虎杖鞣质的糖苷酶抑制作用研究

本文研究了虎杖鞣质对-αD-葡萄糖苷酶、蔗糖酶、乳糖酶和α-淀粉酶的抑制活性,以探讨其降血糖机制。结果显示虎杖鞣质除对α-淀粉酶几乎没有抑制活性外,对其余糖苷酶均显示不同程度的抑制活性,其降血糖机理可能是通过调控糖苷酶活性实现的。     

地榆鞣质对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的保护作用研究

为了观察地榆鞣质对骨髓抑制的保护作用,本文采用腹腔注射环磷酰胺致小鼠骨髓抑制模型。造模成功后,将骨髓抑制小鼠按体重随机分为:模型组、集落刺激因子组、地榆鞣质20、10、5 mg/kg三个剂量组,另设正常对照组。连续灌胃10 d,每天一次,以外周血液白细胞数量、骨髓细胞DNA含量和CD34+的表达以及骨髓细胞O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)蛋白的表达为评价指标,研究地榆鞣质对CTX所致骨髓抑制的治疗作用。结果显示地榆鞣质可显著升高小鼠外周血WBC(P0.05);显著升高小鼠骨髓DNA含量(P0.05);显著促进CD34+的表达(P0.05);显著促进MGMT蛋白的表达(P0.05)。通过本研究可以看出地榆鞣质可显著拮抗CTX所致小鼠骨髓抑制。     

基于TGF-β1/Smad信号通路初步探讨虎杖醇提物对腺嘌呤诱导小鼠肾间质纤维化的改善作用

目的 研究虎杖醇提物(ethanolic extract of Polygonum cuspidatum,PCE)对小鼠肾间质纤维化的保护作用及其潜在分子机制。方法 将50只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组(n=10):正常对照组、模型组、虎杖醇提物低、中、高(75、150、300 mg/kg)剂量组。除正常对照组外,其他各组灌胃腺嘌呤构建肾间质纤维化模型,虎杖醇提物低、中、高剂量组同时灌胃给予不同剂量的虎杖醇提物混悬液。各组经灌胃给药42 d后用生化试剂盒测定血清肌酐(serum creatinine, Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)水平,通过苏木精伊红染色和Masson三色染色分别观察小鼠肾组织病理学变化及胶原沉积情况,采用Western Blot法检测小鼠肾组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad6、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen I)的表达情况。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠BUN、Sc...     

芜菁正丁醇提取物对四氧嘧啶型糖尿病小鼠血糖的影响

为研究芜菁正丁醇提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的降血糖作用,对小鼠禁食不禁水24 h后,腹腔注射四氧嘧啶溶液(160 mg/kg),60 h后再禁食不禁水12 h,剪尾尖取血,测血糖值,将血糖值大于11.1 mmol/L的小鼠为实验性糖尿病模型;实验保留10只空白对照,取符合实验模型的小鼠随机分为模型、阳性(海堤参芪丸对照组225 mg/kg)和芜菁正丁醇提取物低、高剂量(20、40 g/kg)组,每天灌胃给药1次,连续14 d。实验期间分别于复制模型前、后,用药7、14 d后,剪尾取血检测血糖;末次给药结束时,小鼠摘眼球取血,分离血清测定超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果显示用药7、14 d后芜菁正丁醇提取物组与模型组比较,小鼠血糖值显著降低(P0.01);SOD活性显著增强(P0.01);MDA含量显著降低(P0.01)。通过研究表明高原植物芜菁对四氧嘧啶性糖尿病模型小鼠有明显的降血糖和抗氧化作用。     

虎杖苷通过激活TrkA抑制芬太尼诱导的海马神经元细胞凋亡

本文旨在研究虎杖苷对芬太尼麻醉后的神经保护作用及其潜在机制。分离小鼠海马神经元进行培养,并分别使用芬太尼,虎杖苷+芬太尼,虎杖苷+芬太尼+IgG,虎杖苷+芬太尼+MNAC13(TrkA封闭抗体)进行处理,然后通过TUNNEL检测细胞凋亡,通过免疫组织化学检测Caspase-9和原肌球蛋白受体激酶(Trk)受体的表达,并通过莫里斯水迷宫试验检测芬太尼,芬太尼和虎杖苷联合处理后小鼠的学习和记忆能力。结果显示,虎杖苷预处理后可以显著增加TrkA磷酸化并抑制细胞凋亡,而MNAC13可以显著抑制TrkA磷酸化并诱导细胞凋亡;此外,与对照组小鼠相比,芬太尼组小鼠学习和记忆能力显著下降,而虎杖苷处理可以显著提高小鼠学习和记忆能力。上述结果表明,虎杖苷可以抑制芬太尼诱导的海马神经元细胞凋亡,发挥神经保护作用,改善小鼠学习和记忆能力。     

桦褐孔菌与松口蘑菌粉降血糖作用的研究

为评价桦褐孔菌和松口蘑发酵菌粉的降血糖作用,本文观察了经不同浓度桦褐孔菌和松口蘑菌粉溶液灌胃后,小鼠正常血糖、给予葡萄糖小鼠以及四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的变化.结果表明:桦褐孔菌、松口蘑菌粉溶液(500、1000 mg/kg)对小鼠正常血糖值、正常小鼠糖耐量没有明显影响(P>0.05);对于糖尿病小鼠血糖,桦褐孔菌低剂量组(500 mg/kg)和桦褐孔菌高剂量组(1000 mg/kg)的降糖效果较为明显(P<0.01),用药前与用药后第21 d的血糖值分别为(14.94±1.85)、(10.43±2.22)和(14.89±1.65)、(10.17±2.14) mmol/L,降糖率分别为30.23% 和31.7%.桦褐孔菌和松口蘑菌粉对于小鼠正常血糖、正常小鼠糖耐量无明显影响,对于四氧嘧啶糖尿病小鼠具有一定的降血糖效果.     

龙眼核提取液的降血糖作用

以常规降血糖药(格列苯脲)为阳性对照,通过对正常小鼠和糖尿病小鼠进行降血糖治疗试验,研究了龙眼核提取液的降血糖作用。结果表明,龙眼核提取液能有效地缓解经四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠体内的高血糖症状,降血糖率达77.4%,具有良好的降血糖效果。     

老头草半仿生提取物的降血糖作用研究

本文利用尾静脉注射四氧嘧啶90mg/kg致糖尿病小鼠模型,研究了老头草半仿生提取物(LSBE)的降血糖作用,测定了LSBE对正常和糖尿病模型小鼠的血糖(Glu)、胆固醇(Chol)、甘油三酯(TG)、血清胰岛素(Ins)和胰淀粉酶(Amy)的影响。结果显示LSBE可使正常及模型小鼠血糖明显降低,并发现治疗8d后四氧嘧啶模型小鼠Ins、TG升高,Amy降低。     

虎杖苷对老年小鼠术后认知功能障碍及海马氧化应激和神经炎症的影响

摘要 目的：探讨虎杖苷对老年小鼠术后认知功能障碍及海马氧化应激和神经炎症的影响。方法：C57BL/6J雄性老年小鼠,18月龄,体重24~28 g,随机分为4组：假手术组（Sham组）、术后认知功能障碍组（POCD组）、低剂量虎杖苷组（PD1组）、高剂量虎杖苷组（PD2组）。Sham组老年小鼠仅接受水合氯醛麻醉,不行外科手术;POCD组老年小鼠接受腹部手术以制备POCD老年动物模型;PD1组小鼠制备POCD模型,并于术后即刻、24 h和48 h分别腹腔注射低剂量虎杖苷25 mg/kg;PD2组小鼠制备POCD模型,并于术后即刻、24 h和48 h分别腹腔注射高剂量虎杖苷50 mg/kg。使用Morris水迷宫行为学实验评估老年小鼠术后认知功能,使用Western blot法检测术后小鼠海马Nrf2、HO-1、HMGB1、Iba-1蛋白水平,检测海马活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量以反映术后海马氧化应激水平。结果：（1）与Sham组比较,POCD组老年小鼠术后逃离潜伏期显著增加（P<0.05）,穿越平台次数和目标象限停留时间下降（P<0.05）,海马Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,氧化应激产物ROS和MDA含量增加（P<0.05）,抗氧化酶SOD活性降低（P<0.05）,Iba-1和HMGB1蛋白表达水平增加（P<0.05）;（2）与POCD组比较,PD1组和PD2组小鼠术后逃离潜伏期缩短（P<0.05）,穿越平台次数和目标象限停留时间增多（P<0.05）,海马Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高（P<0.05）,ROS和MDA含量减少（P<0.05）,SOD活性增加（P<0.05）,Iba-1和HMGB1蛋白表达减少（P<0.05）。结论：虎杖苷可减轻老年小鼠术后认知功能损伤,缓解术后海马氧化应激和神经炎症,其机制可能与促进Nrf2/HO-1信号通路有关。     

蒲桃仁提取物降血糖作用的实验研究

采用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型及肾上腺素和葡萄糖引起的高血糖小鼠模型,观察蒲桃仁乙醇提取物对实验动物的降血糖效果。蒲桃仁乙醇提取物对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠模型、肾上腺素和葡萄糖引起的高血糖模型小鼠有明显的降血糖作用,但对正常小鼠血糖无明显影响。     

Effect of in vitro glucose and diabetic hyperglycemia on mouse kidney protein synthesis: relevance to diabetic microangiopathy

To test the possible roles of diabetic hyperglycemia, we studied the in vitro effect of increasing glucose concentrations (5.0-27.5 mmol/L) on protein synthesis (PS) of the kidneys from "adult" male albino Swiss mice. In mouse kidney cortex slices, PS (3H-leucine incorporation into trichloroacetic acid-precipitable material), measured as cpm/mg protein/45 minutes, was already stimulated by 5.0 mmol/L of glucose (+24%, P < .05). At supraphysiologic glucose concentrations, PS was stimulated by 48% at 8.8 mmol/L of glucose and 31% at 13.6 mmol/L of glucose (P < .05, compared with the value observed at 5.0 mmol/L of glucose). However, the highest glucose levels (15.4 mmol/L and 27.5 mmol/L) were no longer effective. Other substrates (1.25 mmol/L or 6.26 mmol/L palmitic acid and 100 mcmol/L sorbitol) were without effect. Similar results were obtained when data were expressed as cpm/mg DNA/45 minutes. In contrast to adult mice, "young" mice showed the maximum stimulatory effect (+86%, P < .02), with a glucose concentration still in the nondiabetic range (6.6 mmol/L). However, in the "older" mice maximum stimulation was observed in the presence of high glucose concentrations (15.4 mmol/L and 27.5 mmol/L) with 52% (P < .02) and 26% (P < .05) increases, respectively, vs the value recorded at 5 mmol/L of glucose. With regard to the in vivo effect of diabetic hyperglycemia, the renal PS of 3-day streptozotocin diabetic mice was moderately increased, whereas the liver PS was markedly reduced. The effects of in vitro glucose and in vivo diabetic hyperglycemia, as modulated by both the concentration of glucose and the age, may lead to diabetic renal hypertrophy and the increased formation/accumulation of glycoproteins, thus contributing to microangiopathy.     

虎杖提取物对人胰腺癌细胞系Panc-1增殖与凋亡的影响

目的:通过虎杖提取物干预人胰腺癌细胞系Panc-1,探讨虎杖提取物对人胰腺癌细胞增殖凋亡表型的影响。方法:制备不同浓度(0、10、50、100、150、200μg/m L)的虎杖提取物,将各个浓度的虎杖提取物分别加入待处理的人胰腺癌Panc-1细胞系中持续培养24 h后,利用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞株Panc-1的增殖活性;将100μg/m L虎杖提取物处理人胰腺癌细胞系Panc-124 h后,利用流式细胞术(FCM)检测其细胞周期及凋亡分布;100μg/m L虎杖提取物处理人胰腺癌细胞株Panc-124 h后,提取细胞总RNA及总蛋白,后续利用实时荧光定量PCR及Western blot分别检测人胰腺癌细胞株Panc-1增殖标志基因PCNA、CDK2及凋亡标志基因BAD、BAX的转录和翻译水平。结果:CCK-8结果表明虎杖提取物对人胰腺癌细胞系Panc-1细胞增殖的抑制率随浓度增加;流式细胞术结果显示虎杖提取物抑制人胰腺癌细胞增殖促进其凋亡;荧光定量PCR和Western blot结果显示虎杖提取物能使人胰腺癌细胞增殖标志基因PCNA,CDK2表达量下降,凋亡标志基因BAD,BAX表达量上升。结论:虎杖提取物能够抑制人胰腺癌细胞系Panc-1细胞增殖并促进其凋亡。     

产黄青霉菌株39B分离培养及其白藜芦醇代谢积累条件研究

在虎杖组织培养过程中获得1株产黄青霉菌株(Penicillum chrysogenum,39B)菌株,其发酵液经TLC和HPLC检测含白藜芦醇,对其培养条件及白藜芦醇积累特性进行了研究,通过正交优化试验得到该菌最佳培养条件:20g/L葡萄糖,2g/L硝酸铵,pH值7.0,28℃,100r/min。3mmol/L苯丙氨酸、Mg2+、Zn2+能促进其生长和白藜芦醇的积累,其白藜芦醇含量达8.6617μg/100mL。     

甘露寡糖及壳聚糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖血脂的影响

目的研究甘露寡糖和壳聚糖对四氧嘧啶致实验性糖尿病小鼠血糖、血脂的影响。方法随机选取70只健康小鼠,10只为正常对照组,其余由腹腔注射四氧嘧啶(150mg/kg),建立糖尿病模型,用快速血糖仪测血糖值,血糖值>11.1mmol/L的小鼠则为造模成功小鼠,将造模成功的小鼠随机分成5组,每组各12只。分别为模型对照组,高剂量、低剂量甘露寡糖处理组,高剂量、低剂量壳聚糖处理组。高低剂量分别以400mg/kg和200mg/kg糖溶液进行灌胃,空白组和模型组灌予等体积的生理盐水。12d后测定小鼠血清中血糖(GLU)、总胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)的浓度。结果甘露寡糖和壳聚糖使糖尿病小鼠的血糖与模型对照组相比有显著的降低,CHO和TG的浓度也显著降低,HDL-C显著升高;且高剂量的甘露寡糖和壳聚糖的降血糖、血脂效果优于低剂量。     

野生地参多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响

为了研究野生地参多糖对四氧嘧啶(ALX)致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响,利用四氧嘧啶(ALX)建立糖尿病小鼠模型,分别灌胃低(100 mg/(kg.d))、中(200 mg/(kg.d))、高(400 mg/(kg.d))剂量地参多糖溶液及阳性对照药盐酸苯乙双胍,正常对照组及糖尿病模型对照组则给等体积生理盐水。结果表明:连续给药14 d后,地参多糖对正常小鼠血糖无明显影响,100、200和400 mg/(kg.d)地参多糖均能明显降低ALX所致糖尿病小鼠高血糖,与糖尿病模型对照组相比,P<0.01;同时,相同剂量的地参多糖还能极显著降低ALX致糖尿病小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(P<0.01)。中、高剂量地参多糖使糖尿病小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著回升(P<0.05),但低剂量地参多糖对糖尿病小鼠血清HDL-C则无明显影响(P>0.05)。地参多糖能明显降低ALX致糖尿病小鼠高血糖及高血脂。     

熊果酸对糖尿病小鼠肾病的保护作用及机制研究

目的：观察熊果酸（UA）对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠肾病的影响,并探讨其作用机制。方法：昆明种小鼠一次性尾静脉注射四氧嘧啶（70mg／kg）,72h后将血糖高于13．9mmol／L者视为糖尿病模型。随机分为对照组、模型组和uA组（35mg/kg,i．g．）,连续给药8周。测定血糖,肾脏脏器系数,肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6）;HE染色观察肾组织病理变化。结果：模型组血糖、脏器指数升高;肾组织中SOD活力降低,MDA含量明显升高;TNE-α,IL-6表达增多;病理学显示模型组肾脏细胞萎缩,排列不整齐,可见炎症细胞浸润和间质增生,UA组明显改善上述变化。结论：熊果酸对四氧嘧啶致糖尿病小鼠肾脏损伤有明显的改善作用,其机制可能与降血糖,抗氧化作用和抑制炎症因子TNF-α、IL-6有关。     

人前胰岛素原基因裸质粒DNA肌肉注射可显著降低链脲佐菌素诱发糖尿病小鼠的血糖水平

通过基因治疗的方法补充胰岛素已用于实验性治疗胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)。本研究构建了含有重组人前胰岛素原基因的棵质粒DNA载体(pCMV—IN),将其肌肉注射入链脲佐菌素(STZ)诱发的糖尿病C57小鼠体内,并辅以电穿孔方法,以获得在体胰岛素转基因治疗。该质粒载体表达的胰岛素mRNA,可通过RT—PCR方法在转基因局部的骨骼肌组织中检测到。在接受pCMV—IN注射的糖尿病小鼠中,血浆胰岛素水平显著升高,达到了未注射STZ的正常对照小鼠的水平,且胰岛素的表达可持续至少35d。pCMV—IN质粒注射转基因治疗显著降低了糖尿病小鼠在第7至35d的血糖水平,其下降幅度约6mmol／L;转基因治疗也显著降低了严重糖尿病小鼠的死亡率,其第6周时的死亡率由100％降为37％。结果表明,直接肌肉注射含人前胰岛素原基因裸质粒可获得胰岛素的有效表达,显著降低糖尿病小鼠的血糖水平并降低严重糖尿病小鼠的死亡率。裸质粒注射胰岛素转基因治疗有望成为IDDM的一种有效治疗手段。     

中老年食蟹猴群体自发型糖尿病的筛选

筛选440只中老年偏胖食蟹猴群体中自发糖尿病个体,并探讨食蟹猴群体中糖尿病粗筛的方法。以调查基础血糖值为基础,推断疑似糖尿病血糖值,后经OGTT(口服糖耐量)和尿检结果验证该血糖值是否准确。结果显示中老年偏胖食蟹猴群体血糖值为(3.88±0.98)mmol/L,其中56只食蟹猴血糖值大于5.0mmol/L,被初步定为糖尿病个体。这些个体全部糖耐量异常,且36只(69.23%)出现尿糖阳性,证明血糖值大于5.0mmol/L可作为本群体食蟹猴糖尿病的粗筛标准。由于针对中老年偏胖食蟹猴群体,患病率为12.72%(56/440),高于我国糖尿病患病率(9.7%)。虽然该实验的糖尿病血糖指标并不适用于所有食蟹猴群体,但是该筛选的流程简单快捷,对动物损伤小,可适用于大群体糖尿病的筛选。     

Antioxidant activity of extract from Polygonum cuspidatum

Numerous diseases are induced by free radicals via lipid peroxidation, protein peroxidation and DNA damage. It has been known that a variety of plant extracts have antioxidant activities to scavenge free radicals. Whether Polygonum cuspidatum Sieb. et Zuce has antioxidant activity is unknown. In this study, dried roots of Polygonum cuspidatum were extracted by ethanol and the extract was lyophilized. Free radical scavenging assays, superoxide radical scavenging assays, lipid peroxidation assays and hydroxyl radical-induced DNA strand scission assays were employed to study antioxidant activities. The results indicate that the IC50 value oí Polygonum cuspidatum extract is 110 microg/ml in free radical scavenging assays, 3.2 microg/ml in superoxide radical scavenging assays, and 8 microg/ml in lipid peroxidation assays, respectively. Furthermore, Polygonum cuspidatum extract has DNA protective effect in hydroxyl radical-induced DNA strand scission assays. The total phenolics and flavonoid content of extract is 641.1 +/- 42.6 mg/g and 62.3 +/- 6.0 mg/g. The results indicate that Polygonum cuspidatum extract clearly has antioxidant effects.     

定期血糖监测对糖尿病患者血糖控制及生活方式的影响

目的:探讨定期血糖监测对糖尿病血糖控制及生活方式的影响。方法:随机抽取我中心2010-2011年度确诊的老年2型糖尿病患者110例,随机分为干预组和对照组,每组各55例;2组均接受正规降糖药物治疗及生活方式指导,干预组每周进行一次血糖监测,每3个月测一次糖化血红蛋白,对照组按患者意愿测定血糖指标,通过12个月的观察,研究两组患者在血糖控制及生活方式上的差异。结果:干预组患者空腹血糖(FPG)由定期监测血糖前的(7.26±1.36)mmol/L降至(6.68±1.10)mmol/L;餐后2小时血糖(2HPG)由定期监测血糖前的(12.34±2.29)mmol/L降至(11.09±1.98)mmol/L;糖化血红蛋白由监测前的(7.99±1.61)%降至(6.60±0.87)%;差异具有显著性(P<0.05);生活方式亦有明显改善,差异具有显著性(P<0.05);而对照组的改变不如干预组。结论:通过定期血糖监测可以有效地控制血糖、糖化血红蛋白,促使老年2型糖尿病患者改变不良生活方式。