人类鸟苷酸结合蛋白抗病毒机制研究进展

人类鸟苷酸结合蛋白(Human guanylate binding proteins,hGBPs)是一种干扰素诱导型细胞因子,属于鸟苷酸结合蛋白家族(Guanosine triphosphatases,GTPases)。GBPs能够介导经典与非经典炎症激活途径,诱导先天性和适应性免疫应答,还可以诱导自噬和控制囊泡运输,在宿主抵御细菌、病毒和其他病原微生物时发挥重要作用。本文主要介绍了hGBPs的发现和结构,并对7种hGBPs的抗病毒机制进行概述。     

干扰素-λ的生物学作用

Ⅲ型干扰素（Interferon,IFN）,即IFN-λ,是一种新型干扰素,其家族包括IFN-λ1,IFN-λ2和IFN-λ3（也可分别称作IL-29,IL-28α和IL-28β）.IFN-λ的功能性受体复合物是由IL-28Rα（又称IFN-λR1或CRF2-12）和IL-10Rβ（又称CRF2-4）链组成的异二聚体,IFN-λ结合到受体上诱导受体异二聚体化,导致Jak-STAT信号转导途径的激活,从而发挥与Ⅰ型IFN相似的生物学效应.IFN-λ的生物学效应包括抗病毒、抗肿瘤和调节免疫活性等方面.IFN-λ很多生物学活性与临床上应用广泛的 IFN-α/β十分相似,但其受体表达局限,毒副作用相对较小,因此在抗病毒和抗肿瘤方面具有广阔的应用前景.     

鸟苷酸结合蛋白家族在感染性疾病中调控炎症小体活化的研究进展

鸟苷酸结合蛋白(guanylate-binding proteins,GBP)是一类干扰素诱导蛋白，在应对细菌、病毒、衣原体以及寄生虫等病原体感染时，其发挥的作用存在差异，并且影响感染性疾病的发展和结局。目前，研究者发现在细菌等病原体感染引发的细胞自主免疫中，GBP蛋白通过影响炎症小体的经典和非经典活化途径调控细胞焦亡。本文对GBP家族成员结构、进化特征以及炎症小体的经典和非经典活化途径进行了介绍，综述了GBP蛋白调控炎症小体活化的相关研究进展，归纳总结了GBP蛋白影响不同病原体感染的作用机制，以期为感染性疾病的发病机制和诊疗提供新的基础研究线索。     

Ⅰ型IFN的结构、信号传导和功能

IFN是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增殖及免疫调节作用的活性蛋白,至少可分为α、β、δ、ε、κ、ω、τ和limitin八种,分子质量约为18.5 kDa,包括4个保守的半胱氨酸,形成2对分子内二硫键。IFN-α/βR是IFN-α和IFN-β共同结合受体,包括IFNAR1和IFNAR2,IFNAR1仅有1个亚单位,IFNAR2由3个亚单位组成。IFN与位于细胞膜上的特异性受体结合,主要经JAK-STAT途径介导信号传导,不仅能通过PKR、2-′5′OAS、Mx和ADAR1等途径发挥抗病毒作用,还能通过对淋巴细胞和巨噬细胞的调节以及诱导MHC分子表达等途径发挥直接或间接的免疫调节作用。     

非洲猪瘟病毒C717R蛋白诱导小鼠炎症应答

【目的】通过炎症应答系统筛选,发现非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV) C717R蛋白可诱导炎症反应,本研究旨在首次鉴定C717R蛋白功能,通过构建C717R重组慢病毒并感染BALB/c小鼠,探究其对炎症应答产生的影响。【方法】通过炎症小体表达系统筛选出诱导炎症应答的C717R蛋白,并构建C717R重组慢病毒。利用C717R重组慢病毒感染小鼠,使C717R在小鼠组织中表达。经实时荧光定量、蛋白质免疫印迹等方法检测C717R慢病毒包装、蛋白表达以及促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-β的变化。【结果】C717R蛋白在小鼠组织中正常表达。酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测发现,表达C717R蛋白的小鼠,血清中促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-β及IFN-γ分泌水平显著升高。实时荧光定量检测表达C717R蛋白的小鼠组织证实,C717R、TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA转录水平显著上调;蛋白质免疫印迹证实,C717R可诱导小鼠不同组织caspase-1和IL-1β的成熟。组织病理切片结果显示,表达C717R蛋白的BALB/c小鼠和对照组和相比,肝脏、心脏、肺脏等器官炎性细胞浸润程度较对照组更严重。【结论】ASFV的C717R蛋白表达诱导BALB/c小鼠产生炎症应答,为鉴定和阐明C717R蛋白介导的促炎新机制提供了重要依据。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8的生物学效应及其临床价值

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(tumor necrosis factor alpha induced protein-8,TNFAIP8)作为TNFAIP8家族的成员之一,被认为是一种具有抗凋亡和促肿瘤效应的蛋白分子,在细胞的存活和死亡中发挥重要作用。本文重点介绍TNFAIP8的发现过程、结构功能、生物学效应及其临床意义,并对其可能的作用机制进行概述。     

IFN-λ1在HEK293T细胞中表达纯化及活性检测

[目的]构建IFN-λ1真核表达质粒,利用人胚胎肾HEK293T细胞表达系统,获得具有良好生物学活性的IFN-λ1重组蛋白。[方法]将IFN-λ1目的基因克隆到pcDNA3.1+载体NheⅠ与XhoⅠ多克隆位点构建pcDNA3.1-IFN-λ1分泌表达质粒,并将其转染到HEK293T细胞中;采用Ni-NTA亲和层析方法分离纯化重组蛋白,SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western Blotting)检测IFN-λ1的表达与纯度;采用qPCR、WB结合显微镜观察检测IFN-λ1的生物学活性。[结果]IFN-λ1真核表达质粒构建正确,而且能够在HEK293T细胞中分泌表达重组蛋白,分离纯化的IFN-λ1能够有效地诱导ISG15、ISG54、ISG56、OAS1、TNFα、MX1和TRAIL等凋亡相关基因的表达,激活p38促凋亡信号通路,抑制水泡性口炎病毒对BHK-21细胞的感染。[结论]成功构建了pcDNA3.1-IFN-λ1真核表达质粒,能够在HEK293T细胞中分泌表达IFN-λ1重组蛋白;分离纯化的IFN-λ1重组蛋白具有潜在的抗肿瘤和抗病毒生物学活性,为进一步研究IFN-λ1的功能和临床应用奠定了基础。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8的生物学效应及其临床价值北大核心CSCD

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(tumor necrosis factor alpha induced protein-8,TNFAIP8)作为TNFAIP8家族的成员之一,被认为是一种具有抗凋亡和促肿瘤效应的蛋白分子,在细胞的存活和死亡中发挥重要作用。本文重点介绍TNFAIP8的发现过程、结构功能、生物学效应及其临床意义,并对其可能的作用机制进行概述。     

NIF3类超家族蛋白

NIF3(NGG1p interacting factor 3)类超家族蛋白是一个含有NIF3结构域的超家族,从细菌到哺乳动物存在着较高的保守性。编码该家族蛋白质的mRNA广泛存在于生物的各种组织中。该家族蛋白属于α/β蛋白,该类蛋白质通过自身形成二聚体或与其他蛋白质结合形成复合物发挥生物学功能。现已证明该家族蛋白多与基因的转录有关,在一些哺乳动物中还在神经分化中起关键作用。最近研究表明它还和一些人类疾病有关。虽然该家族蛋白数量众多,广泛存在,但多数为假想蛋白,对其相关功能的研究较少,被归属为"未知功能蛋白质"。也正是因为该家族蛋白数量众多,广泛存在,功能未知,它们已经引起了人们越来越大的研究兴趣。     

姜黄素抗肿瘤作用及机制研究进展

姜黄素是从草本植物姜黄、莪术等根茎中提取的一种植物多酚,有着广泛的药理作用,具有抗心血管疾病、抗肿瘤、抗微生物、抗抑郁、抗炎、抗氧化等生物学功能。抗肿瘤是姜黄素主要生物活性之一,抗肿瘤机制主要有:抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,抗肿瘤侵袭及转移,逆转肿瘤细胞耐药性及增加对化疗的敏感性等。本文就其抗肿瘤机制的研究进行综述,为姜黄素的进一步开发利用提供基础。     

III 型干扰素的抗肿瘤作用*

Ⅲ型干扰素(IFNλs)是干扰素家族中最新的一组成员。他们的很多生物学活性与临床上应用广泛的IFNα/β十分相似,但是他们所结合的受体与IFNα/β迥异。Ⅲ型干扰素的毒副作用显著小于IFNα/β,且抗肿瘤作用明显。本文回顾了近年来对Ⅲ型干扰素抗肿瘤功能研究的最新进展。     

热休克蛋白27增强A型流感病毒NS1对β干扰素的抑制作用

热休克蛋白27(Heat shock protein 27,HSP27)是一种具有多重功能的小热休克蛋白,它在一些病毒的生命周期中也发挥着重要作用。为研究HSP27对流感病毒感染的调节作用,首先在原核及真核细胞中克隆并表达了人源的HSP27蛋白,并验证了HSP27和A型流感病毒NS1蛋白能够相互结合。通过荧光素酶检测试验发现,HSP27可以抑制病毒感染细胞中β干扰素(IFN-β)的表达,但不依赖于其自身的磷酸化状态,而且HSP27与NS1共同对于IFN-β的表达具有叠加抑制效果。进一步的结果表明HSP27可能通过RIG-I样RNA解旋酶(RLH)途径中MDA5因子抑制IFN-β的表达。研究表明,HSP27在被感染细胞的天然免疫中发挥一定作用,有助于进一步阐明宿主因子对于流感病毒感染的调节机理。     

新型的Ⅱ类细胞因子受体--白介素22结合蛋白

白介素22结合蛋白为一种新型的Ⅱ类细胞因子受体家族成员,已弄清了其蛋白质结构,基因及其表达。它能直接结合IL－22,作为IL－22的拮抗剂,发挥着多种生物学功能。     

病原相关蛋白及其在植物抗病中的作用

病原相关蛋白广泛存在于高等植物中,它可以为各种微生物病原菌诱导产生,具有相对低的分子量,稳定性较大,多存在于胞间,在进化上相对保守,是植物潜在的抗病物质,很可能参与植物对病原菌的诱导抗性,其中许多蛋白具有几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活力。目前,多个病原相关蛋白的基因已被分离,克隆,并在植物中表达。     

苦瓜的核糖体失活蛋白

核糖体失活蛋白是一类专一修饰核糖体的大亚基rRNA从而抑制蛋白质生物合成的蛋白毒素,可分为Ⅰ-型和Ⅱ-型两种类型。苦瓜中含有多种Ⅰ-型核糖体失活蛋白,如α-苦瓜素,β-苦瓜素和MAP30等,这些蛋白成分具有抗肿瘤、抗病毒和抗艾滋病等功能,因而近年来引起人们广泛的关注。对苦瓜核糖体失活蛋白的研究进展和应用前景进行了综述。     

Ⅲ型干扰素相关生物学功能的研究进展

干扰素(Interferon,IFN)是一类具有多功能生物活性的糖蛋白,包含3个家族(Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型)。Ⅲ型干扰素(Type Ⅲ interferon,IFN-Ⅲ)是近16年发现的新型干扰素,其诱导过程及生物学功能与I型干扰素(Type Ⅰ interferon,IFN-Ⅰ)相似,在抗病毒、免疫调节、抗肿瘤、抑制自身免疫病、抑制过敏性哮喘以及抗细菌和真菌等方面具有重要作用。本文将从IFN-Ⅰ和IFN-Ⅲ的分类、序列同源性和信号传导等方面进行阐述,并结合近年来IFN-Ⅲ在疾病治疗过程中所取得的成就,综述IFN-Ⅲ的生物学功能,旨在为IFN-Ⅲ的深入研究以及在多种疾病的诊断和防控中提供参考。     

白介素-1 β通过JNK/p38信号-转导通路调控肾系膜细胞表达α-平滑肌肌动蛋白

为探讨细胞内丝裂素原活化蛋白激酶（MAPK）家族各亚类信号转导通路在炎症性细胞因子白介素－1β（IL－1β）对大鼠肾系膜细胞（rMC)表型标志物α-平滑肌肌动蛋白（α－SMA）表达及其分布中的调控作用,以IL－1β（10ng/ml)刺激体外培养的rMC,用电穿孔基因转染及免疫杂交法观察IL－1β对α－SMA基因启动子活性及蛋白表达的作用,并用共聚焦荧光显微镜及透射电镜观察IL－1β刺激前后细胞内α-SMA及微丝的分布变化。通过应用PD98059和SB203580特异阻断ERK和p38通路、共转染显性失活JNKK基因特异阻断JNK通路,观察阻断对IL－1β刺激所致α-SMA表达或启动子活性的影响。结果显示,IL－1β刺激6h可明显上调α－SMA启动子活性,在1－2d内显著促进其蛋白合成;IL－1β刺激24h后,细胞内α-SMA及微丝在细胞核周的分布增加。阻断ERK通路对IL－1β诱导的α-SMA表达无明显影响;阻断JNK及p38通路均可使IL－1β诱导的α－SMA表达明显受抑;阻断p38通路的作用比阻断JNK通路更强,而且对基础状态的α-SMA表达也有抑制作用。上述结果提示,IL－1β可刺激rMC发生表型转化,其表型标志物α－SMA可通过基因转录增强而增加蛋白表达,在细胞内的分布向核周转位积聚。JNK及p38通路是介导IL－1β刺激rMC α-SMA表达的主要信号转导途径,而ERK通路不影响IL－1β的这一作用。     

真菌竹黄双向调节TNF-α诱导的L929细胞凋亡过程

真菌竹黄是我国特有的菌类药物,应用前景广阔,具有抗肿瘤和抗炎功效,但作用机理仍不十分清楚。我们以TNF-α诱导小鼠成纤维细胞(L929细胞株)为模型,深入探讨竹黄发挥药效的作用机理。研究发现,竹黄可以双向调节TNF-α诱导的L929细胞凋亡过程,高浓度竹黄可以促TNF-α诱导的细胞凋亡,低浓度竹黄具有抗TNF-α诱导的细胞凋亡作用。在竹黄抗凋亡过程中,信号网络中所涉及的关键蛋白COX-2表达下降,BCL-2表达上升,而NF-κB基本无明显变化。我们推测竹黄中含有药理作用相反的物质,通过调节信号网络中关键蛋白COX-2和BCL-2等的变化,进而改变信号网络平衡,发挥抗肿瘤与抗炎功效。相关研究有利于深入理解竹黄抗肿瘤与抗炎的药效作用,为运用生物活性导向和天然药物提取分离技术,进行相关新药的研发提供理论依据。     

树突状细胞在抗真菌感染免疫中的作用

近年来,随着广谱抗生素、抗肿瘤药物和免疫抑制剂等药物的广泛使用,免疫功能降低患者数量的增加,侵袭性真菌感染性疾病的发病率逐年升高。树突状细胞(Dendritic Cells,DCs)是已知功能最强的专职抗原提呈细胞,作为宿主固有免疫和适应性免疫的联系枢纽,DCs在病原微生物抗原的识别与呈递过程中发挥核心作用。研究证明,DCs可通过其细胞表面的多种受体有效识别病原真菌的抗原,并在诱导宿主免疫应答过程中发挥重要作用。本文将对树突状细胞分类及其在抗真菌感染免疫中的识别作用进行系统叙述。     

微管蛋白亚型及其功能

微管是真核细胞构成细胞骨架的主要成分,由α/β微管蛋白组装而成。微管在细胞多种活动中发挥着重要的作用,其功能主要受微管结合蛋白、微管蛋白的翻译后修饰以及微管蛋白亚型的调控。已有研究发现,α/β微管蛋白存在多种亚型,微管蛋白亚型在不同组织以及发育过程中的表达模式差异较大。多种微管蛋白亚型基因的突变可以引起神经系统疾病。该文综述了微管蛋白亚型的研究进展,尤其在微管功能调控、神经系统发育及其相关疾病中的作用。