播娘蒿下胚轴高频率再生植株因素的研究

以播娘蒿（Descurainia sophia)下胚轴为外植体,研究影响其分化的若干因素。结果表明：用附加2,4－D的培养基,对下胚轴切段预培养5d可提高分化频率;1.7mg/L AgNO3对分化出芽有很大促进作用,最佳激素组合为2.0mg/L 6-BA 0.2mg/L NAA;黄化苗的下胚轴比绿苗的下胚轴对激素反应更敏感,最高分化频率可达86.05%。再生芽转至1／2MS 0.5mg/L NAA 0.5mg/L IBA的培养基中,生根率100％。     

甘蓝型油菜下胚轴和带柄子叶再生体系研究

以甘蓝型油菜野油19号的下胚轴和带柄子叶为外植体,研究其下胚轴和带柄子叶在不同浓度激素配比下的分化率及再生频率的变化。该品系的油菜下胚轴和带柄子叶在1.5 mg/L的2,4-D中预培养4 d后,转入分化培养基中,其愈伤组织形成早,发生快,再生频率和分化频率均较高。其中,下胚轴转入MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基中的分化率和再生频率最高,再生频率达到86.67%;带柄子叶外植体的再生频率要比下胚轴的再生频率低,在MS+4 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA的分化培养基中芽的再生频率为46.67%。本研究初步建立了甘蓝型油菜野油19号的高频率再生体系。     

亚麻下胚轴离体培养和转化的研究

报道了亚麻（Ｌｉｎｕｍ　ｕｓｉｔａｔｉｓｓｉｍｕｍ）的高频率植株再生和细胞转化。亚麻下胚轴切段培养在ＭＳＢ分化培养基上,诱导分化出不定芽。最佳的激素组合是ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,分化频率可达９７％。在附加ＢＡ１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ培养基上,亚麻下胚轴外植体的不定芽分化频率也可达９０％以上。用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｈａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）感染亚麻下胚轴外植体,在含卡那霉素５０ｍｇ／Ｌ的选择培养基上筛选获得卡那霉素抗性苗,并检测到ＧＵＳ基因活性表达。表明它们是转化植株,转化频率约为２％。     

牛蒡组织培养和高频植株再生的研究

通过对牛蒡(A rctium lapp a L.)不同外植体、不同激素配比的比较研究,建立了牛蒡离体培养高效植株再生体系.牛蒡子叶与下胚轴切段在含2.0 m g/L 2,4-D和0.5~2.0 m g/L BA的M S培养基中愈伤组织诱导率可以达到87%~100%;在1.0~3.0 m g/L NAA和0.5~2.0 m g/L BA的M S培养基上通过愈伤组织间接分化或外植体直接分化形成不定芽,其中愈伤组织分化率可达100%;下胚轴的分化率明显高于子叶,在1.0 m g/L NAA和1.0 m g/L BA的M S培养基上下胚轴直接分化率达77.3%.组织学观察发现牛蒡再生有器官发生和体细胞胚发生两种途径.将生长状态良好的不定芽转至含1.0 m g/L IBA和1.0 m g/L NAA的1/2 M S培养基上生根,移栽,成活率达到93.3%.从诱导愈伤组织到组培苗在珍珠岩中过渡成活,大约需要13周.组培苗次年开花并结实,生长形态特征正常.     

砧板柚的组织培养

1植物名称砧板拍仪Vr。rand。）。2材料类别实生苗的带顶芽茎段、上胚轴切段、子叶节段（带部分上胚袖和下胚轴）和很段。3培养条件培养基为：（）诱导芽增殖及继代用MS＋BA2mg／L（单位下同）＋NAA0．1。（2）诱导生根用1／2MS（大量元素减半）＋IBA2＋NAA0．5。上述培养基均含白糖4％和琼脂0．65％,PH58～6。培养室温度24士ZC”。光照度约1000！X。光照约12h／d。4生长与分化情况4．1芽苗的分化与增值将4种外植体各25段接种子培养基（l）中,比较各种外植体芽分化能力的差异。结果子叶节段在接种后gd腋芽首先萌发伸长,继后分化…     

不同激素对花生离体分化的影响

对TDZ和2,4-D等激素在花生成熟胚外植体分化中的影响进行了研究.结果表明,花生成熟胚3～5 d龄实生苗的幼叶和胚轴在低浓度TDZ的诱导下,可分化产生高频不定芽和少量体细胞胚,转到无激素MS培养基或MS BA 0.5 mg/L NAA 0.4 mg/L的培养基后形成丛生苗.丛生苗分离后转入含1/2 MS(大量元素) IBA 0.4 mg/L的培养基中诱导生根,可形成完整的再生植株.幼叶分化率高于胚轴,但胚轴分化成苗速度快.无菌水浸泡16～24 h的胚轴在5～ 30 mg/L 2,4-D的诱导下,分化产生低频不定芽;而胚叶则产生高频体细胞胚,但畸形较严重.     

转异源abp基因烟草的叶外植体不同培养中的形态发生

以转正义和反义abp基因[生长素结合蛋白（ABP）的基因]烟草及对照的叶外植体为材料,在附加2mg／L或1mg／L的6－BA和不同浓度的NAA的MS培养基上进行不定芽分化试验。在较低NAA浓度条件下,转正义abp基因烟草（SE2）的叶外植体分化的不定芽数高于对照（SR1）和转反abp基因烟草（AS3）,说明SE2对生长素的敏感性比SR1和AS3高;而在较高NAA浓度条件下,AS3分化的不定芽数大于SE2和SR1,说明AS3对生长素的敏感性比SE2和SR1低。在培养基中加入生长素极性运输抑制剂HFCA后,不定芽分化受到抑制,分化不定芽中部分叶的形态由两侧对称性生长转变为形成不对称的喇叭状叶。在HFCA浓度为0－7．5mg／L条件下,SE2的喇叭叶发生频率明显高于SR1和AS3,其中SE2和SR1的喇叭叶发生频率分别在HFCA浓度为6．5和7．5mg／L时达到最高以后保持平稳,而AS3的喇叭叶发生频率在HFCA处理浓度直到15mg／L时仍保持上升趋势。这些结果说明ABP具有结合外源生长素,从而促进芽器官分化的功能,同时可能作为生长素受体参与了生长素的极性运输。     

豌豆组织培养中的器官发生及影响分化频率的几个因素

在豌豆(Pisum sativum L.)的组织培养中,研究了影响器官分化频率的几个因素。试验结果表明,基本培养基中B_5较好,补加NAA0.1毫克/升和BA0.5-2毫克/升的B_5培养基明显促进芽的分化,但抑制根的形成;培养基蔗糖浓度从2%提高到5%对芽的诱导有显著促进作用;氮素含量的最适浓度为840毫克/升,特别是NO_3~-与NH_4~ 的浓度比为8∶1时,芽的诱导频率可达100%,不同的外植体器官分化能力不同,苗端最好,上胚轴次之,子叶仅产生少数芽,而下胚轴没有分化。     

陇东地区野生紫花苜蓿植株再生体系的建立

以陇东地区野生紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,MS为基本培养基,研究划破种皮以及不同生长调节物质种类与配比对愈伤组织诱导和分化影响的结果表明：划破种皮可提高种子发芽率;在外植体中下胚轴的愈伤组织诱导率最高,达92.2%;最佳愈伤组织诱导培养基为MS＋2,4-D2.0mg·L^-1（单位下同）＋NAA1.0＋2.5%蔗糖＋0.6%琼脂,最佳分化诱导培养基为MS＋KT0.5＋NAA0.3＋2.5%蔗糖＋0.6%琼脂,成苗培养基为1/2MS＋NAA0.1＋1%蔗糖＋0.6%琼脂。     

抗氧化剂对农杆菌介导的大豆下胚轴GUS基因瞬时表达的影响

 大豆（Glycine max）下胚轴作为大豆遗传转化的外植体材料,能快速高频再生不定芽。然而,在遗传转化过程中褐化影响基因转化效率。在该研究中,我们用含有GUS染色基因和hpt II（Hygromycin phosphotransferase II）筛选基因的农杆菌(Agrobacteri um tumefaciens) LBA4404侵染大豆下胚轴,并用组织化学定位法测定了GUS基因的瞬时表达,以确定大豆的优化基因转化条件。 结果显示,在共培养基中加入硫代硫酸钠、L_半胱氨酸以及二硫苏糖醇等抗氧化剂,可以有效地抑制大豆下胚轴在组培过程中褐化的发生,并大幅度提高农杆菌在下胚轴的瞬时表达率。这些结果说明抗氧化剂可以降低这种影响并有效提高基因转化效率。