超声提取和超声水解法从野葛根中提取纯化葛根素和大豆苷元

采用超声法从野葛根中提取葛根异黄酮,再将提取物在盐酸水溶液中超声水解结合有机溶剂萃取法从野葛根中分离纯化葛根素和大豆苷元。葛根素收得率为1．2％,纯度为97．8％;大豆苷元收得率为0．5％,纯度为98．2％。超声法从野葛根中提取分离葛根异黄酮活性成分葛根素和大豆苷元具有省时、节能、提取率和产品纯度高的优点。     

葛根中葛根素和大豆苷提取方法的比较研究

目的:比较不同方法提取葛根中葛根素和大豆苷的效果。方法:分别用乙醇回流提取法、微波辅助提取法、超声波提取法及热水浸提法提取葛根中葛根素和大豆苷,用高效液相色谱法测定含量,计算提取量,并对最佳方法进行优化。结果:乙醇回流提取法、微波和超声法提取量较高,热水浸提法最低。超声提取法的最佳工艺为:以70%乙醇为溶剂,1:10料液比,提取时间45min。结论:该提取方法操作简便,提取效率高,提取时间短,节约溶剂,为工业化生产提供理论依据。     

太白山野葛根中异黄酮和葛根素含量随季节的变化

为了考察太白山野葛根中异黄酮及葛根素含量随季节的变化。采集一年12个月份的野葛根,采用紫外分光光度法测定其中异黄酮含量;以7高效薄层色谱扫描法测定野葛根中游离葛根素及总葛根素含量。结果表明：三月份异黄酮含量最高,为18.53%;四月份游离葛根素及总葛根素含量最高,分别为7.45%和8.93%。对不同季节太白山野葛根中异黄酮、游离葛根素及总葛根素进行定量分析,为这一野生资源的合理采收和开发利用提供了实验依据。     

Fe3+络合萃取法从野葛根中分离葛根素

利用Fe3 + 能够和葛根素生成可溶性络合物的性质建立了一种从中药野葛根中萃取葛根素的新型分离方法。以甲醇冷浸从野葛根中提取葛根总黄酮 ,将其进行水解、中和 ,再给水解葛根总黄酮中加入FeCl3 使葛根素与Fe3 + 络合溶解 ,过滤除去其它不溶性物质 ,用盐酸解聚Fe3 + 葛根素络合物 ,则得葛根素粗品 ,将其重结晶可得葛根素。同时 ,利用分光光度法确定了Fe3 + 葛根素络合物解聚的最佳酸度。利用TLC标准品对照、IR和分光光度法对产品进行了定性和定量分析。该方法从葛根中提取葛根素收率为 1 2 % ,纯度为 96 5 % ,具有操作简便、工艺流程简单 ,容易实现工业化的优点。     

酸水解法从葛根中提取分离葛根素和大豆苷元

本文报道了葛根黄酮的提取精制方法,以６０％乙醇为溶剂,６０℃温浸６ｈ的优化工艺条件下,采用逆流萃取法从葛根中提取葛根黄酮,其收得率为１９．２８％,含量５１．０５％。葛根黄酮提取物采用５％盐酸水解４ｈ,酸水解液用乙酸乙酯萃取放置析出葛根素,乙酸乙酯相经水洗、浓缩和重结晶可得大豆苷元。采用酸水解法可以将葛根黄酮中的葛根素及大豆苷元衍生物水解成葛根素和大豆苷元,有利于葛根素、大豆苷元的分离及产率的提高;该方法从葛根中提取分离葛根素和大豆苷元具有操作简便、产品纯度和产率高、成本低的特点。葛根素和大豆苷元产率分别为１．３６％和０．４５％,纯度为９８．３２％和９１．２５％。     

葛根中总黄酮的提取条件优化及含量测定

采用乙醇浸提法对葛根黄酮提取工艺进行研究,考察了提取温度、时间、乙醇浓度及固液比对葛根黄酮收率的影响,通过正交试验确定了葛根黄酮提取的最佳工艺条件,并采用紫外分光光光度法,以葛根素标准溶液为标样,测定了葛根中总黄酮的含量。实验结果表明,提取温度为70℃,固液比控制在1∶20,乙醇体积分数为80%,提取120min,葛根黄酮得率高达3.3%。在葛根黄酮检测方法的方法学考察中,平均回收率为97.5%,标准差与变异系数均较小,表明该测定方法精密度高,重现性好,可作为检测葛根中总黄酮含量的一种有效手段。     

减压内部沸腾法提取野葛根中的葛根异黄酮

采用减压内部沸腾法提取野生葛根中的葛根异黄酮.该法用少量乙醇溶液润湿葛根粉末使其中的葛根异黄酮充分解吸,然后加入一定温度的热水并迅速减压,使渗透到葛根组织内部的乙醇溶液首先沸腾,强化提取过程.实验结果表明,在压力0.018 MPa及45℃下,提取两次只需8 min,葛根异黄酮的提取得率为11.2%.与传统的乙醇提取比较,在温度降低35℃下提取速度仍然快15倍,乙醇用量减少12倍,优势明显.     

葛根总黄酮提取工艺的研究

目的:筛选提取葛根总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用单因素和正交试验对提取葛根总黄酮的工艺条件进行优化;利用紫外可见分光光度计测量葛根总黄酮的含量;利用高效液相色谱仪测量葛根素的含量;分别以葛根素和葛根总黄酮的含量为指标进行最优工艺的评价。结果:最佳工艺条件是以9倍量的30%乙醇提取3次,每次1h。结论:该提取工艺简单,成本低,适合于生产应用。     

葛根素提取及其抑菌实验研究

以湘西葛根为实验材料,选取水、甲醇和95％的乙醇作为提取溶剂,索氏提取法提取其葛根素。以提取率为指标,综合提取工艺中加入量、提取时间的影响,采用正交实验筛选出乙醇提取工艺,最佳参数为每次加入10倍量、回流提取时间3．5h。用滤纸片法研究葛根提取液对大肠杆菌等8种常见食品腐败菌的抑菌活性,结果表明,各种菌体的抑菌效果为：大肠杆菌〉金黄色葡萄球菌〉枯草芽孢杆菌〉假丝酵母青霉,对青霉无抑菌作用。各种菌的抑菌效果与浓度的关系为,葛根素浓度升高,抑菌效果增强。     

葛花不同工艺提取物的异黄酮成分含量比较研究

目的:以不同浓度乙醇和大孔吸附树脂法提取和纯化葛花的提取物,并用HPLC和UV进行异黄酮成分含量比较分析。方法:以不同浓度的乙醇回流提取葛花药材制备提取物,并采用大孔吸附树脂对其进行纯化;然后以HPLC法对提取物中的3种主要黄酮类成分进行定量分析,并以UV法测定其总黄酮含量。结果:葛花不同提取物的黄酮类成分含量差别较大;所建立的HPLC方法可以同时测定葛花提取物中鸢尾苷、6"-O-木糖鸢尾苷和染料木素的含量;UV法与HPLC法联合应用,可对不同葛花提取物中的异黄酮类成分进行评价。结论:不同工艺提取的葛花提取物中异黄酮类成分有较大区别,大孔吸附树脂纯化后可显著提高总黄酮的纯度;HPLC联合UV法可共同用于葛花的质量评价及提取工艺的研究。     

超声法从青风藤根中提取青藤碱

以苯为溶剂采用超声法对青风藤根进行提取,超声提取物经活性碳脱色纯化和重结晶即可得产品青藤碱。对所得产品经IR和HPLC法进行了定性和定量分析,在最佳提取条件下青藤碱的产率为2．12％,含量为98．73％。该方法从青风藤根中提取分离青藤碱具有操作简便,能耗低,生产成本低等优点。     

蔗糖和光对三裂叶野葛毛状根生长及次生物质产生的影响

研究了蔗糖浓度和光对固体培养的三裂叶野葛毛状根生长及其总异黄酮和葛根素产生的影响。结果表明：在供试的分别添加1%、3%、5%、7%和9%蔗糖的MS固体培养基中,3%蔗糖能促进三裂叶野葛毛状根的生长及其异黄酮类化合物和葛根素的积累;培养20d后,其生物量达到0.48g(DW,干重)/瓶,总异黄酮和葛根素含量分别为25.44mg/g(DW)和11.64mg/g(DW)。与添加3%蔗糖的MS培养基培养的三裂叶野葛毛状根相比,含5%蔗糖的培养基培养的毛状根干重增殖倍数提高了7.0％,而含1％、7％和9％蔗糖的培养基培养的毛状根干重增殖倍数分别下降62.4％、42.8％和65.3％;其总异黄酮含量分别降低574％、13％和33.4％,葛根素含量分别下降47.9％、15.8％和35.1％,但其毛状根培养物的可溶性糖含量则分别增加了0.52、1.45和1.54倍。暗培养30d的毛状根的生物量达到0.83g(DW)/瓶,分别比蓝光和白光培养的毛状根提高37.1%和23.3%。在蓝光和白光下培养的部分毛状根的表面呈淡绿色;但白光处理的毛状根中总异黄酮含量比蓝光和暗培养处理的分别提高了14.7%和19.2%;蓝光抑制毛状根中葛根素含量的积累,白光和暗培养的毛状根培养物中的葛根素含量分别是蓝光处理的1.61倍和1.52倍。     

葛藤与葛根中异黄酮类成分的比较

分析比较了野葛〔Ｐｕｅｒａｒｉａｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｄ．）Ｏｈｗｉ〕的藤（葛藤）和根（葛根）的主要异黄酮类活性成分。从葛藤中首次分离得到３个化合物,经化学方法和光谱鉴定,证实为大豆甙元（Ａ）、大豆甙（Ｂ）和葛根素（Ｃ）。采用双波长薄层扫描法测定葛藤与葛根中上述３种异黄酮化合物的含量,葛藤中大豆甙元、大豆甙和葛根素的含量分别为０．１９５％,３．９３３％和２．４８１％;葛根中则分别为０．０５９％,０．７１４％和４．３１５％。研究结果为葛藤新药源的开发利用提供了科学依据     

不同采集时间野葛不同部位总黄酮和葛根素含量比较

临床常用药材葛根来源于野葛（Pueraria lobata（Willd．）Ohwi]的干燥根,含有多种异黄酮化合物,市场需求量较大,资源比较紧张。过度无序的采挖不仅使其野生资源面临枯竭的危险,也造成了产地区域生态环境的破坏。有研究表明,野葛地上部位含有的成分与葛根基本相同。为寻求利用野葛地上藤茎部位替代葛根药用的可行性,作者用紫外分光光度法和高效液相色谱法分析了不同时间采集的野葛不同部位的总黄酮和葛根素含量,为进一步扩大和开发野葛的药用新资源提供参考依据。     

In vitro enzymatic modification of puerarin to puerarin glycosides by maltogenic amylase

Puerarin (daidzein 8-C-glucoside), the most abundant isoflavone in Puerariae radix, is prescribed to treat coronary heart disease, cardiac infarction, problems in ocular blood flow, sudden deafness, and alcoholism. However, puerarin cannot be given by injection due to its low solubility in water. To increase its solubility, puerarin was transglycosylated using various enzymes. Bacillus stearothermophilus maltogenic amylase (BSMA) was the most effective transferase used compared with Thermotoga maritima maltosyl transferase (TMMT), Thermus scotoductus 4-alpha-glucanotransferase (TS4alphaGTase), and Bacillus sp. I-5 cyclodextrin glucanotransferase (BSCGTase). TMMT and TS4alphaGTase lacked acceptor specificity for puerarin, which lacks an O-glucoside linkage between D-glucose and 7-OH-daidzein. The yield exceeded 70% when reacting 1% puerarin (acceptor), 3.0% soluble starch (donor), and 5U/100 microL BSMA at 55 degrees C for 45 min. The two major transfer products of the BSMA reaction were purified using C(18) and GPC chromatography. Their structures were identified as alpha-d-glucosyl-(1-->6)-puerarin and alpha-D-maltosyl-(1-->6)-puerarin using ESI+ TOF MS-MS and 13C NMR spectroscopy. The solubility of the transfer products was 14 and 168 times higher than that of puerarin, respectively.     

The Study on the Entrapment Efficiency and In Vitro Release of Puerarin Submicron Emulsion

The entrapment efficiency (EE) and release in vitro are very important physicochemical characteristics of puerarin submicron emulsion (SME). In this paper, the performance of ultrafiltration (UF), ultracentrifugation (UC), and microdialysis (MD) for determining the EE of SME were evaluated, respectively. The release study in vitro of puerarin from SME was studied by using MD and pressure UF technology. The EE of SME was 86.5%, 72.8%, and 55.8% as determined by MD, UF, and UC, respectively. MD was not suitable for EE measurements of puerarin submicron oil droplet, which could only determine the total EE of submicron oil droplet and liposomes micelles, but it could be applied to determine the amount of free drug in SMEs. Although UC was the fastest and simplest to use, its results were the least reliable. UF was still the relatively accurate method for EE determination of puerarin SME. The release of puerarin SME could be evaluated by using MD and pressure UF, but MD seemed to be more suitable for the release study of puerarin emulsion. The drug release from puerarin SME at three drug concentrations was initially rapid, but reached a plateau value within 30 min. Drug release of puerarin from the SME occurred via burst release.     

蔗糖浓度对三裂叶野葛毛状根生长及其次生物质产生的影响

本文研究了蔗糖浓度对发根农杆菌ATCC15834诱导产生的三裂叶野葛毛状根生长及其葛根素和异黄酮类化合物产生的影响以及液体培养基中蔗糖的消耗变化。结果表明：毛状根在含5％、4％、3％和2％蔗糖的MS培养基中培养16天后的干重增殖倍数分别为11．7、11．9、10．1和5．9;其中尤以3％的蔗糖浓度最有利于毛状根中异黄酮类化合物及葛根素的积累;培养12天后,毛状根的葛根素含量达到最高,约5．147mg／gDW;而其异黄酮类化合物的含量则在培养16天后达到最高,约27．76mg／gDW。在毛状根液体培养过程中培养基的蔗糖浓度随着毛状根的生长而降低,其消耗速率与毛状根的生长速度及其可溶性总糖含量成正比。毛状根的可溶性总糖含量在培养12天时达到最高,而培养16天后培养基中的蔗糖消耗完毕。