激光共聚焦显微镜在微痕定量分析中的应用综述

微痕分析是石器、骨器、牙齿等工艺、功能研究的常用方法,但无论是高倍还是低倍等常用方法,受限于体式光学显微镜、扫描电镜等观察方法,微痕分析通常很难进行原位定量分析,因此微痕分析的定量化是目前学术界遇到的主要问题。近年来随着激光共聚焦显微镜（LSCM）在微痕分析中的应用,微痕定量化在西方学术界得到了新的实践和进展。本文主要介绍激光共聚焦显微镜的原理及其在微痕分析中的应用案例,以期促进微痕分析在中国的进一步发展。     

携抗MUC1单克隆抗体的超声造影剂微泡制备及体外寻靶实验

目的:制备携抗MUCI单克隆抗体的超声造影剂微泡,并评价其体外寻靶能力。方法:采用异型双功能交联剂将小鼠抗MUCI单克隆抗体与超声造影剂微泡相结合,采用激光粒度仪,扫描电镜及激光共聚焦显微镜评价其粒径,形态及结合率。体外培养小鼠EMT6细胞,将其与靶向微泡相混合,激光共聚焦显微镜评价粘附能力。结果:扫描电镜下显示携抗MUCI单克隆抗体造影剂微泡呈规则球体形态,平均粒径2.88±1.34μm,通过异型双功能交联剂,抗MUC1单克隆抗体可结合至超声造影剂微泡表面,其结合率为77.3±10.4%,靶向造影剂粘附体外培养细胞比例为79.2±13.2%。结论:成功制备携抗MUCI的靶向超声造影剂微泡,并且能很好的识别粘附体外培养乳腺癌细胞。     

福建荸荠属果皮微形态学研究

本文报道了在立体显微镜和扫描电子显微镜下对福建荸荠属8种、1变种植物果实表皮微形态特征的观察结果。根据果皮纹饰的不同,可分为两种类型:网状纹饰、拟网状纹饰;荸荠属植物果实表皮微形态特征具有丰富的多样性,表型可塑性小,不同类群之间具有明显的种间差异。观察结果表明:荸荠属果实表皮微形态特征是该属分类与系统研究中不可忽视的性状。     

壳聚糖/有机累托石微球的合成及表征

目的:以牛血清白蛋白(BSA)作为模型药物,制备壳聚糖/有机累托石复合物微球,建立一种安全有效的药物控释传递系统。方法:壳聚糖(CS)/有机累托石(OREC)和海藻酸钠,按照不同的混合比例交联,在Ca2+水溶液中包裹BSA而形成壳核结构的微球。采用傅立叶红外光谱(FTIR)、动态光散射(DLS)、原子力显微镜(AFM)、X-衍射(XRD)、扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察研究微球的形态、CS和OREC的插层结构、BSA的包封率和控释效果。结果:口光学显微镜和扫描电镜观察显示,形成了壳核结构的微球。傅里叶变换光谱和X-射线能量分散显示,OREC存在于微球中。小角X-射线衍射证实,CS链成功的插入OREC插层中。BSA的包封率和控释检测结果显示,与纯的CS/ALG形成的微球相比较,CO复合物所形成的微球药物释放率明显提高。结论:OREC-HTCC纳米粒子是良好的蛋白药物载体,具有包封率高、缓释效果好等优点,为CS-OREC作为潜在的药物给药系统的进一步应用提供科学依据。     

显微之美初体验

长期以来,有关动植物表面的微形态高清图片主要来自扫描电子显微镜。而作为动植物微形态研究的重要工具光学显微镜则很少见到,原因就是光学显微镜的景深会随着放大倍率的提高越来越小,对于起伏不平的动植物表面难以用其拍出清楚的图片。近来由于计算机技术在数码相机摄影艺术领域的广泛应用,摄影家可以采用电脑智能和景深合成技术,     

独行菜属植物玛咖(Lepidium meyenii)的微形态研究

利用光学显微镜和环境扫描电子显微镜,对不同颜色、不同产地玛咖(Lepidium meyenii)的叶表皮、花粉粒以及种皮进行了微形态学研究。结果表明:(1)不同颜色玛珈的叶表皮、花粉粒微形态具有高度的一致性,但与我国部分独行菜属植物有着明显的差异;(2)不同产地、不同颜色玛珈的种皮微形态有明显的差异。该研究为新植物资源玛咖的种质鉴定、分类提供了一些新的依据。     

使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞

目的:使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞(hECs)。方法:使用中性蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞,使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜,扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。结果:在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人表皮细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。结论:使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。     

景深合成技术在植物光学微形态研究上的应用

介绍了利用电脑景深合成技术在光学显微镜上获得植物标本大景深图片的摄影方法。概述了此方法获取植物光学微形态特征清晰图片的基本步骤和优缺点。该方法制片简单,可利用最普通的生物显微镜、电子目镜结合计算机进行摄影,成本低,观察特征明显,获得的图片具有真色彩,并可拍出植物最鲜活的状态。此方法有可能成为未来植物微形态研究的一个重要手段。     

激光辐照微藻的显微图像观察及荧光定量分析

利用激光共聚焦扫描显微镜观察激光辐照前后微藻细胞叶绿体自体荧光图像,并对荧光变化进行定量分析。用Nd:YAP激光辐照扁藻、金藻及三角褐指藻。实验结果表明:Nd:YAP激光辐照后,藻细胞荧光光谱峰位不变,但荧光峰值发生较大变化,在激光促长剂量辐照下,几种微藻细胞的荧光强度均比对照组强。激光辐照微藻产生的生理刺激效应可以反映在细胞的荧光特性与强度变化上。激光共聚焦扫描显微镜可以作为微藻激光生物效应研究的一种有效方法。     

福建石荠苧属植物花粉和果皮微形态特征

运用立体显微镜和扫描电子显微镜对产于福建省的石荠苧属3种药用植物的花粉和果皮的微形态特征进行系统观察。观察结果表明,3种植物花粉微形态特征比较相似;果皮微形态存在较明显的种间差异,且性状较稳定。石荠苧属果实表皮微形态特征是该属分类与系统研究中不可忽视的性状。     

Calcofluor White M2R荧光染色法识别家蚕微孢子虫

本研究探讨应用荧光染色试剂Calcofluor White M2R染色鉴别家蚕微孢子虫Nosema bombycis。结果表明：在荧光显微镜下可见家蚕微孢子虫孢子被染上强烈的青蓝色荧光, 而寄主组织碎片、病毒、细菌等不被染色。该法是一种快速有效鉴别微孢子虫的方法。     

HpD加激光照射预选单细胞的电镜术

卟啉类化合物是一种强的光敏剂,利用血卟啉衍生物(HpD)与激光微束相结合照射单细胞,在光学显微镜下对肿瘤细胞的研究已取得了一定的进展。为深入地从超微结构方面研究细胞内的早期病变,我们用激光微束照     

福建石荠Ning属植物花粉和果皮微形态特征

运用立体显微镜和扫描电子显微镜对产子福建省的石荠Ｎｉｎｇ属３种药用植物的花粉和果皮的微形态特征进行系统观察。观察结果表明,３种植物花粉微形态特征比较相似;果皮微形态存在较明显的种间差异,且性状较稳定。石荠宁属果实表皮微形态特征是该属分类与研究中不同忽视的性状。     

3种微孢子虫在我国西南部分地区腹泻患者中的流行情况调查

目的调查毕氏肠道微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)、肠炎微孢子虫(Encephalitozoon intestinalis)和兔脑炎微孢子虫(Encephalitozoon cuniculi)在我国西南地区的流行情况。方法收集了124份西南地区腹泻患者的粪便,通过显微镜镜检、PCR检测等手段,进行微孢子虫的分离与鉴定。结果毕氏肠道微孢子虫和肠炎微孢子虫的检出率较高,分别为7.26%(9/124)和3.23%(4/124),兔脑炎微孢子虫的检出率为0。结论西南地区腹泻患者有感染微孢子虫的情况,感染类型多为毕氏肠道微孢子虫和肠炎微孢子虫。     

山东小麦族植物叶表皮微形态的研究

利用光学显微镜,对山东小麦族5属9种植物的叶片下表皮微形态特征进行了研究。叶片下表皮微形态在属间差异明显,可作为分属的参考依据;山东5种鹅观草属植物的叶片下表皮微形态可分为两种类型,这与形态上划分的拟披碱草组和犬草组相一致。     

莎草属果皮微形态特征及其分类学上的意义

首次报道了在立体显微镜及扫描电子显微镜下对莎草属(Cyperus Linn.)14种、2变种植物果皮微形态特征的观察结果。根据纹饰特点的不同,可分为三种类型:(1)网——瘤状复合纹饰;(2)网状纹饰;(3)疣状纹饰。莎草属植物在果皮微形态特征上存在的种间差异可为种的划分提供依据,并为探讨该属的系统演化提供有价值的资料。     

不同箍结构对纤维桩核修复冠方微渗漏的影响

目的:研究不同形态的箍结构对纤维桩核修复冠方微渗漏的影响。方法:选择因正畸治疗需要而拔除的下颌单根管前磨牙50颗,随机分成5个组:完整箍结构组(第1组)、1面缺损的箍结构组(第2组)、2面缺损的箍结构组(第3组)、3面缺损的箍结构组(第4组)以及无箍结构组(第5组)。所有标本经纤维桩核修复后模拟口内老化情况,并经染色处理,在体式显微镜下记录各组微渗漏的情况。结果:第1组的微渗漏情况最轻,第5组的微渗漏情况最重。第1、2、3组之间微渗漏情况无统计学差异(P0.05),第2、3组和第4组之间微渗漏情况均无统计学差异(P0.05)。但第1组和第4、5组间微渗漏差异有统计学意义(P0.05),第2、3组和第5组间微渗漏差异有统计学意义(P0.05)。结论:牙体修复时至少应保留一面牙本质肩领,即使在没有完整箍结构的情况下也能获得良好的修复效果。     

土鳖虫与其混淆品的微性状鉴别研究

为对目前药材市场流通的中药材土鳖虫进行微性状特征研究,探究土鳖虫与其混淆品的区别。实验通过查阅资料,对市场土鳖虫品种进行调查,运用中药微性状鉴定法对土鳖虫的不同部位采用体视显微镜、生物显微镜、扫描仪等仪器进行图像采集,并利用Photoshop CS5软件景深合成高清晰度微性状特征图片来对其进行鉴别研究。实验结果表明,土鳖虫口器、腹背板边缘、肛上板、生殖板、触角、单眼间距与复眼间距比例、单眼、复眼、前足胫节、跗节、爪、尾须、背甲及腹甲刚毛等方面与混淆品有比较明显的区别。     

肌动蛋白体外自组织复合纤维结构的观察

利用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)和透射电子显微镜(transmission electron microscope,WEM)技术,研究了低浓度肌动蛋白在体外简单热力学体系中,形成的自组织复合纤维结构。肌动蛋白在体外通过自组织过程能够聚合形成大尺度的、离散的、复杂的聚集纤维体系,分散的单根微丝较少;在微丝稳定剂鬼笔环肽干预下,肌动蛋白通过受调控的自装配过程,主要形成分散的单根微丝,以及少量由单根微丝组成的微丝束和纤维分支等简单微丝聚集结构。     

中国独行菜族部分属种的叶表皮观察

利用光学显微镜对中国十字花科独行菜族部分广布属及相关属植物进行了叶表皮微形态学观察研究,结果表明:所研究的中国独行菜族植物叶表皮微形态具有多样性,可以划分为两种类型:第一类,叶上下表皮同形或近同形,叶表面被单毛或光滑无毛,包括独行菜属、群心菜属、菘蓝属和菥蓂属;第二类,叶上下表皮不同形,叶表面被分支毛和单毛,包括荠属和亚麻荠属;叶表皮微形态结果支持荠属应从独行菜族中移出,独行菜族是一多系类群,同时认为荠属与亚麻荠属植物具有较近的亲缘关系。