.3%).用清水浸种6～36 h后,薄荷种子的发芽启动时间和发芽持续时间与对照无显著差异,但浸种12 h的薄荷种子发芽率极显著高于对照.于10 ℃层积5～15 d后,薄荷种子的发芽率和发芽势极显著高于对照,发芽启动时间也与对照差异显著,其中层积5～10 d的种子发芽率较高,达47.8%～52.4%.用功率50 W、频率40 kHz超声波处理5～20 min后,薄荷种子发芽率较对照有极显著提高,其中用超声波处理10 min的薄荷种子发芽率最高,达到68.3%.研究结果显示,使用功率50 W、频率40 kHz的超声波处理10 min是打破薄荷种子休眠的最佳方法,可显著提高薄荷种子的发芽率.     

多裂骆驼蓬中生物碱类物质对小麦种子萌发和幼苗生长的影响

室内培养和盆栽试验结果表明,多裂骆驼蓬生物碱提取液浸种的小麦萌发种子呼吸速率、淀粉酶和蛋白酶活性受抑,种子萌发率下降并随处理浓度提高而降低。幼苗根系活性和叶绿素含量提高,叶片硝酸还原酶（NR）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性增强,过氧化氢酶（CAT）活性下降;幼苗根体积,株高、根系和地上部干重增加。多裂骆驼蓬生物碱提取液浸种对小麦种子萌发和幼苗生长作用的大小顺序为：总生物碱〉水溶性生物碱〉脂溶性生物碱。     

己二酸二异丁酯对辣椒种子萌发及枯萎菌的化感效应

采用模拟的方式,利用生物测定和室内培养的方法,研究了不同浓度的己二酸二异丁酯对辣椒种子萌发、幼苗生长及辣椒枯萎菌的化感效应.结果表明:己二酸二异丁酯对辣椒种子萌发和幼苗生长具有低浓度促进、高浓度抑制的化感效应;己二酸二异丁酯对辣椒和茄子种子的化感效应存在较大差异,在低浓度时对辣椒种子萌发和幼苗生长的促进作用强于茄子种子,而高浓度时对辣椒种子萌发和幼苗生长的抑制强度弱于茄子种子;各浓度己二酸二异丁酯对辣椒枯萎菌菌丝生长有极显著的抑制作用,且作用强度随着浓度增加而增强,当浓度为1 mnol·L~(-1)时抑制作用最强,抑制率为10.75%;在田间抗病性调查期间内各浓度处理均提高了辣椒幼苗的抗病性,其中以1 mmol·L~(-1)处理抗病性最好,病情指数比对照降低了49.88%.

Abstract：

By the methods of laboratory incubation and bioassay, a simulation test was conducted to study the allelopathic effects of different concentration diisobutyl adipate on pepper seed germi-nation and its seedling growth and Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum. For the pepper seed germination and seedling growth, diisobutyl adipate exhibited allelopathic promotion at low con-centration, but allelopathic inhibition at high concentration. There existed greater differences in the allelopathic effects of diisobutyl adipate on the seed germination and seedling growth of pepper and eggplant. The promotion effects of low concentration diisobutyl adipate on pepper were stron-ger than those on eggplant, while the inhibition effects of high concentration diisobutyl adipate on pepper were weaker than those on eggplant. All test concentration diisobutyl adipate had signifi-cant inhibition effects on the mycelium growth of Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum, and the effects increased with increasing diisobutyl adipate concentration, being the strongest (an inhibi-tory rate of 10. 75%) at 1 mnol·L~(-1). Field text indicated that diisobutyl adipate at all test con-centrations enhanced the disease resistance of pepper seedlings. The best effect was observed at 1 mmol·L~(-1) of diisobutyl adipate, with the disease index decreased by 49.88%, compared to the control.     

濒危中药材太白米组织培养及总黄酮含量测定

以太白米(Notholirion bulbuliferum)地下小鳞茎为外植体,通过在MS基本培养基添加不同浓度2,4-D、KT、TDZ和NAA,研究不同植物生长调节剂对太白米愈伤组织诱导的影响.结果显示,4种植物生长调节剂在不同水平上对愈伤组织诱导有显著作用(2,4-D、TDZ,P<0.01;NAA、KT,P<0.05),诱导愈伤组织的最佳激素组合是0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+0.5 mg·L~(-1) NAA+0.2 mg·L~(-1) KT+0.1 mg·L~(-1) TDZ,愈伤组织在该培养基上继代培养有不定芽分化,如用相同浓度ZT代替KT则分化的不定芽增多.HPLC分析显示野生小鳞茎、愈伤组织和不定芽中总黄酮含量无显著差异,分别为干重的13.3%、11.4%和11.9%.     

外源24-表油菜素内酯对盐胁迫下茄子种子萌发和幼苗生理特性的影响

研究了150mmol·L^-1NaCI胁迫下,外源24-表油菜素内酯（EBR）对茄子种子萌发、幼苗生长和生理特性的影响。结果表明,0．05mg·L^-1外源EBR显著缓解150mmol·L^-1NaCI胁迫伤害,使茄子种子发芽率提高了8．23％,发芽势提高15．91％,发芽指数提高了17．23％,活力指数提高了44．29％;幼苗株高、根长和植株鲜重分别提高了56．67％、23．83％和56．68％;抗氧化酶（SOD、POD、CAT和APX）活性分别增加了13．75％、24．00％、28．64％和21．46％,脯氨酸和可溶性糖含量分别提高30．96％和23．66％;MDA含量、Ｏ产生速率分别降低了29．58％和14．80％。表明0．05mg·L^-1外源EBR能显著促进盐胁迫下茄子种子萌发和幼苗生长,明显缓解叶片氧化损伤,增强茄子的耐盐能力。     

干旱胁迫下华北驼绒藜种子大小及苞片对萌发和幼苗生长的影响

干旱是影响荒漠区植物种子萌发和幼苗生长的关键因素。以多年生强旱生半灌木华北驼绒藜为对象,研究了不同干旱程度(0、100、200、300和400 g·L^-1 PEG6000)下,种子大小及苞片有无对种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明: 干旱胁迫显著抑制了种子萌发和幼苗地上部的生长。100和200 g·L^-1 PEG6000处理显著增加了幼苗根长,而300和400 g·L^-1 PEG6000处理显著降低了幼苗根长。与无苞片相比,有苞片使种子的发芽率显著降低12%,发芽指数显著降低50.5%,幼苗的地上部长度显著增加20.8%,幼苗根长显著增加6.3%。种子大小对种子发芽指数无显著影响,但与小种子相比,大种子发芽率显著提高3%,幼苗的地上部长度显著增加20.5%,幼苗根长显著增加33.0%。在干旱条件下,苞片能延缓种子的萌发速度,种子大小能影响后代的存活几率,二者共同影响华北驼绒藜对极端干旱环境的适应性。     

Effect of kinetin concentration and methods of application on seed germination, yield components, yield and fiber properties of the Egyptian cotton (Gossypium barbadense)

Two field experiments in 1993 and 1994 as well as a laboratory germination experiment were conducted on the Egyptian cotton cultivar Giza 75 (Gossypium barbadense) to determine the effect of six concentrations of kinetin (6-furfurylaminopurine) ranging from 0 to 10.0 mg l(-1) and three different methods of application: (A) seeds were soaked for 24 h before germination (laboratory experiment) or sowing (field experiment) in solutions of different kinetin concentration, (B) cotton plants were sprayed twice with different kinetin concentrations at 60 and 75 days after sowing (DAS) during the square initiation and the beginning of bolling stages, at volume solution of 480 l ha(-1). (C) Seeds were soaked in kinetin solutions before sowing as method A. In addition cotton plants were sprayed twice as method B with the same kinetin concentrations. Kinetin application improved seed viability and seedling vigour as shown by lengths of the hypocotyl, radicle and the entire seedling, as well as seedling fresh weight. Moreover, significant increases were recorded in the number of open bolls/plant, boll weight, lint and seed indices, seed cotton yield/plant, and seed cotton and lint yields/plot. The highest means were obtained at 5 mg kinetin l(-1) concentration and under method C of application. Treatments generally, had no significant effects on lint percentage, yield earliness and fiber properties. These results show that, the use of kinetin at 5 mg l(-1) for pre-soaking seeds before planting and spraying cotton plants at 60 and 75 DAS with the same concentration could improve cotton germination, seed cotton and lint yields.