二斑叶螨对七种杀螨剂的抗药性测定及其机理研究

室内测定了相对敏感种群(S)和抗性种群(R)对常用7种杀螨剂的敏感性,并测定了羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和乙酰胆碱酯酶3种酶的比活力。结果表明:二斑叶螨Tetranychus urticae Koch R种群已对甲氰菊酯和哒螨灵产生了抗性,抗性倍数分别为5.45和105.47。其中,甲氰菊酯对雌成螨的毒力最低(>3000mg/L),已远远超过田间推荐剂量,不宜继续使用。酶活测定结果表明:谷胱甘肽S-转移酶解毒活性的提高是二斑叶螨对甲氰菊酯产生抗性的原因之一;二斑叶螨对哒螨灵抗性的增强可能与羧酸酯酶有关。     

桔全爪螨的抗药性选育及其解毒酶活力变化

在室内模拟田间药剂的选择压力,用齐墩螨素和甲氰菊酯对桔全爪螨Panonychus citri 逐代处理,以选育其抗药性种群。选育至12代,对齐墩螨素抗性增长到7.30倍,对甲氰菊酯抗性增长到17.11倍。增效剂和离体酶活性的测定结果表明,抗性种群的乙酰胆碱酯酶和多功能氧化酶的活性都提高了;推测羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶、多功能氧化酶和谷胱甘肽-S-转移酶比活力的增加是桔全爪螨对甲氰菊酯产生抗性的主要原因。     

朱砂叶螨抗药性监测

本文采用药膜法建立了朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus（Boisduval）对5种杀螨剂的敏感基线,并对6个不同地理种群的朱砂叶螨进行了抗药性监测,结果表明：5种药剂杀螨活性由高到低分别为阿维菌素〉丁氟螨酯〉氧化乐果〉炔螨特〉甲氰菊酯,其对朱砂叶螨雌成螨的LC50值分别为0.08、2.19、67.89、201.19和605.27mg/L;朱砂叶螨各地理种群已对甲氰菊酯和炔螨特产生了低、中水平的抗性,其抗性倍数分别介于2.93～16.22与4.85～14.35之间,其中云南种群对这2种杀螨剂抗性最高,对氧化乐果与丁氟螨酯处于敏感性降低阶段,其抗性倍数分别介于2.35～4.26与1.56～2.11之间,对阿维菌素还未产生明显抗性;对阿维菌素和甲氰菊酯的增效剂生物测定结果表明,三类解毒酶系（多功能氧化酶、谷胱甘肽S-转移酶和酯酶）都不同程度地参与了朱砂叶螨抗药性的形成。     

土耳其斯坦叶螨多重抗性品系选育及解毒酶活性的变化

为探索土耳其斯坦叶螨的多重抗药性及其生化机理,在室内对敏感系(SS)土耳其斯坦叶螨分别用螺螨酯、甲氰菊酯和阿维菌素的混剂进行处理,选育出多重抗性品系(Mp-R).结果表明: 选育至15代,土耳其斯坦叶螨的抗性指数达35.74倍.对不同品系的解毒酶活性分析显示,Mp-R品系相对SS品系的羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)的比活力分别是SS品系的1.21、1.53、9.18倍.说明CarE、GSTs、MFO的活性升高可促进土耳其斯坦叶螨对3种杀虫剂多重抗性的形成;MFO的活性升高可能是土耳其斯坦叶螨对3种杀虫剂产生多重抗性的主要原因.测定Mp-R品系和单抗品系(Ip-R)的农药感性和解毒酶活力变化发现,3种杀虫剂的混合使用可能会延缓土耳其斯坦叶螨对甲氰菊酯的抗性形成,加快对阿维菌素的抗性形成.     

二斑叶螨对螺螨酯的抗性选育及其解毒酶活性测定

用螺螨酯对二斑叶螨Tetranychus urticae Koch进行35代抗性选育,抗性指数达到8.34,并在选育过程中,对二斑叶螨解毒酶的活性进行测定。结果表明,随着选育代数的增加,抗性增强,细胞色素P450活性亦显著提高,而羧酸酯酶、谷胱甘肽转移酶活性较敏感品系差异不显著。说明二斑叶螨对螺螨酯抗药性的增强与其体内细胞色素P450活性的增强有关。     

柑橘全爪螨两个田间种群抗性监测及羧酸酯酶生化特性研究

采用叶碟浸渍法测定了重庆北碚和万州地区柑橘全爪螨Panonychus citri(McGregor)田间种群对阿维菌素、毒死蜱、甲氰菊酯和哒螨灵的抗性水平。结果表明,同室内敏感品系相比,北碚种群对毒死蜱、甲氰菊酯和哒螨灵的相对抗性水平分别达到3倍、3倍和22倍;万州种群对阿维菌素、毒死蜱、甲氰菊酯和哒螨灵的相对抗性水平分别达到2倍、35倍、10倍和2倍。柑橘全爪螨2个地理种群的羧酸酯酶CarE的生化特性研究发现,CarE酶活的增高和毒死蜱的抗性存在一定的相关性。毒死蜱对不同地理种群柑橘全爪螨CarE的抑制效果不同,对抗性倍数较高的万州种群抑制效果最差。     

朱砂叶螨对三种杀螨剂的抗性选育与抗性风险评估

为评价朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus对3种杀螨剂的抗性风险,在实验室抗性品系选育基础上,应用数量遗传学中的域性状分析法,研究了朱砂叶螨北碚种群对甲氰菊酯、阿维菌素和哒螨灵3种杀螨剂的抗性现实遗传力,并对3种药剂在不同杀死率下抗性发展的速率进行了预测。结果表明：分别单一连续汰选16代后,朱砂叶螨对甲氰菊酯、阿维菌素的抗性倍数分别达26.54和4.51倍,对哒螨灵表现为敏感性降低（抗性倍数为1.16倍）;朱砂叶螨对甲氰菊酯、阿维菌素和哒螨灵的抗性现实遗传力分别为0.2472,0.1519和0.0160。在室内选择条件下,杀死率为50%～90%时,要获得10倍抗性,甲氰菊酯仅需要13～6代,阿维菌素需要约21～10代;哒螨灵需要约197～89代;在田间选择,三种药剂都将需要更长的时间。抗性筛选16代结果表明,抗性风险较高的是菊酯类的甲氰菊酯,其次是生物源农药阿维菌素,杂环类的哒螨灵抗性风险较小。试验结果可为朱砂叶螨抗性治理提供参考。     

二斑叶螨对甲氰菊酯的抗性选育及解毒酶活力变化

为了明确二斑叶螨Tetranychus urticae Koch对甲氰菊酯产生抗性的机理,在室内模拟田间药剂的选择压力, 用甲氰菊酯对二斑叶螨敏感品系（S）进行逐代汰选,选育至38代时, 获得了抗性倍数( resistance ratio, RR)为247.35的抗甲氰菊酯品系（Fe-R）。对S和Fe-R解毒酶活性的分析表明,Fe-R₃₈体内羧酸酯酶（carboxylesterase, CarE）、酸性磷酸酯酶(acid phosphatase, ACP)、 碱性磷酸酯酶(alkaline phosphatase, ALP)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione s-transferase, GSTs)和多功能氧化酶(mixed function oxidase, MFO)较S体内相应酶的活力显著升高（P< 0.05）,其相对比值（R/S）分别为1.822,13.941,3.789,4.262和17.386。此外,筛选至第9,19,25,32代时,除Fe-R₂₅和Fe-R₃₂的MFO活性与S相比有显著性差异（P< 0.05）外,其余解毒酶（CarE,ACP,ALP,GSTs）的活性与S相比均无显著性差异(P>0.05)。筛选至第38代时, 5种解毒酶的活力与S相比均差异显著(P<0.05)。结果说明二斑叶螨Fe-R随着筛选代数的增加（第25代后）,MFO活性的上升可能是二斑叶螨对甲氰菊酯产生抗性的主要原因。     

斜纹夜蛾对氯氟氰菊酯不同抗性水平与解毒代谢酶的关系

为探讨斜纹夜蛾Spodoptera litura (Fabricius)对氯氟氰菊酯抗性水平与解毒代谢酶之间的关系, 以泰安郊区对氯氟氰菊酯抗性为543.7倍的斜纹夜蛾田间种群为材料, 研究了药剂汰选与否的抗性动态及不同抗性水平的解毒代谢酶活性变化。结果表明: 室内继代饲养至第30代, 不接触任何药剂的抗性下降至102.3倍, 用氯氟氰菊酯汰选28代后, 抗性上升到3 049.3倍, 而在药剂汰选至第14代, 抗性已至2 593.8倍时, 停止用氯氟氰菊酯汰选, 到第30代的抗性又降至786.3倍。表明斜纹夜蛾抗氯氟氰菊酯田间种群, 在无药剂选择压力时抗性水平会显著下降, 继续给予药剂汰选会使抗性水平显著上升。检测斜纹夜蛾田间种群5龄幼虫中肠酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性, 发现与敏感种群有显著性差异, 而多功能氧化酶O-脱甲基活性与敏感种群的差异不明显; 给予氯氟氰菊酯药剂汰选, 酯酶、谷胱甘肽S 转移酶和多功能氧化酶O-脱甲基3种酶的活性均呈显著增加趋势; 停止用氯氟氰菊酯汰选后, 3种酶的活性又呈显著下降趋势; 不接触任何药剂, 随着饲养世代数的增加, 其酯酶和谷胱甘肽S-转移酶的活性也呈下降趋势。结果提示斜纹夜蛾幼虫酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和多功能氧化酶O-脱甲基活性的提高是斜纹夜蛾对氯氟氰菊酯抗性上升的重要原因。     

我国棉花主产区棉蚜对吡虫啉的抗性监测及抗性机理

【目的】由于生长周期短、繁殖率高,棉蚜Aphis gossypii容易对杀虫剂产生抗药性。本研究旨在明确我国棉花主产区棉蚜对吡虫啉的抗性水平及抗性机理。【方法】采用浸叶法测定了北京海淀,河北廊坊和邯郸,山东德州,河南许昌,以及新疆奎屯和阿克苏地区棉蚜对吡虫啉的抗性水平;测定了不同种群棉蚜3种解毒酶（多功能氧化酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶）及乙酰胆碱酯酶的活性;并对靶标基因烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）β1亚基基因进行了突变检测。【结果】北京海淀、河南许昌和河北邯郸的棉蚜对吡虫啉敏感;河北廊坊、新疆阿克苏、山东德州及新疆奎屯地区的棉蚜对吡虫啉的抗性倍数(resistance ratio, RR)分别为22.6, 26.3,53.5和61.1倍,为中等水平抗性。酶活力对比研究发现,阿克苏和奎屯地区的棉蚜多功能氧化酶的比活力分别是敏感种群(北京种群)的1.7和1.8倍,羧酸酯酶的比活力分别是敏感种群的1.6和1.7倍,谷胱甘肽S-转移酶的比活力均是敏感种群的1.5倍,但是乙酰胆碱酯酶比活力在棉蚜种群间差异不显著。靶标基因突变检测表明,河北廊坊、新疆阿克苏、山东德州及新疆奎屯棉蚜种群nAChR β1亚基均存在与吡虫啉抗性相关的精氨酸到苏氨酸（R81T）突变。【结论】结果提示,多功能氧化酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活力升高以及nAChR β1亚基R81T突变与棉蚜对吡虫啉的抗性形成相关。     

朱砂叶螨不同抗性品系酯酶同工酶研究

在室内模拟田间药剂的选择压力,用3种不同药剂及其组合(轮用和混用)对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus 进行抗药性选育.经过40余代的筛选,朱砂叶螨对甲氰菊酯、阿维菌素和哒螨·阿维混剂分别产生了68.5、8.7和6.7倍的抗性;甲氰菊酯和阿维菌素混用和轮用分别对甲氰菊酯产生了5.6倍和28.7倍抗性.朱砂叶螨各品系酯酶同工酶电泳结果和同工酶谱谱带密度扫描表明,与敏感品系相比,各抗性筛选品系的酯酶活性均有不同程度增加;阿维菌素抗性品系活性最强,酯酶带迁移距离明显远于其他抗性品系,表明该品系酯酶体系中存在变构酯酶.     

Multiple resistance and biochemical mechanisms of pyridaben resistance in Tetranychus urticae (Acari: Tetranychidae)

A field colony of Tetranychus urticae (Koch) (Acari: Tetranychidae) resistant to pyridaben was selected with pyridaben successively for 20 generations to produce the PR-20 strain. Resistance and multiple resistance levels of the PR-20 strain to 15 acaricides were determined using a spray bioassay. The PR-20 strain was extremely resistant to pyridaben (resistance ratio [RR] = 240]. The strain exhibited extremely strong resistance to fenpyroximate (RR=373) and acrinathrin (RR=329) and strong resistance to benzoximate (RR=84). An RR = 10-40 was observed with abamectin, fenazaquin, fenbutatin oxide, fenpropathrin, and tebufenpyrad. The PR-20 strain showed low levels of resistance (RR <10) to azocyclotin, bromopropylate, chlorfenapyr, dicofol, milbemectin, and propargite. Synergist experiments with different metabolic inhibitors revealed that piperonyl butoxide (PBO), a mixed function oxidase (MFO) inhibitor, had the greatest effect on pyridaben resistance. PBO significantly caused pyridaben resistance in the PR-20 strain to drop to the full susceptibility level of the susceptible (S) strain. However, there was no significant difference in MFO activities measured using a model substrate between the S and PR-20 strains. These results suggest that use of certain acaricides with little multiple resistance or PBO will be useful for the management of pyridaben resistance in the field.     

ESTMATION OF REALIZED HERITABILITY OF RESISTANCE TO FENPROPATHRIN, ABAMECTIN, PYRIDABEN AND THEIR MIXTURES IN ACARICIDE-SELECTED STRAINS OF TETRANYCHUS CINNABARINUS (BOIDUVAL)

Abstract Threshold trait analysis was used to estimate realized heritability (h²) of resistance to five acaricides (three single acaricide and two mixtures) and resistance risk in Tetranychus cinnabarinus (Boiduval). Tetranychus cinnabarinus collected from the field of Beibei, Chongqing reared more than 60 generations under pesticide free conditions and considered susceptible. Successively selected for about 30 generations, the strain had a 65.55-, 5.82-, 1.23-, 5.20- and 1.42-fold increase in resistance to fenpropathrin, abamectin, pyridaben, pyridaben-abamectin (pyridaben: abamectin = 7.4:0.1, m/m) and fenpropathrin-abamectin (fenpropathrin: abamectin = 8.9:0.1, m/m), respectively. The realized heritability of resistance to fenpropathrin, abamectin, pyridaben, pyridaben-abamectin (pyridaben: abamectin = 7.4:0.1, m/m) and fenpropathrin-abamectin (fenpropathrin: abamectin = 8.9:0.1, m/m) is 0.2167, 0.0967, 0.0130, 0.0800 and 0.0172, respectively. Under the selected condition, a 10-fold increase in resistance would be expected 15 generations for fenpropathrin, 34 generations for abamectin, 333 generations for pyridaben, 42 generations for pyridaben-abamectin (pyridaben: abamectin = 7.4:0.1, m/m) and 200 generations for fenpropathrin-abametcin (fenpropathrin: abamectin = 8.9:0.1, m/m). The highest resistance risk of the five acaricides in Tetranychus cinnabarinus was fenpropathrin, then abamection, pyridaben-abamectin (pyridaben: abamectin = 7.4: 0.1, m/m), fenpropathrin- abamectin (fenpropathrin: abamectin = 8.9:0.1, m/m) and that to pyridaben was the lowest. The mixture of pyridaben and abamectin is not useful in delaying development of resistance in the pest to the two single acaricide while the mixture of fenpropathrin and abamectin could do it.     

柑橘全爪螨田间种群敏感性测定及三种主要解毒酶活性比较

为明确重庆地区柑橘全爪螨Panonychus citri(McGregor)对常用杀螨剂的抗性水平,本研究采用阿维菌素、哒螨灵、三唑锡、螺螨酯4种不同类型杀螨剂对柑橘全爪螨重庆北碚种群、璧山种群、武隆种群和忠县种群进行了田间敏感性测定。结果表明,柑橘全爪螨4个种群对三唑锡表现最不敏感,致死中浓度LC50在209.9～370.9mg/L之间。璧山种群对阿维菌素敏感性最高,武隆种群和忠县种群对阿维菌素的相对抗性分别达12倍和11倍。哒螨灵监测结果表明,北碚种群的抗性水平显著高于其他3个种群。而北碚种群对螺螨酯的LC50仅为1.2mg/L,显著低于其他种群。柑橘全爪螨4个种群解毒酶活性研究发现,解毒酶活性的高低与不同种群抗性水平之间并没有明显相关性,这可能同各地区施药背景不同、综合防治措施不同、各杀螨剂作用机理不同、不同种群体内代谢抗性及靶标抗性水平差异有关。     

朱砂叶螨对甲氰菊酯、阿维菌素,哒螨灵及其混剂抗性遗传力的分析(英文)

采用域性状分析法 ,估算了朱砂叶螨对 5种杀螨剂 (3种单剂和 2种混剂 )的抗性现实遗传力 ,并对 5种药剂的抗性风险进行了评估。把采自重庆北碚田间的朱砂叶螨种群 ,在室内不施药情况下饲养 6 0余代 ,以此作为抗性筛选的敏感品系。分别单一连续汰选近 30代 ,朱砂叶螨对甲氰菊酯、阿维菌素、哒螨灵、哒螨 -阿维 (哒螨灵 :阿维菌素 =7 4 :0 1,m m)和甲氰 -阿维 (甲氰菊酯 :阿维菌素 =8 9:0 1,m m)的抗性分别达 6 5 5 5、5 82、1 2 3、5 2 0和 1 4 2 倍 ;抗性现实遗传力分别为 0 2 16 7、0 0 96 7、0 0 130、0 0 80 0和 0 0 172。在实验室选择条件下 ,预计抗性增长 10倍时 ,甲氰菊酯、阿维菌素、哒螨灵、哒螨 -阿维 (哒螨灵 :阿维菌素 =7 4 :0 1,m m)和甲氰 -阿维 (甲氰菊酯 :阿维菌素 =8 9:0 1,m m)分别需要 15、34、333、4 2和 2 0 0代。甲氰菊酯抗性风险较高 ,其次是阿维菌素、哒螨 -阿维 (哒螨灵 :阿维菌素 =7 4 :0 1,m m)、甲氰 阿维 (甲氰菊酯 :阿维菌素 =8 9:0 1,m m) ,哒螨灵抗性风险较低。混剂哒螨 阿维 (哒螨灵 :阿维菌素 =7 4 :0 1,m m)不能延缓朱砂叶螨对两单剂哒螨灵和阿维菌素的抗性发展 ,而混剂甲氰 阿维 (甲氰菊酯 :阿维菌素 =8 9:0 1,m m)却能有效延缓朱砂叶螨对两单剂     

阿维菌素对小菜蛾的抗性选育及其对解毒酶活性的影响

用阿维菌素对小菜蛾Plutella xylostella (L.)进行了抗性选育,并对选育过程中小菜蛾解毒酶的活性进行了研究。选育从F₀至F₂₁代,抗性缓慢波动上升,达到选育前的122.91倍;F₂₁至F₂₇代,抗性迅速增长,达到选育前的812.73倍,抗性发展趋势呈现S型曲线。随着选育代数的增加,对乙酰胆碱酯酶(AChE)没有明显的影响;羧酸酯酶(CarE)活性,F₂₇是F₀的1.5倍,从F₂₂开始,活性在较高水平上波动;谷胱甘肽转移酶(GST)活性F₂₇是F₀的2.2倍,且从F₁₈开始,活性在较高水平上波动。选育的抗性品系,增效醚对阿维菌素增效6.34倍。