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【背景】舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)广泛分布于淡、海水水体和底泥中,致病株已在我国养殖鳢科鱼类中流行,也感染其他经济鱼类,导致暴发性死亡。【目的】对病鳜(Siniperca chuatsi)的病原进行鉴定,确定分离菌的致病性及药物敏感性,为该病临床治疗提供参考。【方法】采集病鳜脾肾组织进行PCR或RT-PCR扩增其常见病毒,采集病鳜肝脏和腹水分离培养细菌,PCR扩增代表菌株的gyrB、16S rRNA和毒力基因,鉴定其生理生化特征,并进行药物敏感性试验和人工感染试验。【结果】病鳜的传染性脾肾坏死病毒、鳜蛙病毒、鳜弹状病毒检测结果为阴性,肝脏和腹水均存在大量细菌;代表菌株Gui210820被鉴定为舒伯特气单胞菌,携带溶血素、气溶素、弹性蛋白酶和磷脂酶毒力基因,腹腔注射感染鳜的半数致死浓度(LD50)为3.16×105 CFU/mL;菌株Gui210820对四环素、卡那霉素、复方新诺明等6种抗菌药物耐药,对强力霉素中介,对恩诺沙星、新霉素、氟苯尼考等11种抗菌药物敏感。【结论】本试验从病鳜组织分离到致病性舒伯特气单胞菌,水产准许用药物恩诺沙星、新霉素、氟苯尼考... 相似文献
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为探究鰤鱼诺卡氏菌(
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HUANG Jun HUANG Yan-Hua HU Da-Sheng LUO Hua-Ping SHI Jin-Gu PENG Min-Yi XUAN Jun-Cheng QIN Li-Fen TENG Zhong-Zuo ZENG Gui-Zhong 《水生生物学报》2013,37(5):844-854
用常规方法从患典型白底板病黄沙鳖的心脏、肝脏等处进行细菌的接种分离, 通过人工感染确定分离菌株的致病性, API 20NE、16S rRNA基因序列分析进行病原菌鉴定和确定其系统发育地位, K-B纸片扩散法进行药敏试验, PCR检测病原菌的6种毒力基因。试验结果, 共分离到13株病原菌, 其中嗜水气单胞菌9株, 温和气单胞菌4株。在9株嗜水气单胞菌中, 有5株与Aeromonas hydrophila ATCC 7966菌株亲源关系最近, 4株与Aeromonas hydrophila北京株QDC01的亲源关系最近; 而4株温和气单胞菌与Aeromonas sobria ATCC 43979的亲源关系最近。药敏试验结果, 仅头孢哌酮对13株病原菌都高度敏感, 来源于不同养殖区域的病原菌药敏结果相差较大。6种毒力基因的阳性率, Aer、Act和ahp均为100%, hly和Alt为92.31%, ahal为76.92%; 毒力基因型共有4种, 嗜水气单胞菌主要为hly+Aer+Alt+Act+ahal+ahp+基因型, 而温和气单胞菌主要为 hly+Aer+Alt-Act+ahal+ahp+基因型, 同时携带hly基因的菌株其致病力更强。 相似文献
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鳗鲡病原性维氏气单胞菌的分离与鉴定 总被引:6,自引:0,他引:6
从养殖患病的日本鳗鲡(Anguilla japonica)肾脏分离得到1株优势菌株,形态特征和生理生化测试结果显示,分离菌在4%羊血平板培养基上呈α型溶血,革兰氏阴性,有运动性,氧化酶阳性,在pH6.0和1%NaCl中生长等。结合Biolog自动微生物鉴定系统和16S rRNA、gyrB基因序列分析结果,确定该分离菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。人工腹腔注射感染鳗鲡的试验结果表明,分离菌对鳗鲡的半数致死量LD50为2.15×107CFU/mL。药敏试验结果显示,在13种抗菌类药物中,分离菌对左氧氟沙星、氟哌酸、阿奇霉素和萘啶酸等8种药物敏感,而对利福平和新生霉素等5种药物敏感度低。 相似文献
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为探究胆酸(Cholic acid, CA)作为饲料添加剂对大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长及糖代谢的影响, 实验以饲料中添加300 mg/kg胆酸钠(Sodium cholate, CAS)作为胆酸钠组, 以不添加胆酸钠作为对照组。在饲养8周后, 分析胆酸钠对大口黑鲈生长性能、肠道菌群、糖代谢及与糖代谢相关酶的活性和基因表达的影响。结果显示: 与对照组相比, 胆酸钠组中大口黑鲈的生长指数和体成分的变化均没有显著差异; 胆酸钠组中大口黑鲈的肠道菌群组成无显著差异; 胆酸钠组中肝糖原含量和肝中糖原合成酶(Glycogen synthase, GCS)的活性显著增加, 肝中糖原分解酶糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)活性无显著变化, 而胆酸钠组中肌糖原含量、肌肉GCS与GPa的活性无显著差异; 胆酸钠显著促进肝中糖异生途径中果糖-1,6-二磷酸酶(Fructose-1,6-bisphosphatase, FBPase)和葡萄糖-6-磷酸酶(Glucose-6-phosphatase, G6Pase)基因的表达; 胆酸钠显著降低肝中糖酵解基因丙酮酸激酶(Pyruvate kinase, PK)和肌肉中己糖激酶(Hexokinase, HK)基因的表达; 同时, 研究还发现饲料中胆酸钠的添加可以显著降低肝中胆汁酸受体法尼醇受体(Farnesoid X receptor, FXR)基因的表达量, 而不改变肠道FXR的表达量。研究表明: 在饲料中添加300 mg/kg胆酸钠可以促进大口黑鲈肝脏糖异生, 抑制肝脏和肌肉糖酵解, 并促进鱼体肝糖原的合成。这些糖代谢的变化与肠道菌群没有直接关系, 但可能与肝中FXR的表达量降低有关。 相似文献
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为了解与大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长性状相关分子标记优势基因型的聚合效果, 研究选择先前已获得的13个与生长性状相关的分子标记, 位于PCK1、HSBP1、FOXO3b、MYH、HSC70-1、CTSB、HBP、POU1F1、PACAP、IGF-I、ghrelin、ApoproteinA1和MSTN基因上。在40尾亲本群体中对各标记的基因型进行检测, 选择可聚合优势基因型最多的2对亲本分别构建家系。在9月龄时, 从2个家系子代中分别采集305尾和266尾个体进行生长性状测量和各标记的基因型分析。家系1子代个体中含生长相关优势基因型的数量为0—6个, 对应的个体数依次为8、26、75、74、76、35和11, 对应的平均体质量依次为185.03、196.46、198.73、212.59、222.66、235.54和261.27 g。家系2子代个体中含生长相关优势基因型的数量为1—6个, 对应的平均体质量依次为184.43、213.17、243.77、249.98、252.11和266.00 g。个体中生长相关优势基因型聚合数量多少与生长性状呈正相关, 提示通过对生长相关优势基因型进行聚合可获得生长性状优良的大口黑鲈, 为大口黑鲈分子标记辅助育种的应用提供科学依据。 相似文献
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大口黑鲈生长性状的微卫星DNA标记筛选 总被引:9,自引:0,他引:9
本研究在人工养殖的大口黑鲈(Micropterus salmoides L.)群体中对40个微卫星位点进行扩增, 运用卡方检验分析微卫星位点在极端大个体组和极端小个体组中的基因型分布差异, 选择差异显著的16个微卫星位点对大口黑鲈随机群体进行基因型与性状的关联分析, 同时分析群体的遗传多样性。结果表明: 关联分析得到7个微卫星位点(JZL60、JZL67、JZL72、JZL124、MiSaTPW76、MiSaTPW117和MiSaTPW173)与体重、体长和体高显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01), 同时对差异显著的位点进行不同基因型间与生长性状的多重比较, 找到了与体重、体长和体高性状相关的最有利基因型为JZL60位点的AA、JZL67位点的BB、JZL72位点的AC、MiSaTPW76位点的BB和MiSaTPW117位点的BC。应用这16个微卫星位点对随机群体进行遗传多样性分析, 共检测到47个等位基因,平均等位基因2.938个,每个位点检测到的等位基因数为2~5个、群体的平均观测杂合度、平均期望杂合度和平均多态信息含量分别为0.515、0.500和0.445, 表明该群体遗传多样性处于中等水平。 相似文献
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黄鳝病原性维氏气单胞菌温和生物变种的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从养殖患出血病黄鳝(Monopterus albus)的肝脾肾中分离到大量菌落形态和色泽一致的细菌。16S rRNA序列分析证实随机挑选的5个分离株为同一种细菌,其中一株编号为HS120920进一步鉴定。结合细菌的形态特征,生理生化特征及16S rRNA和gyrB序列分析结果,鉴定该菌为维氏气单胞菌温和生物变种(Aeromonas veronii biovar sobria)。该菌对黄鳝的半致死浓度约为5.79×107 CFU/mL。药敏试验结果显示,菌HS120920对7种喹诺酮类,5种氨基糖苷类等17种抗菌药物高度敏感,对其他3种抗菌药物低敏,或有抗性。 相似文献
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本研究使用PCR技术扩增得到2 743 bp长度的大口黑鲈IGFBP1基因序列,序列含4个外显子和3个内含子,编码263个氨基酸。采用直接测序法在IGFBP1基因上筛选到4个SNPs位点,分别位于该基因核苷酸序列中的第147个、第791个、第2 436个和第2 676个碱基,其中2个位点位于外显子上,A-141C位点发生了同义突变,C-791T发生了错义突变,随机检测同批430尾实验个体中4个位点的基因型,均符合Hardy-Weinberg定律。其中A-2436G和C-2676T位点完全连锁,组成单倍型标记H1。分析H1标记中的AB和AA基因型实验群体,显示两者在尾柄长、全长指标上存在显著差异(p0.05)。综合分析表明,H1标记可用于大口黑鲈分子辅助育种研究。 相似文献
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Synopsis We compared survival, growth, and swimming performance of two size classes of age-0 largemouth bass, Micropterus salmoides, in the spring after being fed diets of bluegill, Lepomis macrochirus, fathead minnows, Pimephales promelas, or invertebrate prey during the winter. Regardless of prey assemblage, survival was uniformly high and independent of size. Length, wet- and dry-mass, and condition was also similar among treatments for both size classes. However, variation in individual performance differed, with the lowest variability in growth occurring among small age-0 largemouth bass in the invertebrate only treatment. Absolute and length corrected swimming speeds of largemouth bass were highest for invertebrate prey assemblages, intermediate for fathead minnow prey, and lowest for bluegill prey. The patterns in growth and spring swimming performance likely reflect the varied nutritive quality of different prey, the ability of largemouth bass to capture different prey, and competition with the piscine prey. 相似文献
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【背景】 乌鳢(Channa argus)是一种重要的淡水经济鱼类,其养殖业快速发展,但病害侵扰尤其是易发生细菌性疾病,已成为制约其可持续发展的瓶颈。【目的】 深入了解乌鳢源病原菌耐药性、致病机制,为病害的预防和控制提供科学指导。【方法】 从患病乌鳢病灶部位分离获得了3株病原菌(SY1、SY3、SY7),并对其进行抗生素药物敏感性试验和全基因组测序;根据全基因组测序数据注释病原菌的毒力基因、耐药基因、前噬菌体及前噬菌体携带的毒力基因和抗性基因。【结果】 经过16S rRNA基因测序及基因组平均核苷酸一致性(average nucleotide identity, ANI)分析,菌株SY1、SY3、SY7分别被鉴定为厦门希瓦氏菌(Shewanella xiamenensis)、达卡气单胞菌(Aeromonas dhakensis)和鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)。药物敏感性试验结果显示,这些病原菌对多种抗生素具有耐药性,并且对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、万古霉素、林可霉素均表现出抗药性。它们的全基因组大小分别为4 895 555 bp (G+C含量46.23%)、4 853 433 bp (G+C含量61.54%)和9 294 386 bp (G+C含量68.24%)。在病原菌基因组中总共检出毒力基因171个,涉及运动性、黏附、外毒素、效应传递系统、营养和代谢、抗逆性;检测到耐多药类、四环素类、大环内酯类等15种类别的抗生素抗性基因;发现病原菌均携带前噬菌体,但在前噬菌体序列中未检出毒力基因和抗生素抗性基因。【结论】 本研究扩展了乌鳢源病原菌耐药性和致病机制的认识,可为乌鳢病害的预防和治疗提供科学依据。 相似文献
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B. Czeczuga 《Hydrobiologia》1981,78(1):45-48
The occurrence and contents of carotenoids in different body parts were investigated by column chromatography and TLC in Micropterus salmoides (Lalép).The following carotenoids were found: -carotene, -cryptoxanthin, -cryptoxanthin, echinenone, canthaxanthin, lutein, zeaxanthin, neothxanthin, tunaxanthin, -doradexanthin, -doradexanthin, idoxanthin, astaxanthin, astaxanthin ester, mutatochrome and mutatoxanthin.Their total contents varied within the range of 0.071–1.691 µg/g wet weight. 相似文献
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【背景】鱼类诺卡氏菌病潜伏期和病程较长,感染率和死亡率较高,给水产养殖业带来较大的经济损失,其病原鰤诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是胞内寄生菌,侵入细胞后引起慢性感染是主要的致病机制。【目的】构建鰤诺卡氏菌侵染大口黑鲈(Micropterus salmoides)头肾巨噬细胞体外模型,观察鰤诺卡氏菌侵染巨噬细胞的过程并探究鰤诺卡氏菌对巨噬细胞的凋亡作用。【方法】采用密度梯度离心法分离巨噬细胞,通过特异性染色和PCR扩增巨噬细胞表达基因mpeg1对细胞进行鉴定,并通过CCK-8法和氧呼吸暴发活性测定检测巨噬细胞的活性;通过倒置荧光显微镜和流式细胞术观察侵染过程中细菌与细胞的形态与数量变化;通过双荧光流式细胞术检测、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放试验及线粒体膜电位检测,探究鰤诺卡氏菌对巨噬细胞的凋亡作用。【结果】从大口黑鲈头肾分离获得纯度高的巨噬细胞,经染色和PCR法鉴定为巨噬细胞;筛选出最优的体外培养条件为1640培养基+1%青霉素链霉素+1%胎牛血清。在脂多糖刺激后,巨噬细胞的氧呼吸暴发能力显著提高(P<0.05)。GFP-鰤诺卡氏菌侵染细胞2 h后细菌被细胞吞噬,4 h细胞变圆且贴壁率降低,6 h细菌大量繁殖并包围细胞,8 h后细胞大量死亡。凋亡相关实验结果表明,侵染初期巨噬细胞凋亡率增加,LDH释放增加,线粒体膜电位下降;随着侵染时间延长,细胞凋亡率下降、LDH释放量及线粒体膜电位下降减少,说明鰤诺卡氏菌对巨噬细胞起先促进后抑制凋亡的作用。【结论】通过密度梯度离心法成功分离大口黑鲈头肾巨噬细胞,并通过鰤诺卡氏菌侵染细胞后初步摸清鰤诺卡细菌在细胞水平的致病机理,建立了鰤诺卡氏菌侵染大口黑鲈头肾巨噬细胞的体外模型;证实了鰤诺卡氏菌可侵染巨噬细胞并抑制细胞凋亡,从而达到在巨噬细胞内存活,为进一步开展鰤诺卡氏菌与巨噬细胞相互作用并阐明鰤诺卡氏菌的致病机制奠定了研究基础。 相似文献
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[背景] 鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是一种严重危害水产养殖业的病原菌,可引起以体表溃疡、出血及组织器官形成结节为特征的鱼类慢性肉芽肿疾病,目前尚无有效的防治方法。[目的] 明确引起安徽省临泉县某养殖场加州鲈(Micropterus salmonoides)结节病的病原菌,探讨其致病性,为该病的有效防治提供科学依据。[方法] 取肝脏结节病灶接种于TSB培养基分离优势细菌,利用表型检查结合分子生物学方法鉴定分离菌株。进一步通过检测分离菌株的毒力基因、测定其对加州鲈的半数致死量(LD50)以及所感染加州鲈的组织病理学变化与组织载菌量,分析其致病性。[结果] 从病鱼体内分离到一株优势菌株NI,综合NI分离株的表型特性、16S rRNA基因序列与鰤鱼诺卡氏菌参考株相应序列的一致性以及特异性PCR扩增结果,确定其为鰤鱼诺卡氏菌。鰤鱼诺卡氏菌NI分离株携带毒力基因gapA、ibeA和mip,人工回归感染后加州鲈出现与自然病例相似的症状,其对加州鲈的LD50为2.58×106 CFU/尾。组织病理学观察到头肾、心脏、肝脏、胃和脾脏均出现慢性肉芽肿病变,肠管肌层疏松、肠绒毛脱落,肌肉组织中肌纤维疏松、间隙增宽。qPCR检测结果显示,组织中鰤鱼诺卡氏菌载量由高到低依次为头肾、心、肝、胃、脾、肠和肌肉。[结论] 鰤鱼诺卡氏菌是引起此次加州鲈结节病的病原菌,对该菌致病性的研究为加州鲈诺卡氏菌病的防控提供了理论依据。 相似文献
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转移-信使RNA (transfer-message RNA, tmRNA)是细菌中普遍存在的稳定非编码sRNA,同时具备tRNA和mRNA双重特性,主要介导反式翻译核糖体拯救机制,对病原菌致病性和胁迫响应具有重要影响。【目的】从tmRNA功能研究入手,揭示对水产养殖和人类公共安全造成严重危害的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的致病分子机制。【方法】采用生物学信息学工具IntaRNA 2.0对维氏气单胞菌tmRNA可能结合的下游靶标进行预测,通过基因本体论(gene ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)富集分析,鉴定预测靶标参与的生物学过程及信号通路,并使用qPCR技术验证候选靶标基因在维氏气单胞菌野生型、tmRNA敲除株和smpB敲除株中的表达情况,以初步鉴定维氏气单胞菌tmRNA以sRNA形式调控的潜在下游靶标。【结果】tmRNA可以sRNA形式与下游100个潜在特异性靶标结合,这些靶标基因主要结合于tmRNA的3′端tRNA样结构域(tRNA-like domain, TLD)、H2域及PK3、PK4域,参与细菌基本代谢过程。qPCR结果表明,在特异性结合的靶标基因中,基因WP_201994931.1以SmpB非依赖的方式受到tmRNA调节;WP_201954220.1、WP_005335875.1、WP_265062582.1、WP_265061484.1和WP_265061494.1等基因的表达则受到SmpB蛋白调控。【结论】本研究初步鉴定基因WP_201994931.1有可能是tmRNA作为sRNA调控的下游靶标,对拓展tmRNA功能研究领域有一定指导作用,有助于后续进一步探究维氏气单胞菌的致病和环境适应等重要生命活动的分子机制。 相似文献
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【背景】沙门氏菌(Salmonella)是重要的人兽共患病病原菌,也是重要的食源性致病菌,其在新疆地区缺少奶牛源的流行菌株信息,对其耐药情况和危害的研究相对缺乏。【目的】了解石河子地区某犊牛腹泻牛场沙门氏菌感染情况,揭示感染病原分型、致病力和耐药性。【方法】采集了腹泻牛肛拭子、环境拭子55份。按照国标方法GB 4789.4—2016从样本中分离可疑菌株并进行纯化培养,使用革兰氏染色镜检、全自动生化鉴定系统、stn基因、16S rRNA基因等方法进行鉴定;分析其血清型及多位点序列分型,使用药敏试验(微量肉汤稀释法)、耐药基因、小鼠致病力试验和毒力基因检测进行耐药性和毒力分析。【结果】分离获得4株疑似沙门氏菌的病原菌,在沙门氏菌显色培养基上显紫色,镜检可见革兰氏阴性短杆菌;生化鉴定结果与沙门氏菌的相似性为98%,stn基因扩增片段大小与预期一致。16S rRNA基因系统进化分析显示分离株与沙门氏菌参考株的相似性为99%以上。病死牛组织源分离株命名为Sal135,肛拭子源分离株命名为Sal141、Sal142、Sal143。Sal135、Sal143属于都柏林沙门氏菌(Salmonella dublin),ST10型;Sal141、Sal142属于姆班达卡沙门氏菌(Salmonella mbandaka),ST413型;4株分离株对头孢呋辛、庆大霉素、链霉素均耐药,对氨苄西林、替加环素、氟苯尼考、多黏菌素E和阿奇霉素耐药率为25%-50%,其中菌株Sal143为七重耐药菌株。所有菌株均携带aac(6'')-Iaa基因,此外,菌株Sal143还携带有aph(3'')-Ib、blaCTX-M、floR、sul2和tetA。以约2×107 CFU/mL剂量对小鼠腹腔注射后,菌株Sal135组死亡率为60%,菌株Sal143组死亡率为40%。16种毒力基因检测结果显示,invA、sipA、avrA、mgtCB、sipC、bcfA、fimA、sopB基因的检出率为100%,除pefA基因外其他毒力基因均被检出。【结论】发现该牛场4头犊牛感染了沙门氏菌,分离株Sal143显示多重耐药,都柏林沙门氏菌菌株的毒力较强且携带spv族毒力基因,推测其为致犊牛腹泻的主要病原。 相似文献
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Synopsis Suwannee bass,Micropterus notius, and largemouth bass,Micropterus salmoides, were collected by electrofishing in six habitats in the lower Santa Fe River, Florida during May 1981–March 1982. Both bass species were collected concomitantly in all habitats and habitat segregation was not evident. Crayfish (Procambarus spp.) were the primary food of Suwannee bass. Fish were the primary food of largemouth bass, but crayfish were common in the diet of largemouth bass ≥300 mm long. Suwannee bass have a greater throat width and consumed longer and wider forage than did largemouth bass of equal length. Available evidence suggests that Suwannee bass exhibit a positive selection for crayfish and a diverse forage resource, including abundant crayfish, is necessary for a Suwannee bass to coexist with a largemouth bass. This is Journal Series Number 6034 of the Florida Agricultural Experiment Station. 相似文献