五种常见嗜尸性蝇类的分子鉴定

为了解决法医学人员对于嗜尸性蝇类的鉴定难题,对中山市、广州市及西安市5种常见嗜尸性蝇类共17个样本,对其线粒体COⅠ基因的348 bp大小片段进行了RFLP和DNA序列分析,采用ABI377测序仪测序,DNASTAR软件预测限制性位点,DdeⅠ, DraⅠ和HinfⅠ3种限制性内切酶消化,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切结果,MEGA3.0软件包进行序列分析和构建系统发育树。结果表明： 采用mtDNA扩增结合银染技术和DNA序列分析,均可以方便快捷地进行上述三地5种常见嗜尸性蝇类的种类鉴定。本文结果为法医昆虫学中嗜尸性昆虫DNA鉴定数据库的建立提供了数据资料。     

我国嗜尸性蝇类的鉴别、发育及演替研究现状与分析

嗜尸性蝇类是法医昆虫学调查中最重要的目标,作为早期到达尸体并主要促成尸体组织腐解的昆虫,对死亡时间的推断,特别是腐败尸体死亡时间的推断具有重大意义。本文针对我国嗜尸性蝇类的主要种类及形态识别、各种类生长发育、在尸体上的演替进行了综述。     

北京地区7种常见嗜尸性蝇类的COI基因序列分析及DNA条形码的建立

嗜尸性蝇类在命案死亡时间和现场推断方面有着十分重要的应用, 而DNA 条形编码技术能摆脱对虫卵和幼虫的饲养以及后续物种鉴定方面专业知识的依赖, 有助于实现现场采集蝇类样本的快速鉴定。本研究采集了北京地区7个嗜尸性蝇类优势种共77个个体的样本, 测定了所有个体线粒体DNA 上细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COI）基因1 120 bp的序列。基于序列的系统发生分析显示, 同一物种不同个体的序列均以高达99%的支持值聚集在一起。序列间的分歧统计表明这些蝇类在物种内的个体分歧不超过1%, 而不同物种间的净分歧均超过7.74%, 最高可达14.85%。滑动窗口分析表明, 在整个序列区段种间差异位点存在较平均的分布。通过测定COI基因的序列, 建立了北京地区7个嗜尸性蝇类优势种的DNA条形码, 据此实现了对这些物种准确、快速、简单的区分和鉴定, 同时也为后续应用于物种鉴定的种属特异性位点之筛选提供了基础数据。     

双向凝胶电泳图谱用于常见尸食性蝇类初孵幼虫的鉴别

双向凝胶电泳分析技术已在生物科学各领域被广泛应用,蛋白质组作图的意义已经日益显现。通过对4种常见尸食性蝇类初孵幼虫蛋白质组双向凝胶电泳和图象分析,发现各种类间双向凝胶电泳图谱差异显著,并对相应的等电点和相对分子量进行聚类和判别分析,结果表明,建立合适的尸食性蝇类初孵幼虫的双向凝胶电泳图谱可用于鉴别形态学极易混淆的昆虫种类。图4参17     

药（毒）物对尸食性蝇类生长发育影响的研究进展

药（毒）物对尸食性蝇类生长发育影响是法医昆虫毒理学领域里一个十分重要的研究方向,其研究结果可对与药（毒）物相关死亡案件的死亡时间作出修正。随着近年来全球毒品及药物滥用情况的日趋严重,其所导致的死亡案件也越来越多。这类案件常常需要应用尸食性蝇类生长发育历期来推算死后经历时间（postmortem interval, PMI）。为了阐明该领域的研究进展以及未来研究的焦点和难点,本文在阐述法医昆虫毒理学概念和特点的基础上,按照不同的药（毒）物分类,对近年来药（毒）物对尸食性蝇类生长发育影响在国内外的研究进展进行了综述。研究表明,某些药（毒）物对尸食性蝇类生长发育具有一定的影响,且这种影响存在种属差异。目前,该领域的研究尚限于宏观现象观察阶段,其研究范围在不断拓宽,既有的研究也在进一步深化,但还有许多问题有待进一步探讨。     

贵州省尸食性蝇类的种类和分布

2000～2002年在贵州不同地区和不同海拔高度,设置采样点12个,在每个季度中间月份的中旬日用诱饵法采集一次尸食性蝇类标本,分析了贵州地区与尸体有关的蝇类及其分布。采集到的尸食性蝇类经鉴定隶属于5科15属25种,其中12种是在贵州首次发现,文中列出了尸食性蝇类名录,分析了它们在贵州的地理分布和季节变化,丰富了昆虫学和法医昆虫学的内容,为法医学推测死者的死亡时间提供了参考依据。     

湖南省永州地区夏秋季常见嗜尸性昆虫的研究

为了研究湖南省永州地区夏秋季常见嗜尸性昆虫及螺类的种类及其群落演替,运用观察法研究2007—2009年永州地区夏秋季家兔尸上常见嗜尸性昆虫种类变化及其演替。结果表明,该地区家兔尸体上发现部分昆虫纲和腹足纲的嗜尸性昆虫,昆虫纲主要涉及双翅目和鞘翅目的部分昆虫,其中双翅目6科14种,主要有蝇科的孕幼家蝇、斑蹠黑蝇、厚环黑蝇;丽蝇科的丝光绿蝇、叉叶绿蝇、亮绿蝇、大头金蝇和绯颜裸金蝇、白头裸金蝇;麻蝇科的棕尾别麻蝇、酱亚麻蝇;鼓翅蝇科1种;潜蝇科的Phytomyza thalictrella;果蝇科的Drosophila cuaso;鞘翅目5科8种,主要有大黑葬甲、Silpha carinata、Nicrophorus fossor、双色葬甲;蜣螂科的金龟子;步甲科的毛婪步甲和蠋步甲;拟步甲科;隐翅甲科的大黑隐翅虫、小隐翅虫;膜翅目2科3种,蚁科的路舍蚁;胡蜂科的墨胸胡蜂、黑盾胡蜂;鳞翅目的丝兰蛾;腹足纲的钉螺。上述嗜尸性昆虫及螺类在兔尸上出现的时间和部位表现出较强的规律性。研究结果可望为法医在湖南省永州地区对尸体的死亡时间和地点推测提供依据。     

mtDNA中COⅠ分子标记在常见食尸性蝇类鉴定中的应用

死后不同时间,在尸体上出现不同种类食尸性蝇类的演替规律,可用于准确推断死亡时间。传统上仅依据蝇类形态学特征来判断种属,但由于蝇类的形态结构复杂和种间形态差异微小等特点,对蝇类尤其是对蝇类幼虫的种属鉴别很难。因此应用分子生物学方法对食尸性蝇类及其幼虫进行种属鉴定非常重要。本研究主要是利用此方法对我国西部部分地区常见双翅目食尸性蝇类包括：开普黑蝇、大头金蝇、丝光绿蝇及部分卵,铜绿蝇、棕尾别麻蝇及部分幼虫和蛹的线粒体DNA(mtDNA)上细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ(COⅠ)中278 bp的基因序列进行鉴别。除个别蝇类如丝光绿蝇与铜绿蝇外,该方法均能有效地将上述食尸性蝇类鉴定到种属水平。在我国,它将成为法医鉴别食尸性蝇类种属的可靠依据。     

沈阳地区室内常见尸食性蚤蝇幼期识别

利用尸食性蝇类发育生物学推断死后间隔时间的前提是对其幼期种属的准确鉴定。本文对沈阳地区室内常见的4种尸食性蚤蝇幼期的主要形态特征进行了描述。结果表明：根据其口器、体壁突起、气门和呼吸角等特征不仅可以区分虫龄,还可以鉴别4种蚤蝇。     

肥须亚麻蝇幼虫不同发育阶段气门形态学变化

为了满足实际工作中利用蝇类幼虫日龄推断尸体死后间隔时间的需求,本文采用显微镜观察不同龄期肥须亚麻蝇 Parasarcophaga crassipalpis (Macquart)幼虫气门的形态学变化,通过计算机图像分析系统对幼虫的前、后气门等可用于判断幼虫生长发育的形态学指标进行测量。结果表明：肥须亚麻蝇幼虫前、后气门随时间而发生规律性的变化,幼虫前气门色素管部的平均光密度及其长宽比,以及后气门的平均光密度这 3 项指标是推算幼虫日龄较理想的指标,对法医学中尸体死亡时间的推测具有重要的指示意义。此外,叠龄期作为幼虫发育的必经阶段,可为特殊时间点的推测提供可靠依据。     

巨尾阿丽蝇幼虫发育形态学及其在死者死亡时间推断中的应用

为了明确对于凶杀案件中死亡时间判断有重要意义的蝇类幼虫的形态特征变化规律,分别在12、16、20、24和28℃下饲养了巨尾阿丽蝇Aldrichina grahami (Aldrich)并定期取样,显微镜下观察其形态变化。结果表明：后气门形态、表皮、消化道等随时间而发生的规律性变化可作为幼虫日龄的标志。据此将幼虫期划分为：1龄期、2龄早期、2龄后期、3龄叠气门期、开环期、浅闭环期、深闭环期、圆锥期。到达上述各发育阶段的时间决定于温度。     

A simple, sterile food source for rearing the larvae of Lucilia sericata (Diptera: Calliphoridae)

arvae of the sheep blowfly Lucilia sericata (Meigen) were reared on various mixtures of puréed liver, agar, brewer's yeast and trypsin, in order to develop a simple, sterile, tissue-based diet. Growth and survival rates of larvae reared on a sterile 1:1 mixture of puréed liver with 3% Bacto agar equalled or exceeded those of larvae reared on raw liver. The addition of yeast and/or trypsin to the medium was of no additional benefit. This sterile, homogenous, tissue-based substrate offers a simple, convenient, inexpensive growth medium for rearing larvae for maggot therapy, and for testing the effects of various chemicals and dietary constituents on necrophagous insect larvae. It may be useful, therefore, in studies of myiasis, forensic entomology, and toxicology. This rearing medium also has the advantage that it can be stored for many months at room temperature without progressive decomposition or offensive odour.     

Diptera and Coleoptera of potential forensic importance in southeastern Brazil: relative abundance and seasonality

Abstract. To determine the species of Diptera and Coleoptera that visit and breed in carrion, four experiments, one for each season, were conducted from November 1992 to October 1993 in the vicinity of Campinas city, Southeastern Brazil. For each experiment two pigs weighing c. 10 kg were killed with a blow to the head with a blunt metallic object and immediately exposed, one in the shade and the other under sunlight. Adult insects and larvae leaving the carcass to pupate were collected daily. In addition, female blowflies were dissected in order to determine the stage of ovarian development. Five species of Calliphoridae: Chrysomya albiceps, C.megacephala, C.putoria, Phaenicia eximia and Hemilucilia segmentaria; three of Sarcophagidae: Pattonella intermutans, Liopygia ruficornis and Adiscochaeta ingens , and three of beetles: Dermestes maculatus, D. peruvianus (Dermestidae) and Necrobia rufipes (Cleridae), were considered of potential forensic importance, for they were able to breed in carrion exposed to natural environmental conditions. In addition, several fly species showed a definite seasonal pattern, with the Calliphoridae breeding more frequently during the warmer months of the year, and the Sarcophagidae preferring the cooler periods.