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1.
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伊立替康联合去甲斑蝥素对人胃癌细胞作用的考察及协同作用机制研究
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李子木 孙震晓《生物化学与生物物理进展》,2015年第42卷第2期
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研究了伊立替康(CPT-11)联合去甲斑蝥素(NCTD)对人胃癌细胞BGC-823增殖的影响及协同作用机制.分别利用CPT-11 30、60、90、120、150μmol/L,NCTD 30、60、90、120、150μmol/L和两药按上述浓度1∶1联用,以及两药上述浓度完全交叉组合作用BGC-823细胞24、48和72 h,并且以不同序贯方式作用BGC-823细胞24 h.MTT法检测BGC-823细胞的增殖,采用中效原理评价两药联合作用;流式细胞术测定CPT-11 60μmol/L、NCTD 60μmol/L和联合用药(60∶60)μmol/L,以及不同序贯方式作用BGC-823细胞24 h后细胞周期及凋亡的情况;Western blot法检测CPT-11 30、60μmol/L,NCTD 30,60μmol/L和联合用药(30∶30,60∶60)μmol/L作用BGC-823细胞24 h后Pdcd4和p53蛋白表达水平.结果显示:CPT-11及NCTD联合用药比单独用药对细胞增殖的抑制作用增强,IC50明显减小(P<0.05),单独使用CPT-11或NCTD作用24、48和72 h时的IC50分别是联合使用时的2.83、3.15、2.19倍以及2.66、3.11、2.45倍,并且两药联合用药具有协同作用效应;两药合用24 h时先给CPT-11方案抑制作用优于先给NCTD方案,且优于同时给药方案(P<0.05);CPT-11 60μmol/L作用24 h引起BGC-823细胞S和G2-M期阻滞(P<0.01),NCTD 60μmol/L作用24 h引起细胞G2-M期阻滞(P<0.05),并诱导细胞凋亡(P<0.05),联合用药(60∶60)μmol/L作用24 h,主要引起细胞G2-M期阻滞(P<0.01),与先给NCTD 6h方案及同时给药相比,先给CPT-11 6h方案主要引起细胞S期阻滞增加(P<0.05)以及细胞凋亡增加;CPT-11 30、60μmol/L作用12 h后Pdcd4上调表达,p53下调表达(P<0.05),NCTD 30、60μmol/L作用12 h后Pdcd4下调表达,p53上调表达(P<0.05),联合用药(30∶30,60∶60)μmol/L作用24 h后Pdcd4及p53蛋白表达均上调(P<0.05).上述结果表明:CPT-11联合NCTD对人胃癌BGC-823细胞有协同抑制作用,其机制主要是诱导细胞G2-M期阻滞,并与抑癌基因蛋白Pdcd4及p53上调表达有关;两种药物联用时序贯次序对联合作用有影响,先给CPT-11方案要优于先给NCTD方案及同时给药方案,其机制主要是引起S期阻滞增加以及细胞凋亡增加;抑癌基因蛋白Pdcd4与p53之间可能存在负调控关系.
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2.
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斑蝥素对草地贪夜蛾Sf9细胞膜完整性和膜电位的影响 被引次数：1
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汪丽 张来喜 张志勇 杨宝东 王进忠 张爱环 张民照《昆虫学报》,2013年第56卷第5期
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为明确斑蝥素对昆虫细胞膜的作用及其机理， 本研究利用草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的卵巢细胞系Sf9细胞作为实验材料， 采用透射电子显微技术(transmission electron microscope , TEM)、 激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope, LSCM)结合荧光探针FDA/PI及DiBAC4(3)技术研究斑蝥素(cantharidin， CTD)对Sf9细胞膜完整性及膜电位（membrane potential， MP）的影响。结果表明： 32 μmol/L CTD处理6 h和12 h后， 电镜观察均未发现细胞膜结构破损； FDA/PI染色后， 32 μmol/L CTD处理0.5 h后细胞FDA荧光强度比对照显著降低(P<0.05)， 碘化丙啶（propidium iodide， PI）染色的细胞比例与对照无显著性差异(P≥0.05)。32 μmol/L CTD处理140 s后即引起MP发生显著性去极化(P<0.05)； 64 μmol/L CTD处理瞬时MP发生显著性去极化(P<0.05)； 32 μmol/L CTD处理3 h内及64 μmol/L CTD处理2 h 内MP仍保持显著性去极化(P<0.05)， 之后去极化程度降低； 32 μmol/L CTD处理6 h及64 μmol/L CTD处理3 h时MP去极化与对照组相比已无显著性差异(P≥0.05)。结果说明, CTD处理短时间内可引起Sf9细胞膜电位去极化并维持一段时间， 同时导致细胞活性发生不可逆下降， 但未对细胞膜结构完整性产生破坏。
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3.
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斑蝥素对小菜蛾体壁组织结构的影响
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陈利平 杨宝东 张志勇 张爱环 张民照 张来喜 孙淑玲《昆虫知识》,2011年第48卷第6期
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为探究昆虫天然产物斑蝥素(cantharitin,CTD)对鳞翅目昆虫小菜蛾Plutella xylostella(L.)的触杀机制,利用透射电子显微镜观察了该物质处理小菜蛾4龄幼虫体壁组织结构的变化。斑蝥素亚致死剂量0.15μg/头和半致死剂量0.3μg/头点滴处理试虫前胸背板,中毒试虫反映结果类似。处理12h后中毒试虫虫体发黑,陆续死亡。处理12h后,体壁细胞细胞核固缩并且边极化,线粒体扭曲,内脊模糊出现空泡化,线粒体和粗面内质网数量下降;处理24h后,体壁细胞出现的类似处理12h后的症状,且症状更为明显。结果表明CTD对小菜蛾体壁表皮层组织结构无显著破坏作用,但对体壁细胞有明显的致毒作用。
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4.
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芫菁斑蝥素对喉癌细胞和胃癌细胞的抑制作用 被引次数：3
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李晓飞 侯晓晖 陈祥盛《昆虫学报》,2009年第52卷第9期
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【目的】 研究提取自眼斑芫菁Mylabris cichorii (Linnaeus)体内的斑蝥素对人喉癌HEP-2细胞和人胃癌BGC-823细胞的抑制、以及对细胞周期分布的影响。【方法】 将斑蝥素作用于经体外培养的人喉癌HEP-2细胞和人胃癌BGC-823细胞, 采用MTT法进行体外细胞抑制实验, 测定斑蝥素对这2种癌细胞生长的抑制率与剂量效应；采用流式细胞术测定斑蝥素处理的人喉癌HEP-2细胞的细胞周期；并通过光学显微镜观察其细胞形态学改变。【结果】 斑蝥素浓度为1.28 μmol/L时, 对HEP-2细胞有显著抑制作用, 且随药物浓度升高其抑制作用增强, 呈剂量效应关系, 抑制中浓度为2.88 μmol/L；斑蝥素浓度为20.4 μmol/L时, 对BGC-823细胞有显著抑制作用, 且随药物浓度升高其抑制作用增强, 呈剂量效应关系, 抑制中浓度为54.85 μmol/L。用浓度1.44和2.88 μmol/L的斑蝥素处理HEP-2细胞24 h后, G2-M期分布从8.21%增加到22.29%, S期细胞分布从14.33%增加到21.61%, 且随药物浓度升高其阻滞作用增加, 呈剂量效应关系。G0-G1期细胞分布都有所降低, 从77.45%降低到56.10%, G0-G1期峰前无显著的亚二倍体峰出现, 说明斑蝥素未能够诱导HEP-2细胞发生凋亡。光镜检查显示：HEP-2细胞可出现细胞收缩、胞膜突出、核碎裂等现象。【结论】 斑蝥素对治疗喉癌的效果可能较为理想, 而对胃癌的作用则不明显。
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5.
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去甲斑蝥素诱导人红白血病K562细胞凋亡的实验研究 被引次数：10
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孙震晓 赵天德 魏育林 李家实《中国组织化学与细胞化学杂志》,1999年第1期
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体外实验证明１０μｇ．ｍｌ－１去甲斑蝥素作用于人红白血病Ｋ５６２细胞２４ｈ，可诱导Ｋ５６２细胞发生凋亡。提取加药组细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳呈现典型的ＤＮＡ“梯子”，同时加药组细胞出现核固缩、碎裂及胞浆浓缩等形态学变化。流式细胞测试结合形态学观察，特别是细胞超微结构观察，证明去甲斑蝥素诱导的Ｋ５６２细胞凋亡大部分发生在细胞周期的Ｍ期，也有部分发生在间期。免疫细胞化学结果表明，１０μｇ．ｍｌ－１去甲斑蝥素作用于人红白血病Ｋ５６２细胞２４ｈ，与对照组相比，加药组细胞中ｂｃｌ┐２蛋白表达增强，而Ｂａｘ蛋白表达减弱，两组间有显著性差异（Ｐ＜０．００１）。
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6.
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去甲斑蝥素对H446细胞Id1mRNA表达的影响(英文)
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徐菲菲 于小玲 尚芳芳 赵辉 李红静《现代生物医学进展》,2012年第12卷第7期
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目的:观察去甲斑蝥素对小细胞肺癌H446细胞Id1mRNA表达的影响。方法:分别利用MTT法检测细胞生长活性;用划痕实验分析细胞迁移能力;采用Hoechst染色观察细胞凋亡;用实时荧光RT-PCR法测定H446中Id1mRNA的表达。结果:去甲斑蝥素对H446细胞的生长有明显的抑制作用,细胞的生长抑制率和凋亡率明显增加,细胞迁移距离明显缩短。去甲斑蝥素可抑制细胞内Id1mRNA的表达,其相对定量随去甲斑蝥素的浓度增大而减少。结论:在H446细胞中,去甲斑蝥素能抑制Id1mRNA的表达,这可能是去甲斑蝥素抑制细胞生长,迁移和诱导细胞凋亡的重要机制之一。
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7.
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去甲斑蝥素与单克隆抗体偶联物治疗肝癌实验研究 被引次数：3
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梁福佑 张胜华 潘颖 徐琳娜 乔建华 卢志达 王维刚《动物学杂志》,1999年第2期
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用大鼠单克隆抗体３Ａ５与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）制备偶联物，ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５－ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞和小鼠肝癌Ｈ２２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５－ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性。小鼠腹腔内移植肿瘤，ｉｐ给药，３Ａ５－ＮＣＴＤ和ＮＣＴＤ的ＩＬＳ值分别为１１１％和３７％。结果说明在腹腔肿瘤的治疗方面３Ａ５－ＮＣＴＤ具有比游离ＮＣＴＤ更强的治
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8.
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杀菌剂对斜纹夜蛾SL细胞系和幼虫的生物活性
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张瑞峰 任永霞 徐汉虹 张志祥《昆虫学报》,2007年第50卷第7期
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以MTT法筛选了19种杀菌剂对斜纹夜蛾Spodoptera litura SL细胞的毒杀活性，并以该方法研究了三唑类杀菌剂对SL细胞的毒力。结果表明: 福美双、烯唑醇、己唑醇、氟硅唑、苯霜灵、苯醚甲环唑、戊唑醇和腈菌唑等杀菌剂对SL细胞具有优异的毒杀活性。三唑类杀菌剂腈菌唑、烯唑醇、己唑醇和戊唑醇处理SL细胞48 h后，LC50值分别为21.94 μg/mL、 23.80 μg/mL、 33.16 μg/mL和47.63 μg/mL。以考马斯亮蓝G250法研究了腈菌唑对SL细胞中蛋白质含量和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率的影响, 20 μg/mL腈菌唑处理12 h、24 h、48 h和72 h后，SL细胞中蛋白质含量分别降低8.55%、25.95%、42.95%和67.05%；处理24 h和48 h后，SL细胞的LDH漏出率分别为30.66%和32.05%。以浸叶喂食法处理斜纹夜蛾3龄幼虫，三唑类杀菌剂可显著抑制试虫体重增长。以0.5 μg/头、 1.0 μg/头和2.0 μg/头剂量的腈菌唑注射处理72 h后，斜纹夜蛾4龄幼虫血细胞数量分别降低12.31%、 25.96%和25.73%；腈菌唑注射处理48 h和72 h后，对斜纹夜蛾幼虫的LD50值分别为1.59 μg/头和1.53 μg/头。结果显示以离体培养细胞为对象，从现有杀菌剂中寻找新的杀虫剂先导化合物具有良好的研究潜力。
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9.
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斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721及其裸鼠皮下移植瘤的影响
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晏容 刘云 朱欣婷 易小飞 刘流 李晓飞《昆虫知识》,2015年第52卷第2期
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[目的]探讨斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721及其裸鼠皮下移植瘤的影响.[方法] 1、采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测不同浓度斑蝥素酸镁在体外对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用;2、流式细胞术检测斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721细胞周期和细胞凋亡的影响;3、Hoechst33342染色观察斑蝥素酸镁对人肝癌细胞 SMMC-7721 细胞形态的影响;4、透射电镜观察斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞 SMMC-7721 超微结构的变化;5、建立人肝癌细胞 SMMC-7721 裸鼠皮下移植瘤模型,实验组每只裸鼠瘤周注射斑蝥素酸镁6.26×10-5 mmol,对照组给予相同容积的无菌生理盐水瘤周注射,计算抑瘤率;6、原位末端标记染色(TUNEL)法检测人肝癌裸鼠皮下移植瘤组织细胞凋亡情况.[结果] 1、斑蝥素酸镁对人肝癌细胞SMMC-7721有比较明显的抑制作用,抑制率随药物浓度的增加而升高,呈剂量效应关系,其半数抑制浓度(IC50)为1.79μmol/L;2、流式细胞检测结果显示:人肝癌细胞SMMC-7721在斑蝥素酸镁的作用下,G0/ G1期细胞减少,G2/M期细胞增加,细胞出现G2/M期阻滞;细胞凋亡率随斑蝥素酸镁浓度加大而逐渐增加;3、Hoechst33342染色镜下显示:斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721出现凋亡细胞形态特征;4、透射电镜观察:斑蝥素酸镁作用后人肝癌细胞SMMC-7721出现细胞核异形、染色质聚集成团、边集,见凋亡小体;5、斑蝥素酸镁组肿瘤体积、重量显著小于生理盐水组(P﹤0.05),抑瘤率为49%;6、TUNEL法提示斑蝥素酸镁组移植瘤组织细胞凋亡率显著高于生理盐水组(χ2=92.609, P﹦0.000).[结论] 斑蝥素酸镁对人肝癌细胞 SMMC-7721 在体内外均有抑制增殖作用,并可以诱导肿瘤细胞凋亡,其凋亡的发生与细胞分裂期阻滞有关.
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10.
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奥司他韦、利巴韦林和盐酸金刚乙胺对甲型H1N1流感病毒的抑制作用
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蒋虹 金光 丛喆 鲍琳琳 秦川 魏强《中国实验动物学杂志》,2011年第2期
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目的细胞水平测试奥司他韦、利巴韦林和盐酸金刚乙胺对甲型流感H1N1病毒的抑制或杀伤作用。方法通过在MDCK细胞系和甲型H1N1病毒株间建立药物剂量-效应关系确定导致细胞死亡的效力与抑制病毒复制的效力的比值（治疗指数）,测试药物的抗病毒效果。结果奥司他韦、利巴韦林和盐酸金刚乙胺对MDCK细胞的半数中毒浓度分别为（1134.7±186.8）μg/mL、（742.0±76.9）μg/mL、（94.6±1.9）μg/mL,对甲型H1N1病毒的治疗指数（TI）分别为71.19、24.9和3.12。结论奥司他韦对甲型H1N1病毒抑制作用最强,利巴韦林其次,盐酸金刚乙胺对甲型H1N1病毒抑制效果较弱。
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11.
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微囊藻藻胆蛋白光敏杀虫剂毒杀机制研究
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梁杰 武子涵 黄蓓《生物学杂志》,2014年第4期
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用果蝇（Drosophila melanogaster）和草地夜蛾卵巢细胞Spodoptea Frugiperda 21（SF21）来探讨微囊藻藻胆蛋白（MC-PBP）作为光敏杀虫剂的作用和机理。实验结果表明：MC-PBP对果蝇的LC50为750μg/mL,致死剂量为4000μg/mL;血卟啉甲醚（HMME）对果蝇的LC50为1000μg/mL。MC-PBP浓度4000μg/mL时,果蝇的死亡率是93.33%,而相同浓度下,HMME光敏剂的致死率是66.66%;在细胞水平研究中发现：MC-PBP光照处理SF21细胞48 h之后,400μg/mL的MC-PBP对细胞的抑制率达到65%;MC-PBP处理SF21细胞后,其细胞内丙二醛（MDA）含量明显升高,而细胞内还原型GSH相对含量随MC-PBP浓度升高而显著降低。结果表明MC-PBP光敏杀虫剂毒杀机制与细胞内脂质过氧化和细胞抗氧化损伤能力减弱相关。
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12.
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去甲斑蝥酸钠对小鼠卵母细胞第一次减数分裂的影响
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张焕相 陈大元《动物学报》,1996年第42卷第2期
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体外培养的小鼠卵母细胞在１２ｈ内可完成第一次减数分裂，排出第一极体。将卵母细胞培养在含２５０μｇ／ｍｌ去甲斑蝥酸钠的培养液中，生发泡破裂（ＧＶＢＤ）过程不受影响，但卵母细胞不能完成减数分裂过程，卵母细胞中没有减数分裂器的形成，染色体紧密凝缩在一起；去甲斑蝥酸钠对小鼠卵母细胞减数分裂的影响在６ｈ内具有可逆性：卵母细胞ＧＶ破裂后用去甲斑蝥酸钠处理２ｈ换正常培养液培养，整个减数分裂过程不受影响；ＧＶ期卵母细胞用去甲斑蝥酸钠连续处理６ｈ，洗去药物继续培养，减数分裂可继续进行，但第一极体的排放时间推迟。去甲斑蝥酸钠对分裂期细胞特异性磷蛋白的出现影响不显著，在连续处理的卵母细胞中分裂期细胞特异性磷蛋白仍然存在。
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13.
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重组人内皮抑素对食管癌细胞生长抑制作用的体外研究
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张志明 孙苏平《现代生物医学进展》,2012年第12卷第2期
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目的:探讨重组人内皮抑素(rhES)对食管鳞癌系KYSE-150及TE1细胞生长的影响。方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,以大鼠成纤维细胞L929为对照细胞,检测rhES不同浓度(0、12.5、25、50、100、200、400、600μg/ml)和作用时间(24h、48h)对食管鳞癌系KYSE-150、TE1和L929细胞的生长抑制作用。结果:大鼠L929细胞经rhES处理后,吸光度A值轻微降低,差异不具有统计学意义(P>0.05),食管鳞癌系KYSE-150、TE1经rhES处理后,吸光度A值明星降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:rhES明显抑制食管鳞癌系KYSE-150及TE1细胞增殖,且呈时间-剂量依赖性。
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14.
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丹参联合β-榄香烯对肝星形细胞LX-2增殖和凋亡的影响
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马力天 任秦有 白杨 李成花 杨建栋 孙世友 周睿 杜乐 郑瑾《生物磁学》,2013年第34期
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目的：探讨丹参联合B-榄香烯对肝星形细胞LX-2增殖和凋亡的影响。方法：体外培养肝星形细胞LX-2，分别将丹参（浓度为1、2、4、6、8mg／ml），β-榄香烯（浓度为25、50、100、150、200μg／ml），单独作用于LX-2细胞后24h、48h用CCK-8（CellCountKit-8）法检测细胞的增殖情况，并选取合适的药物浓度（丹参3．6mg／ml，β-榄香烯125μg／ml），然后进行联合用药，加药24h、48h后用CCK-8（Cell CountKit-8）法检测细胞的增殖情况，用流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果：OCCK-8法显示丹参（浓度为1、2、4、6、8mg／ml），8-榄香烯（浓度为25、50、100、150、200μg／ml）作用LX-2细胞24h、48h后，其增殖抑制率均明显高于正常对照组（P〈0．05），并且呈浓度和时间依赖性。②联合用药（丹参3．6mg／ml，β-榄香烯125μg／ml）时，LX-2细胞的增殖抑制率和凋亡率均显著高于单独用药（P〈0．01）。结论：丹参、β-榄香烯单独或二者联合作用均能抑制LX-2细胞的增殖，且联合应用的作用显著高于单独用药，可协同促进LX-2细胞的凋亡。
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15.
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印楝素A对粉纹夜蛾Hi-5细胞的毒性机理 被引次数：3
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李文欧 徐汉虹 张志祥 廖绍裕《昆虫学报》,2008年第51卷第8期
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利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni Hübner卵细胞系（Hi-5细胞系）在细胞水平研究了印楝素(azadirachtin) A杀卵活性的毒性机理。以MTT法研究了印楝素A对粉纹夜蛾Hi-5细胞的生长抑制率，结果表明最初两天印楝素 A对Hi-5细胞无较明显活性，但随后几天抑制率显著增加。用Giemsa染色法对细胞进行染色，观察细胞形态发生的变化，发现：1.25 μg/mL印楝素 A处理Hi-5细胞1 d后，细胞已无法贴壁，形状变圆，接着细胞形态变得极不规则，有凋亡小体出现。用Ho33342染料对Hi-5细胞核DNA染色，通过荧光显微镜观察发现：经印楝素A处理后第1天，部分细胞核染色体发生异常凝聚，此后异常细胞核比例增多，核膜严重破损。以异硫氰酸荧光素(FITC)荧光染料研究了Hi-5细胞的蛋白质含量变化，发现1.25 μg/mL印楝素A 处理Hi-5细胞1 d后，细胞蛋白质指数(DI)为1.070±0.018，至第3 d DI值上升到1.912±0.019。分析了印楝素A处理后Hi-5的还原性谷胱甘肽(GSH)的相对含量变化，发现1.25 μg/mL处理浓度下，各天处理组GSH抑制率有显著差异。结果显示印楝素A能够抑制Hi-5细胞增殖，影响细胞骨架正常功能，降低细胞活力。
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16.
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康莱特联合顺铂对宫颈癌 SiHa 细胞增殖和凋亡的影响
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胡静 马力天 闫平 魏忠海 张莹 张平 田兆林 郑瑾 石梅 魏丽春《现代生物医学进展》,2014年第10期
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目的：通过康莱特联合顺铂对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,探讨其作用机制.方法：体外培养宫颈癌Siha细胞,分别将康莱特（浓度为1,2,4,6,8 mg/mL）,顺铂（浓度梯度为1.5,3,6,9,12 μg/mL,单独作用于宫颈癌SiHa细胞,加药24h、48h用噻唑蓝（MTT法）检测细胞增殖情况.用流式细胞术检测康莱特组和顺铂组细胞24h凋亡率,选取合适的药物浓度（康莱特6mg/mL,顺铂3 μg/mL）,进行联合用药,加药24h、48h用MTT法检测细胞增殖情况,用流式细胞术检测24h细胞凋亡率.结果：①MTT法显示加药后两组的24h、48h,宫颈癌SiHa细胞的抑制率均高于对照组（P＜0.05）,并且在一定程度上呈浓度和时间依赖性.②联合用药时,细胞的抑制率和凋亡率要显著高于单独用药（P＜0.01）.结论：康莱特、顺铂单独或联合作用均能抑制SiHa细胞的增殖,促进其凋亡,且康莱特联合顺铂的作用要显著高于单独用药,康莱特与化疗药物联合使用可提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.
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17.
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内毒素引起的乳鼠心肌细胞血红素加氧酶—1基因的表达 被引次数：4
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Li YM Liu JC Zhang M Zheng XC Wu LL Shi AY Wu YJ《Sheng li xue bao : [Acta physiologica Sinica]》,2001年第53卷第1期
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为了探讨在内毒素作用下的乳鼠心肌细胞（neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs）血红素加氧酶－1（heme oxygenase-1,HO-1）基因的表达及其在细胞损伤中的作用，分别用10、30及50μg/ml的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS），10μg/ml LPS 10μmol/ml锌原卟啉Ⅸ（Zn-protoporphyrin-Ⅸ，ZnPPⅨ）和单纯10μmol/ml ZnPPⅨ与培养的NRCMs共同孵育6h，以及10μg/ml LPS与NRCMs共同孵育9h和18h。分别观察细胞HO－1 mRNA表达、MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率的变化。结果显示，同样与细胞孵育6h，LPS10μg/ml时HO－1 mRNA表达比对照组增加81.2％，30μg/ml时表达量增加126.3％，50μg/ml时表达量增加92.8％；LPS为10μg/ml时，孵育9h后HO－1 mRNA的表达量比对照组增加93.6％，孵育18h后一增加105.8％。LPS30、50μg/ml，10μg/ml LPS＋10μmol/ml ZnPPⅨ与细胞孵育6h及LPS 10μg/ml孵育18h后，细胞MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率明显增加（P＜0.01）；单纯10μg/ml LPS与单纯10μmol/ml ZnPPⅨ孵育6h后，上述指标均无明显升高。结果表明，LPS可诱导NRCMs HO－1 mRNA的表达，且在较低LPS剂量范围内具有时间依赖性和浓度依赖性；NRCMs HO-1 mRNA的表达可减低LPS引起的细胞损伤，这可能是细胞产生的一种自身保护性反应。
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18.
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苦瓜叶提取物对亚洲玉米螟的生物活性及对斜纹夜蛾卵巢细胞的毒力
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刘欢 朱春亚 张茂新 凌冰《昆虫知识》,2014年第51卷第1期
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【目的】为研究苦瓜(Momordica charantia L.)叶正丁醇萃取物对亚洲玉米螟Ostrinina furnacalis(Güenée)生长发育及生殖力的影响,并探讨其作用机理。【方法】采用饲料混药法测定了苦瓜叶正丁醇萃取物对亚洲玉米螟幼虫存活率、发育历期和雌成虫产卵量的影响。【结果】用0.025%、0.1%和0.2%浓度的苦瓜叶正丁醇萃取物混合饲料饲喂亚洲玉米螟2龄幼虫3 d后,幼虫存活率明显降低,校正死亡率分别为27.43%、39.23%和54.93%,且发育历期明显延长,雌成虫产卵量与对照相比分别下降了12.63%、22.74%和37.27%。进一步的研究结果表明,苦瓜叶正丁醇萃取物对斜纹夜蛾卵巢细胞(SL)的形态、增殖和生长密度有明显的抑制作用。处理后的SL细胞皱缩变圆,细胞核偏移甚至消失,胞质外泄。处理24、48和72 h后,对SL细胞增殖的IC50值分别为180.96、158.54和122.87μg/mL;处理6~72 h后,SL细胞相对生长密度随药剂浓度和处理时间的增加而明显下降;用125μg/mL浓度处理SL细胞2、3、4和5 d后,SL细胞对葡萄糖吸收的抑制率分别为7.66%、13.97%、19.45%和27.30%。【结论】苦瓜叶正丁醇萃取物对SL细胞表现出的较强毒杀作用可能是其导致亚洲玉米螟生殖能力降低的主要作用机制之一。
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19.
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重组人干扰素α1b对呼吸道合胞病毒感染小鼠外周血T淋巴细胞亚群及肺组织病理学的影响
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刘瑞清 张国成 黄可飞 邓军霞 杨晓蕾 吕香萍 林海波 刘雪 成胜权《现代生物医学进展》,2013年第13卷第9期
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目的:研究重组人干扰素α1b对呼吸道合胞病毒感染小鼠外周血T淋巴细胞亚群及肺组织病理学的影响.方法:将40只BALB/c小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、感染模型组、重组人干扰素α1b 3.125 μg剂量组、重组人干扰素α1b 12.5 μg剂量组和重组人干扰素α1b 50 μg剂量组.建立感染小鼠模型成功后,连续雾化干预5天,第6天摘眼球取血、肝素化处理,流式细胞术检测小鼠外周血CD3+CD4+、CD3+CD8+水平.剖取小鼠左肺立即固定于10％中性福尔马林溶液24小时,石蜡包埋、切片行HE染色,光镜下观察小鼠肺组织病理学改变.结果:与正常对照组比较,其余各组小鼠外周血CD3+CD8+水平均显著降低,CD3+CD4+与CD3+CD4+/CD3+CD8+水平均显著升高,除重组人干扰素α1b 50 μg剂量组CD3+CD4+水平外,其余各组差异均有统计学意义(P＜0.05)；与感染模型组比较,其余各组小鼠外周血CD3+CD8+水平均显著升高,CD3+CD4+与CD3+CD4+/CD3+CD8+水平均显著降低,除重组人干扰素α1b 3.125 μg剂量组CD3+CD8+水平外,其余各组差异均有统计学意义(P＜0.05)；重组人干扰素α1b 3.125 μg、12.5μg、50μg剂量组间比较可见,随着药物剂量的成倍增加,CD3+CD8+水平呈递增趋势,CD3+CD4+与CD3+CD4+/CD3+CD8+水平呈递减趋势,除重组人干扰素α1b 3.125 μg与12.5 μg剂量组间P＞0.05,其余各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).肺组织病理学观察到感染模型组小鼠肺组织炎性损伤显著,雾化吸入重组人干扰素α1b后,肺组织炎性损伤程度显著降低.结论:重组人干扰素α1b对RSV感染小鼠外周血T淋巴细胞亚群及肺组织病理学影响显著,具有良好的抗病毒及免疫调节作用,并在一定范围内存在剂量-效应关系.
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20.
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金黄色葡萄球菌肠毒素A对H22小鼠移植瘤的抑制作用
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王雪 孙嘉琳 张云 冯艳敏 陈自辉 李政楠《生物技术通报》,2009年第12期
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旨在探讨金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)在KM鼠体内的抑瘤效果.建立H22荷瘤小鼠模型,将20只小鼠随机分为对照组(生理盐水)、低剂量组(15 μg/ml)、中剂量组(25 μg/ml)和高剂量组(50 μg/ml),观察肿瘤生长趋势,计算抑瘤率,通过ELISA检测IL-2的含量.结果显示,给药组肿瘤生长趋势均较对照组缓慢;对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的抑瘤率分别为0,28.9%,34.0%,51.0%(P<0.05);血清中IL-2含量分别为58.9 pg/ml、83.6 pg/ml、91.8 pg/ml、118.1 pg/ml.金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)可抑制H22肿瘤的生长,并上调IL-2的分泌.
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